高級(jí)生物化學(xué)復(fù)習(xí)資料(已修改)
2025-06-20 00:18 本頁面
【正文】 高級(jí)生物化學(xué)復(fù)習(xí)資料（Chargaff規(guī)則）1. 同一生物的不同組織的DNA堿基組成相同；2. 同一種生物DNA堿基組成不隨生物體的年齡、營養(yǎng)狀態(tài)或者環(huán)境變化而改變；3. 幾乎所有的DNA，無論種屬來源如何，其腺嘌呤摩爾含量與胸腺嘧啶摩爾含量相同［A］ =［T］，鳥嘌呤摩爾含量與胞嘧啶摩爾含量相同［G］ =［C］，總的嘌呤摩爾含量與總的嘧啶摩爾含量相同［A］＋［G］=［C］＋［T］。4. 不同生物來源的DNA堿基組成不同，表現(xiàn)在A＋T/G＋C比值的不同。這些結(jié)果后來為DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型提供了一個(gè)有力的佐證。：（1） DNA分子由兩條反向平行的多核苷酸鏈構(gòu)成雙螺旋結(jié)構(gòu)。兩條鏈圍繞同一個(gè)“中心軸”形成右手螺旋，螺旋表面有一條大溝和一條小溝。（2）嘌呤堿和嘧啶堿層疊于螺旋內(nèi)側(cè)，堿基平面與縱軸垂直， 。磷酸與脫氧核糖在外側(cè)，彼此之間通過磷酸二酯鍵連接，形成DNA的骨架。糖環(huán)平面與中軸平行。（3）雙螺旋的直徑為2nm，,兩個(gè)核苷酸之間的夾角為36186。，因此，沿中心軸每旋轉(zhuǎn)一周有10個(gè)核苷酸。（4）一條多核苷酸鏈上的嘌呤堿基與另一條鏈上的嘧啶堿基以氫鍵相連，匹配成對(duì)，配對(duì)的原則是A= T之間形成二個(gè)氫鍵，G186。 C之間形成三個(gè)氫鍵。因此， DNA的一條鏈為另一條鏈的互補(bǔ)鏈。：（1）大多數(shù)真核mRNA的5180。末端均在轉(zhuǎn)錄后加上一個(gè)7甲基鳥苷，同時(shí)第一個(gè)核苷酸的C180。2也是甲基化，形成帽子結(jié)構(gòu)：m7GpppNm。（2）大多數(shù)真核mRNA的3180。末端有一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)結(jié)構(gòu)，稱為多聚A尾。：單鏈、三葉草形、四臂四環(huán)：RNA和DNA都是極性的化合物，兩者都微溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。它們的鈉鹽易溶于水。：吸收峰是260nm。變性增色，復(fù)性減色。：通常把熱變性過程中光吸收達(dá)到最大吸收一半時(shí)的溫度稱為該DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度，用Tm表示。DNA的Tm值與以下因素有關(guān)：（1）、 DNA的均一性:均一性愈高的樣品，熔解過程的溫度范圍愈小。（2）、 GC的含量：（ GC）%=（）（3）、介質(zhì)離子強(qiáng)度：介質(zhì)離子強(qiáng)度較低，DNA的tm也低。：（1） DNA或RNA的定量 ；（2）判斷核酸樣品的純度：DNA純品: OD260/OD280 = ；RNA純品: OD260/OD280 = ：（1）、DNA變性的概念：指DNA分子中的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈為無規(guī)則線性結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象。（2）、DNA變性的本質(zhì)：維持雙螺旋穩(wěn)定性的氫鍵斷裂，堿基間的堆積力遭到破壞，但不涉及到其一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變。（3）、導(dǎo)致DNA變性的因素：凡能破壞雙螺旋穩(wěn)定性的因素，如加熱、極端的pH、有機(jī)試劑甲醇、乙醇、尿素及甲醛等，均可引起核酸分子變性。：DNA復(fù)性(renaturation)：變性DNA在適當(dāng)條件下，又可使兩條彼此分開的鏈重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)，這一現(xiàn)象稱為復(fù)性。熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性，這一過程稱為退火(annealing) 。：當(dāng)兩條不同來源的DNA鏈或DNA鏈與RNA鏈之間存在互補(bǔ)順序時(shí)，在復(fù)性時(shí)可發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)形成局部雙螺旋區(qū)，稱分子雜交 。應(yīng)用： 核酸雜交技術(shù)是目前研究核酸結(jié)構(gòu)、功能常用手段之一。用來檢驗(yàn)核酸的缺失、插入；制備特定的探針（probe）通過雜交技術(shù)可進(jìn)行基因的檢測和定位研究。 ：PCR即聚合酶鏈反應(yīng)，是模擬體內(nèi)DNA復(fù)制條件，應(yīng)用DNA聚合酶特異性擴(kuò)增某一DNA片段的技術(shù)。體外程序化的DNA合成技術(shù)。二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能：非極性氨基酸、酸性氨基酸 、堿性氨基酸 、非解離的極性氨基酸 ：蛋白質(zhì)的多肽鏈并非線性伸展，而是以一定的方式折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)，并在此基礎(chǔ)上產(chǎn)生特有的功能。（構(gòu)象不涉及共價(jià)鍵的形成或破壞。指一個(gè)分子結(jié)構(gòu)中的一切原子繞共價(jià)單鍵旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的不同空間排列方式。一種構(gòu)象變成另一種 。）：在蛋白質(zhì)中，某些相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單位（α—螺旋、β—折疊、β—轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲）組合在一起，相互作用，從而形成有規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)集合體，充當(dāng)更高層次結(jié)構(gòu)的構(gòu)件，稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。 ：對(duì)于較大的球蛋白分子，一條長的多肽鏈，在超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，往往組裝成幾個(gè)相對(duì)獨(dú)立的球狀區(qū)域，彼此分開，以松散的單條肽鏈相連。這種相對(duì)獨(dú)立的球狀區(qū)域，稱為結(jié)構(gòu)域。：在某一PH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，成為兼性離子，呈電中性，此時(shí)的溶液ph稱該氨基酸的等電點(diǎn)。：a螺旋、 b折疊、 b轉(zhuǎn)角、 無規(guī)卷曲 ：（1）多肽鏈主鏈骨架圍繞一個(gè)中心軸一圈又一圈地上升，從而形成了一個(gè)螺旋式的構(gòu)象，，繞軸旋轉(zhuǎn)100176。 （2）相鄰的螺旋之間形成鏈內(nèi)的氫鍵。即：一個(gè)肽平面上的C=O基氧原子與其前的第三個(gè)肽平面上的N—H基氫原子生成一個(gè)氫鍵：C=O…H—N。氫鍵封閉環(huán)本身包含13個(gè)原子。α—螺旋允許所有肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的形成。因此，α—螺旋是相當(dāng)穩(wěn)定的。通常用Sn表達(dá)式
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