【正文】 第一章 緒論教學(xué)目的：掌握微生物、微生物學(xué)的概念，微生物的共同特性，以及微生物發(fā)展的歷程和各階段有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家，了解下微生物學(xué)的總體概況和微生物學(xué)發(fā)展的將來。重點(diǎn)和難點(diǎn)： 重點(diǎn)掌握幾個(gè)基本概念，發(fā)展的各個(gè)階段以及有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家，微生物的共同特性。一、 什么是微生物？有何特點(diǎn)？包括哪些類群？ 什么是微生物： 一切肉眼看不到或看不清的微小生物都稱為微生物。指所有形態(tài)微小，構(gòu)造簡單的單細(xì)胞、多細(xì)胞，甚至是沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物的總稱。主要特點(diǎn)： 小（個(gè)體?。﹗m(光鏡下可以看到) nm（電鏡下可以看到） 簡（構(gòu)造簡單） 低（進(jìn)化地位低）原核類、真核類、非細(xì)胞類 主要類群：原核類的細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次氏體和藍(lán)細(xì)菌（過去稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻）；真核類的真菌（酵母菌和霉菌）、原生動(dòng)物和顯微藻類；屬于非細(xì)胞類的病毒、類病毒和朊病毒等。二、 什么是微生物學(xué)（1） 什么是微生物學(xué)：生物學(xué)的分枝科學(xué)，是研究微生物的形態(tài)、生理、生態(tài)分布、遺傳變異及其與生物界、非生物界的相互關(guān)系與人類生產(chǎn)和生活利害關(guān)系等方面的科學(xué)。三、 微生物學(xué)的發(fā)展史： （一） 形態(tài)學(xué)發(fā)展階段： 代表人物虎克（Anthony ）。主要貢獻(xiàn)：①利用顯微鏡直接觀察到了細(xì)菌②一生制造了419臺(tái)顯微鏡或放大鏡（50266倍）③發(fā)表論文400多篇。（二）、生理學(xué)發(fā)展階段： 從1861年至1897年，這一時(shí)期主要特點(diǎn)為：①建立了一系列研究微生物所必須的方法和技術(shù)②形成了尋找病原微生物的黃金時(shí)代③微生物學(xué)以獨(dú)立的學(xué)科形式開始形成。代表人物及其主要貢獻(xiàn)：法國人路易巴斯德：微生物學(xué)的奠基人。主要論點(diǎn)：認(rèn)為只有活的微生物才是傳染病、發(fā)酵和腐敗的真正原因，否定了“自生說” ，即生命只能來自生命的胚種說。其著名的實(shí)驗(yàn)是曲頸瓶實(shí)驗(yàn)，即將有機(jī)營養(yǎng)液放入曲頸瓶中——滅菌——放置——不壞，打破瓶口，則變壞；建立了巴氏消毒法（60—65度）；為免疫學(xué)作出了重要貢獻(xiàn)，首次制成狂犬疫苗?？坪眨褐Z貝爾將獲得者①建立了一系列研究微生物的方法，尤其在分離微生物純種方面，鞭毛等一系列染色方法、顯微攝影等方面②利用平板分離到多種傳染病的病原菌如：炭疽桿菌、結(jié)核桿菌、霍亂弧菌等③1884年提出科赫法則：病原微生物存在于患病個(gè)體中，不存在于健康個(gè)體中。繼二人之后，出現(xiàn)了一系列的微生物學(xué)的分支科學(xué)，如細(xì)菌學(xué)、消毒外科、免疫學(xué)、土壤微生物學(xué)、病毒學(xué)等。使微生物學(xué)作為一門獨(dú)立的學(xué)科出現(xiàn)。中國科學(xué)家: 湯飛凡 沙眼衣原體的發(fā)現(xiàn)科學(xué)家的精神與SARS帶給我們的思考. 四、 微生物的共同特點(diǎn)： 由于微生物個(gè)體小，構(gòu)造簡單，因而具有以下五個(gè)方面的共性：（一） 體積小，面積大：（二） 吸收多、轉(zhuǎn)化快：（三） 生長旺、繁殖快 四） 適應(yīng)性強(qiáng)，易變異 （五）分布廣，種類多：  第二章 原核微生物教學(xué)目的：通過本章的學(xué)習(xí)，使學(xué)生掌握原核微生物細(xì)菌、放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)及菌落特征，革蘭氏染色的重要意義。了解其它原核微生物藍(lán)細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次氏體等的基本特性。