高中生物選修3專題14基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)-wenkub
2023-04-22 04:09:08 本頁(yè)面
【正文】 培養(yǎng)（技術(shù)是植物組織培養(yǎng)）；得到單倍體植株；對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素處理；得到了正常的純合二倍體植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型）。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）設(shè)計(jì)中的困難：如何推測(cè)非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核苷酸序列（1）基因工程和蛋白質(zhì)工程的比較基因工程蛋白質(zhì)工程相同均是基因工程，蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程不同概念P1P27 黑體字目的獲得自然界中已存在的蛋白質(zhì)獲得自然界中不存在的蛋白質(zhì)基本途徑遵循中心法則先中心法則的逆推，再遵循中心法則注意：① 蛋白質(zhì)的工程的重點(diǎn)在于對(duì)已存在的蛋白質(zhì)進(jìn)行分子改造，改造的對(duì)象是編碼蛋白質(zhì)的DNA序列?？偨Y(jié)：動(dòng)物基因工程的受體細(xì)胞是受精卵或胚胎干細(xì)胞，因?yàn)橹挥惺芫鸦蚺咛ジ杉?xì)胞接受目的基因后才能發(fā)育成具有新性狀的動(dòng)物個(gè)體。（三）基因工程藥物（主要是微生物）基因工程藥物種類：細(xì)胞因子、抗體、疫苗、激素等。1. 用于提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度將外源生長(zhǎng)激素基因?qū)雱?dòng)物體內(nèi)，在其體內(nèi)合成大量生長(zhǎng)激素2. 用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)3. 用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物乳腺（房）生物反應(yīng)器：用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器的操作過(guò)程與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物操作過(guò)程相同。 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行 抗原－抗體雜交。究竟選用哪種方法，要根據(jù)具體情況而定。：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有 基因槍法、花粉管通道法。也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ，位于基因的尾端。（3）條件：模板、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）、引物、脫氧核苷酸、精確的溫度控制、能量第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 ④安全無(wú)毒 ⑤大小合適（2）最常用的載體是 質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。（注意“酯”的寫(xiě)法）（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端?；蚬こ淌窃贒NA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。 定向改造生物的遺傳性狀。2.“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶（E(2)DNA聚合酶、RNA聚合酶和DNA連接酶的比較：3.“分子運(yùn)輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。（3）其它載體： 噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。?編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因或具有調(diào)控作用的因子。：目的基因＋啟動(dòng)子＋終止子＋標(biāo)記基因（﹢復(fù)制原點(diǎn)）（1）啟動(dòng)子：?jiǎn)?dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是 顯微注射技術(shù)。② 以上介紹的幾種方法，在導(dǎo)入受體細(xì)胞之前，都必須進(jìn)行目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建，也就是說(shuō)導(dǎo)入受體細(xì)胞的必須是重組DNA分子，而不能直接導(dǎo)入目的基因。 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，進(jìn)行抗蟲(chóng)抗病的接種試驗(yàn)觀察植物是否出現(xiàn)抗蟲(chóng)抗病性狀。為了使目標(biāo)產(chǎn)品在奶中形成，需要使用乳腺組織中特異表達(dá)的啟動(dòng)子，要在編碼目的蛋白質(zhì)的基因序列前加上乳腺組織中特異表達(dá)的啟動(dòng)子構(gòu)建成表達(dá)載體。原理：用基因工程的方法，使外源基因在工程菌細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)。植物細(xì)胞工程的受體細(xì)胞可以是受精卵也可以是其他的體細(xì)胞。 ② 對(duì)基因進(jìn)行改造的蛋白質(zhì)可以遺傳下去，而直接改造蛋白質(zhì)卻不能遺傳。 優(yōu)點(diǎn)：明顯縮短育種年限C. 突變體利用：在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體，通過(guò)從有用的突變體中選育出新品種（如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體。 化學(xué)法是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（3）細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。④氣體環(huán)境：95%空氣＋5%CO2。（2）受體選用去核卵(母)細(xì)胞的原因：卵(母)細(xì)胞比較大，容易操作；細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。（2）單克隆抗體的制備過(guò)程：對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠產(chǎn)生漿細(xì)胞）；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提??；促使它們細(xì)胞融合[注：融合的結(jié)果是有很多不符合要求的；如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等，所以要進(jìn)行篩選]；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞[特點(diǎn)是能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體]；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)[篩選出能夠分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞]；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體。（4）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。動(dòng)物細(xì)胞核移植？植物：物理法（離心、振動(dòng)、電激）化學(xué)法（聚乙二醇）動(dòng)物：物理法（離心、振動(dòng)、電激）化學(xué)法（聚乙二醇） 生物法（滅活的病毒）14. 細(xì)胞融合的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 應(yīng)用：制備單克隆抗體（最主要的應(yīng)用）15. 單克隆抗體制備過(guò)程用到的技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合（克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性）專題三 胚胎工程（一）動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。（3）受精：精子獲能（在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)）；卵子的準(zhǔn)備（排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減數(shù)第二次分裂中期才具備受精能力）；受精階段（卵子周圍的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi)：放射冠、透明帶、卵黃膜）：精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，穿越放射冠。 ③桑椹胚：特點(diǎn)：胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)，胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹。中間的空腔稱為囊胚腔[注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化]。采集的卵母細(xì)胞，都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需添加維生
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