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植物dna分子標(biāo)記ppt課件-文庫吧在線文庫

2025-06-06 02:52上一頁面

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【正文】 限制性酶切, Southern印記,DNA探針制備,同位素 /非同位素標(biāo)記, DNA分子雜交等步驟。 ?蛋白質(zhì)標(biāo)記包括動 植物蛋白 、 同工酶 及 等位酶 ?理想的分子標(biāo)記: * ** * 雜合子的一對等位基因各自都具有自己的表型效應(yīng),稱為共顯性( codominance) ** 基因多效性( gene pleiotropism) :一個基因產(chǎn)生多種表型效應(yīng)的現(xiàn)象。 DNA分子標(biāo)記大多以電泳譜帶的形式表現(xiàn),分為非 PCR依賴的分子標(biāo)記 (基于 Southern 雜交技術(shù)的分子標(biāo)記 )和 PCR依賴的分子標(biāo)記 。如:堿基對的代換、缺失等。 進(jìn)行 Southern印跡轉(zhuǎn)移操作,用特定的探針與濾膜上的 DNA雜交,經(jīng)過 放射自顯影 就能檢測到高等植物核 DNA的 RFLP。 6. 統(tǒng)計分析:記錄條帶清晰的 RAPD條帶,計算帶紋相似率;計算帶頻率、群內(nèi)遺傳純度; DNA片段大小。 ( 6)分析自動化。 在不需要 DNA序列的情況下,利用一套特定引物可在一次單個反應(yīng)中檢測到大量的片段。 ?微衛(wèi)星:即短串聯(lián)重復(fù) (Short Tandem Repeat,STR),它是由 26bp重復(fù)單位構(gòu)成的 DNA序列,通常多態(tài)性片段長度在 100300bp。 基因芯片技術(shù)和應(yīng)用 ?按載體材料分:玻璃芯片、硅芯片、陶瓷芯片 ?按點(diǎn)樣方式分:原位合成芯片、微矩陣芯片、電定位芯片 ?按 DNA種類分:寡核苷酸芯片、 cDNA芯片 ?按用途分:表達(dá)譜芯片、診斷芯片、指紋圖譜芯片、測序芯片和毒理芯片等。許多微衛(wèi)星間的不等交換或復(fù)制過程中的 DNA滑動而高度可變,因而顯示出了豐富的限制性片段 多態(tài)性 。 GACTGCGTACC AATTC NNN3 180。 ( 3)存在共遷移問題。 ( 2)用一個引物可擴(kuò)增出多片段。 ( 2)所需儀器較多 ( 3)技術(shù)較為復(fù)雜 ( 4)多數(shù) RFLP表現(xiàn)為二態(tài)性,提供的信息量較低 ( 5)與內(nèi)切酶選用密切相關(guān) RAPD標(biāo)記 ? 1990年, 美國杜邦公司 科學(xué)家 Williams推出。 來自一個完整的純合子的個體的每一種同源DNA分子,都會在同樣的位點(diǎn)被準(zhǔn)確切割。 In situ hybridization ? For in situ hybridization, a tissue sample is incubated with a labeled nucleic acid probe, excess probe is washed away and the location of hybridized probe is examined. ? The technique enables the spatial localization of gene expression to be determined as well as the location of individual genes on chromosomes. b c d a Fig. 5 GISH images of chromosomes of tetraploid and diploid Festulolium progenies. The DNA of L. perenne was used as pr
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