kylaaa高二生物微生物的分離和純培養(yǎng)(已修改)
2025-08-16 09:40 本頁面
【正文】 微生物的純種分離培養(yǎng) （實驗 11） ? 目的要求 1．學(xué)會將混雜的微生物分離成純種，掌握統(tǒng)計分析樣品中微生物的種類和數(shù)量的方法。 2．學(xué)會從菌落及培養(yǎng)形態(tài)特征區(qū)分細(xì)菌、放線菌和霉菌。 3．掌握幾種純化微生物的基本操作技術(shù)（制作平板、連續(xù)稀釋、平板劃線） 實 驗 原 理 ? 自然界中不同種類的微生物混雜生活在一起，要研究某種微生物的特性，必須從混雜的微生物類群中分離它，使該微生物處于 純培養(yǎng)狀態(tài)這種獲得純培養(yǎng)的方法稱為 微生物的分離與純化 。 ? 純種：是微生物的某一個種或株，培養(yǎng)中的所有細(xì)胞有著共同的來源或僅是同一細(xì)胞的后代。 ? 為了獲得單個菌體，要把待分離的材料進行適當(dāng)?shù)南♂?，按其生長所需要的條件，使其在平板上，單個菌體繁殖成單個菌落。 ? 由于細(xì)菌、放線菌和霉菌所要求的營養(yǎng)條件不同，將樣品在不同培養(yǎng)基制成的平板上進行分離，依據(jù)菌落形態(tài)的差異，可以區(qū)分 細(xì)菌 、 放線菌 和 霉菌 三大類群，并計算出其數(shù)量。 菌 落 特 征 ? 大小、形狀 （圓形，假根狀，不規(guī)則狀） ? 表面特征 （光滑，皺縮，顆粒狀，龜裂狀，同心圓狀） ? 隆起形狀 （擴展，臺狀，凹面，凸面，乳頭狀） ? 邊緣情況 （整齊，波狀，裂葉狀，鋸齒狀） ? 表面光澤 （無光澤，金屬光澤，閃光） ? 質(zhì)地 （油脂狀，膜狀，粘脆） ? 顏色、透明度 （ P6 圖 23） 霉菌菌落 酵母菌落 青霉 曲霉 大腸桿菌菌落 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基 A：諾爾斯氏鏈霉菌 B：皮疽諾卡氏菌 C：酒紅指孢囊菌 D：游動放線菌 E：小單胞菌 F：馬杜拉放線菌 放線菌菌落 A：卡特利鏈霉菌 B：弗氏鏈霉菌 C：吸水鏈霉菌金淚亞種 D：卡那霉素鏈霉菌 E：除蟲鏈霉菌 F：生磺酸鏈霉菌 產(chǎn)抗菌素的放線菌 實 驗 材 料 ? 1 土壤樣品 ? 2 培養(yǎng)基 （ 1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 （ 2）高氏 1號培養(yǎng)基 （ 3）馬鈴薯培養(yǎng)基（ PDA培養(yǎng)基） 實驗方法與步驟 ? ： 將已滅菌的培養(yǎng)基融化，冷卻到 4050℃ ， 倒平板。 2. 連續(xù)稀釋法分離土壤中的微生物 計算每克土樣中微生物的數(shù)量 ? 選擇剛好能把菌分開，而稀釋倍數(shù)最低的平板（含菌落數(shù) 30～ 300個）計數(shù)。 微生物的細(xì)胞個數(shù)（個 /g）＝ 平均菌落數(shù) 稀釋倍數(shù) 土壤克數(shù) 微生物分離基本方法及原則 ? 分離微生物時一般是根據(jù)該微生物對營養(yǎng)，pH，氧氣，溫度等要求的不同，供給它們合適的條件或加入某種抑制劑，形成只利于該菌種生長，不利于其他菌種生長的環(huán)境，從而淘汰不需要的菌種。 (1)分離 細(xì)菌 ：取 10 108兩個稀釋度各 培養(yǎng)皿中，涂布 牛肉膏蛋白胨平板 ， 37℃ 倒置培養(yǎng)， 24小時。 (2) 分離 霉菌 ：取 10 106兩個稀釋度各 ，涂布 土豆平板 （ 倒平板前在土豆培養(yǎng)基中加入 80%的乳酸 5滴 ）， 28℃ 倒置培養(yǎng)， 3～ 4天。 (3) 分離 放線菌 ：取 10 106兩個稀釋度各 ，（ 制備菌懸液時，應(yīng)先加入 10%酚 10滴 ）涂布 淀粉平板 ， 28℃ 倒置培養(yǎng)， 7～ 10天。 ? 操作要點 (1)接種環(huán)與平板表面約成 20~30度角。 (2)用力適當(dāng)，不要劃破培養(yǎng)基 . (3)方法 A中，每次劃線都要灼燒接種環(huán)。 教 學(xué) 內(nèi) 容 ? 制備固體平板培養(yǎng)基。 ? 從土樣中分離細(xì)菌、霉菌、放線菌，并觀察其菌落特征。 ?
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