免疫組織化學(xué)技術(shù)介紹(已修改)
2025-02-01 03:57 本頁面
【正文】 免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)技術(shù) 西南醫(yī)院病理學(xué)研究所西南醫(yī)院病理學(xué)研究所馮俊明馮俊明? 免疫組織化學(xué)（簡稱免疫組化）是組織化學(xué)的免疫組織化學(xué)（簡稱免疫組化）是組織化學(xué)的一種，它是利用已知的特異性抗體或抗原能特一種，它是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結(jié)合的特點(diǎn)，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合異性結(jié)合的特點(diǎn)，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑，如酶、金屬離子后的特異性抗體上的顯示劑，如酶、金屬離子、同位素等，顯示一定的顏色，并借助顯微鏡、同位素等，顯示一定的顏色，并借助顯微鏡觀察其顏色的變化，從而在抗原抗體結(jié)合部位觀察其顏色的變化，從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。? 近十年來，免疫組化技術(shù)發(fā)展很快，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)近十年來，免疫組化技術(shù)發(fā)展很快，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)和臨床研究中發(fā)揮著重要的作用，對疾病的基礎(chǔ)和臨床研究中發(fā)揮著重要的作用，對疾病，尤其是對腫瘤的診斷、鑒別診斷及發(fā)病機(jī)理的，尤其是對腫瘤的診斷、鑒別診斷及發(fā)病機(jī)理的研究提供了強(qiáng)有力的手段，但隨著免疫組化標(biāo)記研究提供了強(qiáng)有力的手段，但隨著免疫組化標(biāo)記物的增多和利用，原為特異的標(biāo)記物并非絕對特物的增多和利用，原為特異的標(biāo)記物并非絕對特異，而且出現(xiàn)交叉反應(yīng)和異常表達(dá)的情況日益增異，而且出現(xiàn)交叉反應(yīng)和異常表達(dá)的情況日益增多。故對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的意義多。故對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的意義 不能絕對化不能絕對化 ，應(yīng)在光鏡觀察組織形態(tài)的基礎(chǔ)上，合理使用免疫應(yīng)在光鏡觀察組織形態(tài)的基礎(chǔ)上，合理使用免疫組化技術(shù)，審慎判斷其標(biāo)記的意義。組化技術(shù)，審慎判斷其標(biāo)記的意義。 免疫組化標(biāo)記的形態(tài)學(xué)特征免疫組化標(biāo)記的形態(tài)學(xué)特征 ? 免疫組化標(biāo)記具有形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，若能熟免疫組化標(biāo)記具有形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，若能熟練掌握則有助于對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的練掌握則有助于對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的正確判斷，現(xiàn)擇要分述如下：正確判斷，現(xiàn)擇要分述如下： 一、陽性標(biāo)記色度特征一、陽性標(biāo)記色度特征 ? 免疫組化標(biāo)記時細(xì)胞陽性著色程度取決于抗原含量、分布密免疫組化標(biāo)記時細(xì)胞陽性著色程度取決于抗原含量、分布密度和標(biāo)記方法及其敏感性。一般而言，抗原含量越多，分布度和標(biāo)記方法及其敏感性。一般而言，抗原含量越多，分布密度越高，標(biāo)記方法越敏感，陽性結(jié)果顯色則越強(qiáng)。根據(jù)陽密度越高，標(biāo)記方法越敏感，陽性結(jié)果顯色則越強(qiáng)。根據(jù)陽性標(biāo)記的顯色程度分為：性標(biāo)記的顯色程度分為： 淡黃色淡黃色 ，提示為弱陽性；，提示為弱陽性； 棕黃色棕黃色 ，為中等度陽性；為中等度陽性； 棕黑色棕黑色 ，示為強(qiáng)陽性。在結(jié)果判斷中，后兩，示為強(qiáng)陽性。在結(jié)果判斷中，后兩者較有意義，可作為判斷依據(jù)。而前者除考慮標(biāo)本處理和方者較有意義，可作為判斷依據(jù)。而前者除考慮標(biāo)本處理和方法學(xué)因素外，可能與細(xì)胞只有輕度異常表達(dá)，或某些細(xì)胞攝法學(xué)因素外，可能與細(xì)胞只有輕度異常表達(dá)，或某些細(xì)胞攝取了周圍組織抗原之故。取了周圍組織抗原之故。 二、陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征二、陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征 ? 免疫組化標(biāo)記中，陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映免疫組化標(biāo)記中，陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映抗原在細(xì)胞中的定位和分布情況。在診斷中陽抗原在細(xì)胞中的定位和分布情況。在診斷中陽性細(xì)胞以擬標(biāo)記的細(xì)胞為前提，陽性表達(dá)必須性細(xì)胞以擬標(biāo)記的細(xì)胞為前提，陽性表達(dá)必須在細(xì)胞特定的抗原部位，若不在抗原所在部位在細(xì)胞特定的抗原部位，若不在抗原所在部位的陽性表達(dá)和非目標(biāo)細(xì)胞即使陽性也不應(yīng)作為的陽性表達(dá)和非目標(biāo)細(xì)胞即使陽性也不應(yīng)作為判斷依據(jù)。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽性顆粒判斷依據(jù)。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽性顆粒沉淀部位可分為以下沉淀部位可分為以下 5種類型：種類型： ? 陽性顆粒主要分布于細(xì)胞膜表陽性顆粒主要分布于細(xì)胞膜表面，形成一薄層棕黃色顆粒包繞整個細(xì)面，形成一薄層棕黃色顆粒包繞整個細(xì)胞。此類型常見于某些膜抗原，如上皮胞。此類型常見于某些膜抗原，如上皮膜抗原（膜抗原（ EMA）、白細(xì)胞共同抗原（）、白細(xì)胞共同抗原（LCA）及）及 B細(xì)胞、細(xì)胞、 T細(xì)胞、粒細(xì)胞相關(guān)抗細(xì)胞、粒細(xì)胞相關(guān)抗原（原（ GAA）和）和 Ki1等。等。 ? 陽性顆粒定位于細(xì)胞核，呈均陽性顆粒定位于細(xì)胞核，呈均勻分布或位于核膜下，有的呈小斑塊狀勻分布或位于核膜下，有的呈小斑塊狀不規(guī)則分布。此多見于增殖細(xì)胞核抗原不規(guī)則分布。此多見于增殖細(xì)胞核抗原、 Ki67及激素受體中雌激素受體（及激素受體中雌激素受體（ ER））、孕激素受體（、孕激素受體（ PR）和基因）和基因 p53等。等。? 陽性顆粒主要分布于細(xì)胞漿。大部分抗原陽性顆粒主要分布于細(xì)胞漿。大部分抗原均屬于此種類型，如細(xì)胞角蛋白、波形蛋白、結(jié)蛋均屬于此種類型，如細(xì)胞角蛋白、波形蛋白、結(jié)蛋白、神經(jīng)絲蛋白、肌紅蛋白、白、神經(jīng)絲蛋白、肌紅蛋白、 α1抗胰糜蛋白酶及前抗胰糜蛋白酶及前列腺特異性抗原（列腺特異性抗原（ PSA）等。依據(jù)抗原在胞漿內(nèi)分）等
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