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基因工程克隆方案設(shè)計(已修改)

2025-06-06 18:19 本頁面
 

【正文】 基因工程克隆方案設(shè)計 基因工程實驗設(shè)計 ? 目的基因的序列分析 ? 載體的選擇和分析 ? 克隆策略的設(shè)計 ? 引物的設(shè)計 目的基因的序列分析 ? 分析 ORF: 找到需要克隆的核酸序列 ? 分析酶切位點: ( 1)酶切位點為 0的酶;可通過引物加入,方便克隆; ( 2)酶切位點為 1和 2的酶:用于酶切克隆或基因和重組質(zhì)粒的酶切分析。 載體的選擇和分析 ? 根據(jù)目的選擇合適的載體質(zhì)粒:克隆、表達(dá)或其它用途。 ? MCS(多克隆位點)是否有合適酶切位點(一般是基因上沒有或 1個的酶切位點 ) ? 表達(dá)載體,要注意表達(dá)框架配對。 ? 載體的酶切位點,用于重組鑒定。 克隆策略的設(shè)計 ? 平端克隆; ? 粘端克隆 ( 1) TA克隆 ( 2) 單酶切不定向克
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