重點(diǎn)和難點(diǎn)：重點(diǎn)是細(xì)菌和放線菌的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及其菌落特征。難點(diǎn)是細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特征以及與革蘭氏染色的關(guān)系。第一節(jié) 細(xì)菌一、 細(xì)菌細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造及功能：先介紹一下如何看到微生物（一） 形態(tài)及染色情況：如何觀察單個(gè)的細(xì)菌（染色情況）：因細(xì)菌個(gè)體小，細(xì)胞透明，因而不宜觀察，染色后易觀察。染色的方法很多，如：細(xì)菌的單染色法、鞭毛染色法、芽孢染色法、莢膜染色法等，其中最重要的是G染色。G染色有十分重要的意義，通過這一染色，幾乎可以把所有細(xì)菌分成G+和G兩大類。因此它是分類、鑒定菌種時(shí)一個(gè)重要指標(biāo)。且能提供不少其它生物學(xué)信息。通過各種染色手段和直接觀察，可見到微生物的形態(tài)有以下幾種：形態(tài)：形態(tài)簡單，基本上只有三種類型，即：球狀、桿狀和螺旋狀；（1） 球菌：根據(jù)其分裂方向可分為：單球菌、雙球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、鏈球菌和葡萄球菌。（2） 桿菌：可分為：單桿菌、雙桿菌、鏈桿菌（3） 螺旋菌：根據(jù)彎曲程度分為：弧菌（26個(gè)彎）、螺菌（6個(gè)以上彎） 在自然界中，桿菌最為常見。此外，近年來還陸續(xù)發(fā)現(xiàn)其它形態(tài)的細(xì)菌。如：柄桿菌（形狀不規(guī)則，有柄、菌絲和附器等）、球衣菌（能形成衣鞘）等（沈萍P29）。大?。阂话阋評(píng)m計(jì)。如Ecoli為2um，1500個(gè)頭尾相連才3mm，120個(gè)肩并肩象頭發(fā)絲大小。細(xì)菌的形態(tài)受環(huán)境條件的影響，如培養(yǎng)時(shí)間、溫度、培養(yǎng)基的組成與濃度等均能引起細(xì)菌形態(tài)的改變。（二） 細(xì)菌細(xì)胞的構(gòu)造： 一般構(gòu)造：（1） 細(xì)胞壁：①功能：固定細(xì)胞外形；協(xié)助鞭毛運(yùn)動(dòng)；保護(hù)細(xì)胞免受損傷；是正常細(xì)胞的必需成分；阻礙有害物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞（大于800的抗生素）；與細(xì)菌的抗原性致病性和對(duì)噬菌體的敏感性有關(guān)②構(gòu)造：A、 G+細(xì)菌肽聚糖的結(jié)構(gòu)：（以金黃色葡萄球菌為例）其厚度約2080nm，由40層左右網(wǎng)狀分子組成，肽聚糖分子由大量小分子單體構(gòu)成，每一個(gè)肽聚糖單體含三個(gè)組成部分：①雙糖單位：即由一個(gè)N乙酰葡萄胺與一個(gè)N乙酰胞壁酸分子通過B1，4糖苷鍵連接。②短肽“尾”：即由4個(gè)氨基酸按L型與D型交替的方式連接而成。③肽“橋”：在金黃色葡萄球菌中，這一肽橋的氨基端與前一肽聚糖單體“尾中”的第四個(gè)氨基酸——D丙氨酸的羧基相連接，而它的羧基端又與后一肽聚糖單體肽“尾”中的第三個(gè)氨基酸——堿性L賴氨酸相連，從而使兩個(gè)單體肽聚糖單體交聯(lián)起來。B、G—細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)：（以Ecoli為例）其肽聚糖含量占10%以下，一般由12層網(wǎng)狀分子構(gòu)成，其單體與G+的基本相同，①肽尾的第三個(gè)氨基酸為內(nèi)消旋二氨基庚二酸（MDAP）②沒有特殊的肽橋，其前后兩個(gè)單體的聯(lián)系僅由甲肽尾的第4個(gè)氨基酸D丙氨酸的羧基與乙肽尾的第三個(gè)氨基酸MDAP（二氨基庚二酸）的氨基相連 G—細(xì)胞壁，由于肽聚糖含量小，網(wǎng)孔大，又由于被乙醇脫水（脂）后，網(wǎng)孔進(jìn)一步增大，所以在脫色時(shí)，結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物被有機(jī)溶劑所提取，故只能顯示后來的沙黃番紅的顏色，而G+恰相反。