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hplc常見故障排除及維護(已修改)

2025-08-28 02:14 本頁面
 

【正文】 HPLC 常見故障排除與維護 第一部分: 色譜儀常見故障分析及排除 LC100液相系統(tǒng)示意圖 確定故障現(xiàn)象 用排除法尋找問題原因 分析可能引起問題的因素 用基準的方法驗證系統(tǒng) 從簡單問題入手 色譜故障排除步驟 尋求幫助 一次只變化一個因素,以使你能夠確認所變因素與問題之間的關(guān)聯(lián)。 養(yǎng)成良好的記錄習慣。將來利用記錄可以幫助發(fā)現(xiàn)問題,強化預防 保養(yǎng)工作。 嘗試預測將來可能發(fā)生的問題。利用成功的故障排除經(jīng)驗。 恢復原狀。如果使用更換組件的方法來查找問題之所在,完畢后應 將原有完好組件安裝回原處。否則,換下來的組件將來很難再利用, 造成浪費。 確認問題至少發(fā)生兩次以上。如果問題不重復出現(xiàn),很難證實其確 實存在。 色譜故障排除經(jīng)驗規(guī)則 引起 HPLC發(fā)生問題的潛在因素 HPLC 常見故障因素 環(huán) 境 電源 接地線 溫度 濕度 清潔程度 化學品 色譜柱 保護柱 溶劑 樣品 儀 器 泵 進樣器 檢測器 數(shù)據(jù)處理單元 HPLC 常見故障因素(工作環(huán)境) ? 電源 容量、穩(wěn)定性 ? 地線 系統(tǒng)統(tǒng)一電源 ,統(tǒng)一接地 ? 濕度 對光學部件的影響尤為嚴重 ? 溫度 空調(diào)機的影響 ? 清潔 不要輕視灰塵的影響 工作環(huán)境的影響 HPLC 常見故障因素(化學品) ? 已損壞的保護柱、色譜柱 ? 所用溶劑、試劑的品質(zhì) ? 化學品使用不當帶來的影響 ? 樣品前處理方法不當帶來的影響 ? 實驗前的準備和結(jié)束后的收尾工作 化學品的影響 友情提示:保持良好的色譜柱使用習慣 ? 使用新鮮的水溶液,并考慮使用生物穩(wěn)定劑(如疊氮化鈉) ? 儲存色譜柱時,應沖凈緩沖鹽,并用有機溶劑保護色譜柱(乙腈) ? 避免外力損傷色譜柱:彎曲、跌落或?qū)⒔宇^擰的過緊 ? 完全潤濕在運輸中變干的色譜柱 ? 對含有保留性較強的雜質(zhì)組分的樣品要進行預處理 ? 定期用強極性的溶劑清洗色譜柱 ? 清除柱填料的局限性 ? 了解溶劑對樣品的溶解性及分離的影響 ? pH ? 溫度 ? 化學兼容性 ? 在使用前過濾溶劑 友情警示: 使用緩沖液的注意事項 緩沖液可以提供離子平衡的反離子,并使流動相保持一定的離子強度和 pH值,減少拖尾。但是使用緩沖液要注意幾點: 避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用。 緩沖液最好要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,隔天或放置長時間實驗時會有很多怪現(xiàn)象發(fā)生。 實驗后不可用有機溶劑直接過度,有機溶劑會處使鹽類析出,造成液路或色譜柱堵塞,可用 95: 5的水甲醇沖洗。 使用緩沖液要及時掌握 pH范圍,做到胸中有數(shù)。 清洗液路和柱子時,有溫控可加熱到 30攝氏度易于沖洗。 長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,可考慮一定周期用 10%硝酸沖洗一下液路(拆下柱子,走 30ml,再用 5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞。 選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。 HPLC 常見故障因素(泵) LCP100 高壓恒流泵 HPLC 常見故障因素(泵) 正確使用您的色譜泵: ? 使用高品質(zhì)的溶劑 ? 溶劑過濾(注意濾膜的選擇) ? 脫氣溶劑 ? 柱塞桿清洗 ? 注意調(diào)節(jié)流量時的變化速度 HPLC 常見故障因素(泵) ?注意流動相組分 的互溶性! ?使用正確的密封 圈清洗溶劑! 泵 頭 泵腔體 吸入閥導通 活塞向后運動 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥關(guān)閉 液流方向 泵的工作原理: ① 吸液過程 泵 頭 泵腔體 吸入閥關(guān)閉 活塞向前運動 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥導通 液流方向 泵的工作原理: ② 排液過程 HPLC 常見故障因素(泵頭) 柱塞桿 密封圈 HPLC 常見故障因素(泵頭) 出口單向閥 進口單向閥 泵頭 泵 頭 吸入閥寶石球與球坐粘連,吸入閥不能導通 活塞向后運動 泵 座 排出閥關(guān)閉 液
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