hplc常見故障排除及維護(hù)(已修改)
2025-08-28 02:14 本頁(yè)面
【正文】 HPLC 常見故障排除與維護(hù) 第一部分： 色譜儀常見故障分析及排除 LC100液相系統(tǒng)示意圖 確定故障現(xiàn)象 用排除法尋找問(wèn)題原因 分析可能引起問(wèn)題的因素 用基準(zhǔn)的方法驗(yàn)證系統(tǒng) 從簡(jiǎn)單問(wèn)題入手 色譜故障排除步驟 尋求幫助 一次只變化一個(gè)因素，以使你能夠確認(rèn)所變因素與問(wèn)題之間的關(guān)聯(lián)。 養(yǎng)成良好的記錄習(xí)慣。將來(lái)利用記錄可以幫助發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，強(qiáng)化預(yù)防 保養(yǎng)工作。 嘗試預(yù)測(cè)將來(lái)可能發(fā)生的問(wèn)題。利用成功的故障排除經(jīng)驗(yàn)。 恢復(fù)原狀。如果使用更換組件的方法來(lái)查找問(wèn)題之所在，完畢后應(yīng) 將原有完好組件安裝回原處。否則，換下來(lái)的組件將來(lái)很難再利用， 造成浪費(fèi)。 確認(rèn)問(wèn)題至少發(fā)生兩次以上。如果問(wèn)題不重復(fù)出現(xiàn)，很難證實(shí)其確 實(shí)存在。 色譜故障排除經(jīng)驗(yàn)規(guī)則 引起 HPLC發(fā)生問(wèn)題的潛在因素 HPLC 常見故障因素 環(huán) 境 電源 接地線 溫度 濕度 清潔程度 化學(xué)品 色譜柱 保護(hù)柱 溶劑 樣品 儀 器 泵 進(jìn)樣器 檢測(cè)器 數(shù)據(jù)處理單元 HPLC 常見故障因素（工作環(huán)境） ? 電源 容量、穩(wěn)定性 ? 地線 系統(tǒng)統(tǒng)一電源 ,統(tǒng)一接地 ? 濕度 對(duì)光學(xué)部件的影響尤為嚴(yán)重 ? 溫度 空調(diào)機(jī)的影響 ? 清潔 不要輕視灰塵的影響 工作環(huán)境的影響 HPLC 常見故障因素（化學(xué)品） ? 已損壞的保護(hù)柱、色譜柱 ? 所用溶劑、試劑的品質(zhì) ? 化學(xué)品使用不當(dāng)帶來(lái)的影響 ? 樣品前處理方法不當(dāng)帶來(lái)的影響 ? 實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備和結(jié)束后的收尾工作 化學(xué)品的影響 友情提示：保持良好的色譜柱使用習(xí)慣 ? 使用新鮮的水溶液，并考慮使用生物穩(wěn)定劑（如疊氮化鈉） ? 儲(chǔ)存色譜柱時(shí)，應(yīng)沖凈緩沖鹽，并用有機(jī)溶劑保護(hù)色譜柱（乙腈） ? 避免外力損傷色譜柱：彎曲、跌落或?qū)⒔宇^擰的過(guò)緊 ? 完全潤(rùn)濕在運(yùn)輸中變干的色譜柱 ? 對(duì)含有保留性較強(qiáng)的雜質(zhì)組分的樣品要進(jìn)行預(yù)處理 ? 定期用強(qiáng)極性的溶劑清洗色譜柱 ? 清除柱填料的局限性 ? 了解溶劑對(duì)樣品的溶解性及分離的影響 ? pH ? 溫度 ? 化學(xué)兼容性 ? 在使用前過(guò)濾溶劑 友情警示： 使用緩沖液的注意事項(xiàng) 緩沖液可以提供離子平衡的反離子，并使流動(dòng)相保持一定的離子強(qiáng)度和 pH值，減少拖尾。但是使用緩沖液要注意幾點(diǎn)： 避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用。 緩沖液最好要現(xiàn)配現(xiàn)用，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液，隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)有很多怪現(xiàn)象發(fā)生。 實(shí)驗(yàn)后不可用有機(jī)溶劑直接過(guò)度，有機(jī)溶劑會(huì)處使鹽類析出，造成液路或色譜柱堵塞，可用 95： 5的水甲醇沖洗。 使用緩沖液要及時(shí)掌握 pH范圍，做到胸中有數(shù)。 清洗液路和柱子時(shí)，有溫控可加熱到 30攝氏度易于沖洗。 長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無(wú)析出，若有白色鹽類析出，可考慮一定周期用 10%硝酸沖洗一下液路（拆下柱子，走 30ml,再用 5倍水沖洗）可以避免液路的堵塞。 選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。 HPLC 常見故障因素（泵） LCP100 高壓恒流泵 HPLC 常見故障因素（泵） 正確使用您的色譜泵： ? 使用高品質(zhì)的溶劑 ? 溶劑過(guò)濾（注意濾膜的選擇） ? 脫氣溶劑 ? 柱塞桿清洗 ? 注意調(diào)節(jié)流量時(shí)的變化速度 HPLC 常見故障因素（泵） ?注意流動(dòng)相組分 的互溶性！ ?使用正確的密封 圈清洗溶劑！ 泵 頭 泵腔體 吸入閥導(dǎo)通 活塞向后運(yùn)動(dòng) 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥關(guān)閉 液流方向 泵的工作原理： ① 吸液過(guò)程 泵 頭 泵腔體 吸入閥關(guān)閉 活塞向前運(yùn)動(dòng) 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥導(dǎo)通 液流方向 泵的工作原理： ② 排液過(guò)程 HPLC 常見故障因素（泵頭） 柱塞桿 密封圈 HPLC 常見故障因素（泵頭） 出口單向閥 進(jìn)口單向閥 泵頭 泵 頭 吸入閥寶石球與球坐粘連，吸入閥不能導(dǎo)通 活塞向后運(yùn)動(dòng) 泵 座 排出閥關(guān)閉 液
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