（2） 細(xì)胞膜與間體： 位于細(xì)胞壁內(nèi)，電鏡下觀察呈現(xiàn)液態(tài)鑲嵌模型結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜的功能：① 控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)運(yùn)送、交換② 維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓③ 合成細(xì)胞壁組分的場(chǎng)所和合成莢膜④ 進(jìn)行氧化磷酸化或光合磷酸化的產(chǎn)能基地⑤ 鞭毛的著生點(diǎn)和為其提供能量。⑶細(xì)胞質(zhì)：細(xì)胞膜以內(nèi)除核質(zhì)體外的一切透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)總稱細(xì)胞質(zhì)。其主要成分為：核糖體、貯藏物、各種酶、中間代謝物、無機(jī)鹽、質(zhì)粒、少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞還有伴孢晶體和氣泡等。 細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)： 不是所有細(xì)菌都有的，主要包括糖被、鞭毛、菌毛和芽孢。（1）糖被：是某些細(xì)菌細(xì)胞壁外附著的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。根據(jù)厚度不同可分成：微莢膜、莢膜、粘液層。主要成分：多糖、多肽、蛋白質(zhì)。作用：①保護(hù)細(xì)菌免受干旱損傷，對(duì)致病菌來說可保護(hù)他們免受宿主白細(xì)胞的吞噬。②貯存養(yǎng)料，以備營養(yǎng)缺乏時(shí)用。③堆積某些代謝廢物。④通過莢膜使菌體附著在物體表面。⑤細(xì)菌間的信息識(shí)別作用。與生產(chǎn)關(guān)系：可產(chǎn)生很多工業(yè)產(chǎn)品，利用腸膜明串珠菌莢膜提取聚葡萄糖制備代血漿或葡萄糖凝膠試劑。用甘藍(lán)黑腐病黃單孢菌的莢膜生產(chǎn)黃原膠，可用于石油開采中鉆井液添加劑，也可用于印刷、食品等。有些還可于污水處理。破壞作用：有些細(xì)胞的莢膜能使糖液、酒、奶、面包等食品發(fā)粘變質(zhì)；增加某些致病菌的致病力等。（2） 鞭毛和菌毛：① 鞭毛：某些細(xì)菌體表著生的絲狀、波狀附屬物，一般有1數(shù)十根證明鞭毛存在的方法：A、電子顯微鏡直接觀察B、光鏡下染色觀察C、懸滴片（水浸片）觀察其運(yùn)動(dòng)D、半固體培養(yǎng)基中穿刺接種，看其周圍是否混濁E、菌落邊緣不整齊，大而薄，不規(guī)則等。鞭毛的著生方式：一端單生、一端叢生、兩端單生、兩端叢生、周生鞭毛 在各類細(xì)菌中，弧菌、螺菌和假單孢菌普遍都長鞭毛，桿菌中，有的長，有的不長；球菌中只有個(gè)別屬長。 鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，且運(yùn)動(dòng)速度很高，2080um/S。也是菌種分類鑒定中的重要指標(biāo)。② 菌毛：（纖毛、傘毛、絨毛、須毛）是長在細(xì)菌體表的一種纖細(xì)（直徑79nm）、中空（）短直、數(shù)量較多（250300）的蛋白質(zhì)附屬物，一般多見于G中，功能是使細(xì)菌較牢固地粘連在物體（呼吸道、消化道、泌尿生殖道粘膜）上。大部分為致病菌。性菌毛：是一種特殊的菌毛，比菌毛稍長，每個(gè)細(xì)胞有14根；其功能是在不同性別的菌株間傳遞DNA片段；多存于G中。⑶芽孢：某些細(xì)菌在其生長發(fā)育后期，可在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形的抗逆性休眠體，稱為特性：具有極強(qiáng)的抗熱、抗輻射、抗化學(xué)藥物和抗靜水壓的能力。 肉毒梭菌100。C水中。121。C，存活10min。 芽孢抗紫外線的能力，比其營養(yǎng)細(xì)胞強(qiáng)1數(shù)十倍，芽孢的休眠能力是十分驚人的，在休眠時(shí)不能檢出任何代謝能力，因此又稱“隱生態(tài)”。芽孢在普通狀態(tài)下可保存幾年到幾十年，德國的幾個(gè)植物標(biāo)本上曾分離到200300年的枯草芽孢桿菌的芽孢。 有些湖底沉積土中的芽孢桿菌經(jīng)5001000年仍有活力，甚至有存活2000年的記載。 能產(chǎn)生芽孢的細(xì)菌種類并不多，主要是G+桿菌，即芽孢桿菌科的兩個(gè)屬（好氧性的芽孢桿菌屬和厭氧性的梭菌屬）芽孢的構(gòu)造： 芽孢之所以耐高溫，是因?yàn)槠浜心蜔岬倪拎?