基因工程考試重點(已修改)
2024-11-12 09:59 本頁面
【正文】 第一章 ：通過工具酶，在體外將目的基因、基因片段或其他 DNA 元件進行切割，與適當?shù)妮d體進行連接和重組，導入相應的受體細胞，并使外源基因進行復制和表達，定向改造受體生物性狀或獲得表達產物。 ：從一個親本細胞增殖而來的細胞群體。 3． 1997 年轉基因番茄上市，俗稱“百日鮮”。 4． DNA 的組成：五碳糖，即脫氧核糖；磷酸基團； 4 種含氮堿基。 5． RNA 聚合酶：核心酶和 σ 因子。轉錄終止子：依賴 ρ 因子，不依賴 ρ 因子。 6． 起始密碼： AUG 終止密碼： UAA,UAG,UGA ： 初始克隆中 的外源 DNA 片段往往較長，含有許多目的基因以外的 DNA 片段，在諸如表達、序列分析和突變等操作中不便進行，因此必須將目的基因所對應的小段 DNA找出來，這個過程就叫亞克隆。 8．原核生物基因組成：啟動區(qū)， SD 區(qū)，基因區(qū)，轉錄終止子和終止因子；真核生物基因組成：轉錄啟動區(qū)，基因區(qū)，轉錄終止子。 結構基因：轉錄啟動區(qū)，核糖體識別區(qū)，編碼區(qū)，轉錄終止區(qū)。 第二章 DNA，維護宿主遺傳穩(wěn)定的保護機制。 。宿主細胞通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質和外來遺傳物質的目的 。 ：依次取宿主屬名第一字母、種名頭兩個字母、菌株號、序號（羅馬字）。 4 限制與修飾系統(tǒng)的比較 Ⅱ （所占比例最大） Ⅰ Ⅲ 酶分子 內切酶與甲基化酶 三亞基雙功能酶 二亞基雙功能酶 分子不在一起 識別位點 46bp, 大多數(shù)為 二分非對稱 57bp 非對稱 回文對稱結構 切割位點 在識別位點中或 無特異性，至少在 在識別位點下 游 2426bp 靠近識別位點 識別位點外 1000bp 限制反應與 分開的反應 互斥 同時競爭 甲基化反應 限制作用是 否 是 是 否需用 ATP (大都為回文對稱序列 ) 識別的長度一般為 48 個堿基， 6 個為常見。 EcoRⅠ G↓ AATTC Hind Ⅲ A↓ AGCTT BamHⅠ G↓ GATCC ：識別相同序列的限制酶稱為同裂酶，但它們的切割位點可能不同。 同尾酶 ：許多不同的限制酶切割 DNA 產生的末端是相同的，且是對稱的，即它們可產生相同的粘性末端，這些酶統(tǒng)稱為同尾酶。 ：是指在建議使用的緩沖液及溫度下，在 20ｕ l 反應液中反應 1h，使 1ugDNA完全消化所需的酶量。 :某些限制酶對同一底物中的有些位點表現(xiàn)出偏愛性切割，即對不同位置的同一個識別序列表現(xiàn)出不同的切割效率，這種現(xiàn)象稱作位點偏愛。 ：穩(wěn)定 PH 的緩沖劑、鎂離子、 DTT、 BSA 法： EDTA 可螯合鎂離子，終止酶切反應，終止?jié)舛葹?10mmol/L；
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