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高中生物選修3專題14基礎(chǔ)知識點(diǎn)總結(jié)(已修改)

2025-04-19 04:09 本頁面
 

【正文】 高中生物選修3基礎(chǔ)知識總結(jié)專題一 基因工程 原理:基因重組基因工程的概念:基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做DNA重組技術(shù)。 定向改造生物的遺傳性狀。(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列(回文序列),并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(注意“酯”的寫法)(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2.“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對象基因操作水平DNA分子水平基本過程剪切→ 拼接→導(dǎo)入→ 表達(dá)實(shí)質(zhì)基因重組結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物(定向的)T4DNA連接酶)的比較:①相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:EcoliDNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體,能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。(2)DNA聚合酶、RNA聚合酶和DNA連接酶的比較:3.“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。 ②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。 ④安全無毒 ⑤大小合適(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體: 噬菌體的衍生物、動植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲?。?編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因或具有調(diào)控作用的因子。:從基因文庫中獲??;PCR擴(kuò)增目的基因;人工化學(xué)法合成。(1)原理:DNA復(fù)制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。(3)條件:模板、耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)、引物、脫氧核苷酸、精確的溫度控制、能量第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。:目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因(﹢復(fù)制原點(diǎn))(1)啟動子:啟動目的基因的轉(zhuǎn)錄。是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:終止目的基因的轉(zhuǎn)錄。也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法、花粉管通道法。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是 顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是 受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:Ca2+轉(zhuǎn)化法注意:① 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,目前已開發(fā)出來的方法有很多種,每種方法都有利弊,適合于不同的受體細(xì)胞。究竟選用哪種方法,要根據(jù)具體情況而定。② 以上介紹的幾種方法,在導(dǎo)入受體細(xì)胞之前,都必須進(jìn)行目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建,也就是說導(dǎo)入受體細(xì)胞的必須是重組DNA分子,而不能直接導(dǎo)入目的基因。第四步:目的基因的檢測和表達(dá) 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交,即分子雜交技術(shù)。 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì),用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行 抗原-抗體雜交。 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,進(jìn)行抗蟲抗病的接種試驗(yàn)觀察植物是否出現(xiàn)抗蟲抗病性狀。(三)基因工程的應(yīng)用(一)植物基因工程碩果累累1. 抗蟲轉(zhuǎn)基因植物 2. 抗病轉(zhuǎn)基因植物3. 抗逆轉(zhuǎn)基因植物針對鹽堿、干旱、低溫、澇害等不利環(huán)境條件而培育的抗鹽堿、耐旱、耐寒、抗?jié)?. 利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)主要成果基因轉(zhuǎn)移方法轉(zhuǎn)基因高賴氨酸玉米將富含賴氨酸的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胗衩准?xì)胞中表達(dá)成功轉(zhuǎn)基因延熟番茄將控制番茄果實(shí)成熟的基因?qū)敕艳D(zhuǎn)基因矮牽牛將與植物花青素代謝有關(guān)的基因?qū)氚珷颗^D(zhuǎn)基因煙草苗將螢火蟲的發(fā)光基因?qū)霟煵荩ǘ﹦游锘蚬こ糖熬皬V闊動物基因工程在動物品種改良、建立生物反應(yīng)器、器官移植等很多方面顯示了廣闊的應(yīng)用前景。1. 用于提高動物生長速度將外源生長激素基因?qū)雱游矬w內(nèi),在其體內(nèi)合成大量生長激素2. 用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)3. 用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物乳腺(房)生物反應(yīng)器:用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)動物乳腺生物反應(yīng)器的操作過程與轉(zhuǎn)基因動物操作過程相同。為了使目標(biāo)產(chǎn)品在奶中形成,需要使用乳腺組織中特異表達(dá)的啟動子,要在編碼目的蛋白質(zhì)的基因序列前加上乳腺組織中特異表達(dá)的啟動子構(gòu)建成表達(dá)載體。操作過程大致歸納為:獲取目的基因(例如血清白蛋白基因)→構(gòu)建基因表達(dá)載體(在血清白蛋白基因前加特異表達(dá)的啟動子)→顯微注射導(dǎo)入哺乳動物受精卵中→形成胚胎→將胚胎送入母體動物→發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物(只有在產(chǎn)下的雌性個(gè)體中,轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。4. 用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體(三)基因工程藥物(主要是微生物)基因工程藥物種類:細(xì)胞因子、抗體、疫苗、激素等。原理:用基因工程的方法,使外源基因在工程菌細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)。用DNA重組技術(shù)生產(chǎn)的人類蛋白藥物種類(部分)(四)基因治療 (1)體外基因治療 (2)體內(nèi)基因治療基因治療是把正?;?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的,這是治療遺傳病的最有效的手段。總結(jié):動物基因工程的受體細(xì)胞是受精卵或胚胎干細(xì)胞,因?yàn)橹挥惺芫鸦蚺咛?
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