植物dna分子標(biāo)記ppt課件(已修改)
2025-05-16 02:52 本頁(yè)面
【正文】 植物 DNA 分子標(biāo)記 分子標(biāo)記的概念 ?廣義的分子標(biāo)記 （ molecular marker）：可遺傳的并可檢測(cè)的 DNA序列或蛋白。包括蛋白質(zhì)標(biāo)記和 DNA標(biāo)記（狹義的分子標(biāo)記）。 ?蛋白質(zhì)標(biāo)記包括動(dòng) 植物蛋白 、 同工酶 及 等位酶 ?理想的分子標(biāo)記： * ** * 雜合子的一對(duì)等位基因各自都具有自己的表型效應(yīng)，稱為共顯性（ codominance） ** 基因多效性（ gene pleiotropism） ：一個(gè)基因產(chǎn)生多種表型效應(yīng)的現(xiàn)象。 DNA分子標(biāo)記（ DNA molecular marker）直接在 DNA分子水平上檢測(cè)生物間的差異，是 DNA水平上遺傳變異的直接反應(yīng)。 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在 DNA分子標(biāo)記技術(shù)已有數(shù)十種，廣泛應(yīng)用于遺傳育種、基因組作圖、基因定位、物種親緣關(guān)系鑒別、基因庫(kù)構(gòu)建、基因克隆等方面。 DNA分子標(biāo)記大多以電泳譜帶的形式表現(xiàn)，分為非 PCR依賴的分子標(biāo)記 (基于 Southern 雜交技術(shù)的分子標(biāo)記 )和 PCR依賴的分子標(biāo)記 。 非 PCR依賴的分子標(biāo)記 (基于 Southern 雜交技術(shù)的分子標(biāo)記 )包括： ?限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記 （ restriction fragment length polymorphism, RFLP） ?原位雜交（ in situ hybridization） PCR依賴的分子標(biāo)記： ?隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA標(biāo)記 （ random amplification polymorphism DNA, RAPD） ?DNA擴(kuò)增指紋印記 （ DNA amplification fingerprinting, DAF） ?簡(jiǎn)單序列重復(fù)標(biāo)記 （ simple sequence repeat, SSR） ?隨機(jī)引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （ arbitrarily primed PCR, APPCR） ?擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記 （ amplified fragment length polymorphism, AFLP） 基于分子雜交技術(shù)的分子標(biāo)記技術(shù) 此類標(biāo)記技術(shù)是利用 限制性內(nèi)切酶解 及 凝膠電泳 分離不同的生物 DNA 分子，然后用經(jīng)標(biāo)記的 特異 DNA 探針 與之進(jìn)行雜交，通過(guò) 放射自顯影 或 非同位素顯色 技術(shù)來(lái)揭示 DNA 的多態(tài)性。 分子雜交 ：由具有互補(bǔ)堿基順序的任何兩條 單鏈 核酸分子片斷形成 雙鏈 的過(guò)程。 染色體原位雜交 是指 DNA探針與染色體上的 DNA雜交，并在染色體上直接進(jìn)行檢測(cè)的分子技術(shù)，其原理是兩條核苷酸 單鏈片斷 在適宜的條件下，通過(guò) 氫鍵結(jié)合，形成 DNADNA， DNARNA， RNARNA雙鍵分子，用帶有標(biāo)記的 DNA或者 RNA片斷作為核酸探針，與細(xì)胞內(nèi)染色體雜交，用放射自顯影等方法予以顯示，在熒光顯微鏡下觀察目的 mRNA或者 DNA的存在與定位。 In situ hybridization ? For in situ hybridization, a tissue sample is incubated with a labeled nucleic acid probe, excess probe is washe
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