原生質(zhì)體融合ppt課件(已修改)
2025-05-24 06:56 本頁(yè)面
【正文】 一、原生質(zhì)體分離 二、原生質(zhì)體分離及純化操作 三、原生質(zhì)體培養(yǎng) 四、體細(xì)胞雜交（原生質(zhì)體融合） 五、原生質(zhì)體的遺傳飾變 第三節(jié)、植物原生質(zhì)體技術(shù)及應(yīng)用 體細(xì)胞雜交研究歷程及一般概念 體細(xì)胞雜交的一般流程 雜交細(xì)胞的鑒定 1 2 3 細(xì)胞雜交的應(yīng)用 4 （一）體細(xì)胞雜交的含義及研究歷程 概念： 不同親本（種間或?qū)匍g等）的原生質(zhì)體，在人工誘導(dǎo)下，相互接觸，從而發(fā)生膜融合、胞質(zhì)融合、核融合并形成雜種細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)進(jìn)一步發(fā)育成雜種植株。這一過(guò)程稱為原生質(zhì)體融合或細(xì)胞雜交。 ◆ 使植物無(wú)性雜交成為可能 ◆使有性雜交根本無(wú)法獲得的種間、屬間、科間遠(yuǎn)緣雜種成為現(xiàn)實(shí) ◆打破了物種間的界限 原生質(zhì)體融合的意義 植物體細(xì)胞雜交的幾個(gè)重要進(jìn)展 1960年 Kocking用酶法制備高等植物原生質(zhì)體首次獲得成功； 1971年 Takebe首次從離體煙草原生質(zhì)體培養(yǎng)中獲得再生完整植株； 1972年 Carlson首次獲得粉藍(lán)煙草和郎氏煙草的細(xì)胞雜種，這是第一個(gè)植物體細(xì)胞雜種； 1974年 Kao將聚乙二醇（ PEG）誘導(dǎo)融合法應(yīng)用于植物細(xì)胞融合并建立了相應(yīng)的融合技術(shù)； 1978年 Melchers獲得第一個(gè)屬間體細(xì)胞雜種（番茄＋馬鈴薯）； 1981年 Zimmerman發(fā)明了電融合儀，并首次提出了電融合概念； 1987年 Schweiger建立了單對(duì)原生質(zhì)體電融合技術(shù)程序。 （二） 植物細(xì)胞融合的程序 ： ◆ 原生質(zhì)體分離的分離、純化 ◆ 融合方法選擇 ◆ 雜種細(xì)胞的篩選 ◆ 愈傷組織形成、分化植株再生 ◆ 雜種植物的鑒定 原生質(zhì)體融合的方法 聚乙二醇 PEG） 化學(xué)方法 電脈沖 物理方法 生物方法 仙臺(tái)病毒 (Sendai virus) NaNO3處理 高 pH高濃度 Ga2+ 飛秒激光誘導(dǎo)融合 電融合 空間細(xì)胞融合 （ 1） 電融合法： 指利用改變電場(chǎng)誘導(dǎo)原生質(zhì)體彼此相連成串，再施以瞬間強(qiáng)脈沖電壓促使質(zhì)膜發(fā)生可逆性電擊穿，達(dá)到原生質(zhì)體融合的方法。 ◆ 電融合特點(diǎn)： 效率高 對(duì)原生質(zhì)體傷害性小 對(duì)融合細(xì)胞數(shù)易于控制 方法： 微電極法和雙向電泳法 雙向電泳法： 通過(guò)電泳，兩細(xì)胞膜緊密接觸，且膜表面的蛋白質(zhì)分子分離，產(chǎn)生了無(wú)蛋白的類脂區(qū)。 電融合儀 Fusion phases of oat（燕麥） protoplasts (Avena sativa) 微電極法： 指利用改變電場(chǎng)誘導(dǎo)原生質(zhì)體彼此相連成串，再施以瞬間強(qiáng)脈沖電壓促使質(zhì)膜發(fā)生可逆性電擊穿
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