第十六章細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定(已修改)
2025-08-13 13:26 本頁(yè)面
【正文】 第 十六 章 細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附因子的測(cè)定第一節(jié) 生物學(xué)測(cè)定方法 一、促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞增殖測(cè)定法 二、細(xì)胞毒活性測(cè)定法 三、抗病毒活性測(cè)定法 四、趨化活性測(cè)定法 五、生物學(xué)活性測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)第二節(jié) 免疫測(cè)定方法 一、 ELISA方法 二、流式細(xì)胞分析法 三、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn) 四、免疫學(xué)測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)第三節(jié) 細(xì)胞因子與細(xì)胞粘附分子測(cè)定的臨床應(yīng)用 一、臨床應(yīng)用原則 二、特定疾病診斷的輔助指標(biāo) 三、評(píng)估機(jī)體的免疫狀態(tài)、判斷治療效果及預(yù)后思考題小結(jié) 是由活化的免疫細(xì)胞及某些基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)并分泌的活性物質(zhì)，其主要生物學(xué)功能是介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或多肽。 細(xì)胞因子細(xì)胞粘附因子 是介導(dǎo)細(xì)胞間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間粘附作用的分子，其化學(xué)本質(zhì)為糖蛋白，可以細(xì)胞膜表面表達(dá)和可溶性?xún)煞N形式存在。 第一節(jié) 生物學(xué)測(cè)定 方法 DNA檢測(cè)的分子生物學(xué)測(cè)定法：216。 DNA擴(kuò)增法216。 RNA印跡法216。 原位雜交法216。 核酸酶保護(hù)分析 測(cè) 定法 生物學(xué)測(cè)定法分類(lèi)根據(jù) 細(xì)胞因 子特 定的生物學(xué)活性 ,應(yīng)用相應(yīng)的指示系統(tǒng) ,同時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比測(cè)定 ,從而得知樣品中細(xì)胞因子的活性水平 ,一般以活性單位 (U/ml)表示生物活性測(cè) 定 法 原理有助于細(xì)胞因子檢測(cè)的活性作用刺激細(xì)胞增殖或集落形成的活性維持細(xì)胞生長(zhǎng)和存活的特性抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或破壞細(xì)胞的效應(yīng)促進(jìn)細(xì)胞趨化或抗病毒作用以 細(xì)胞因子依賴(lài)性細(xì)胞株為靶向 ，通過(guò)觀察特定的細(xì)胞因子刺激或抑制依賴(lài)性細(xì)胞株增殖來(lái)評(píng)估細(xì)胞因子的活性水平。 一、促進(jìn)細(xì)胞增殖和增殖抑制測(cè)定法216。直接 計(jì)數(shù)法 簡(jiǎn) 便 、直觀 ,但費(fèi)時(shí)、主觀因素影響大、難以標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化 216。細(xì)胞 代謝活性測(cè)定方法 3HTdR、 125IUdR摻入法或 MTT等比色法216。細(xì)胞 代謝產(chǎn)物測(cè)定法 代謝產(chǎn)物熒光強(qiáng)度測(cè)定法和指示細(xì)胞表面標(biāo)記或可溶性分子測(cè)定法細(xì)胞增殖檢測(cè)方法分類(lèi) 通過(guò) 檢測(cè)細(xì)胞 DNA合成的增加或減少來(lái)判斷細(xì)胞增殖的方法。在細(xì)胞的增殖過(guò)程中， DNA合成的增加使得指示細(xì)胞對(duì)核苷或堿基的需求增多，若將核苷標(biāo)記上可以示蹤的同位素（ 3H/125I ），通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的同位素含量，則可反映細(xì)胞增殖的程度 。結(jié)果 客觀易于自 動(dòng)化；適 用于大標(biāo)本量 的測(cè)定 方法的特異性受依賴(lài)細(xì)胞株影響；放射性污染(1) 放射性核素?fù)饺敕ǔ?見(jiàn) 細(xì) 胞 因 子 3HTdR摻 入 檢 測(cè) 法 所 需 細(xì) 胞 及 參 考 試 驗(yàn) 條 件細(xì) 胞 株 所需濃度 （細(xì)胞數(shù) /ml） 3HTdR前培養(yǎng)時(shí)間 3HTdR后培養(yǎng)時(shí)間 檢測(cè)細(xì)胞因子 210 5 48 1820 IL1L929 210 5 56 16 IL1CTLL2 105 24 46 IL2FDCP1,32DCL27 510 4 24 48
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