，6二羧酸（DPA）芽孢的形成過程：芽孢的萌發(fā)：由休眠狀態(tài)的芽孢變成營養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)菌的過程，稱為過程：活化出芽生長活化的方法：短期加熱、低PH環(huán)境、還原劑處理?；罨笠⒓唇臃N到合適的培養(yǎng)基中去，否則將恢復(fù)到休眠狀態(tài)。研究芽孢的意義：①在鑒定菌種時(shí)用②芽孢的存在有利于菌種的篩選和保藏③可代表滅菌的程度。⑶伴孢晶體：少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢的同時(shí)，會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙椎形的堿性蛋白質(zhì)晶體（ 內(nèi)毒素） 它由18種氨基酸組成，對(duì)200多種磷翅目昆蟲有毒害作用，因而可制成細(xì)菌殺蟲劑。（蘇云金芽孢桿菌）微生物個(gè)體微小，單個(gè)微生物只能借助顯微鏡，其結(jié)構(gòu)甚至要借助電子顯微鏡才能看到，那么其群體形態(tài)又是怎樣的呢？二、 細(xì)菌群體（菌落）的形態(tài)：菌落：是由單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞經(jīng)生長繁殖而成的肉眼可見的子細(xì)胞群體。菌苔：多個(gè)菌落融合到一起形成 菌落的形成有種的穩(wěn)定性和專一性，因此可用于微生物的分離、純化、鑒定、計(jì)數(shù)、選種和育種工作中。菌落在固體培養(yǎng)基上形態(tài)的描述：大小、形狀、隆起度、邊緣、表面狀態(tài)（光滑、皺褶等）、表面光澤、表面質(zhì)地（油脂狀、濕潤）、顏色及透明度。液體培養(yǎng)基中的狀態(tài)：有無混濁、顏色改變否、沉淀否、有無氣泡、菌環(huán)等。第三章 真核微生物教學(xué)目的和要求：通過本章的學(xué)習(xí)使學(xué)生掌握什么是真核微生物，以及酵母、菌的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)，繁殖方式等。重點(diǎn)和難點(diǎn)：重點(diǎn)是酵母菌、霉菌的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、繁殖方式、菌落特征。難點(diǎn)是如何區(qū)分細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的菌落。第一節(jié) 酵母菌酵母菌是一個(gè)俗稱，并不是一個(gè)分類學(xué)上的名詞，一般具有以下特點(diǎn)：①個(gè)體一般以單細(xì)胞形式存在②多為出芽繁殖，也有裂殖的③能發(fā)酵糖產(chǎn)能④細(xì)胞壁含甘露聚糖⑤喜歡在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中生長。分布：廣，主要生長在偏酸含糖環(huán)境中，如水果、蔬菜表面，以及果園土壤中和煉油廠附近（分解烴類的）與人類關(guān)系：極其密切。千百年來酵母菌及其發(fā)酵產(chǎn)品大大改善和豐富了人類生活。如酒類飲料、面包制作，甘油發(fā)酵；石油及油品的脫蠟，飼料用、藥用及食用單細(xì)胞蛋白質(zhì)等；以及在核酸等的提取中都有用。但也有少數(shù)會(huì)引起疾病，一般屬條件致病，如：鵝口瘡、陰道炎、輕度肺炎等。一、 細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)：大?。骸?0um，比細(xì)菌粗10倍。形態(tài)：球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀或香腸狀，細(xì)胞分裂旺盛，而未斷開，形成從而假菌絲。菌落：形態(tài)與細(xì)菌相似，但比細(xì)菌大而厚。多數(shù)不透明，表面光滑，濕潤，多數(shù)呈乳白色。二、 酵母菌的繁殖方式及生活史： 酵母菌的繁殖方式及生活史有多種類型，是鑒定的一個(gè)重要指標(biāo)。（一） 無性繁殖：芽殖、裂殖、產(chǎn)生無性孢子芽殖：是無性繁殖的主要方式。是在成熟的酵母細(xì)胞表面向外突出形成一個(gè)小芽，叫芽體，然后部分核物質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入芽體內(nèi)（一套完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)），當(dāng)芽體長大到一定程度時(shí)，從母細(xì)胞脫離，成為一個(gè)新個(gè)體。 裂殖：少數(shù)酵母菌種類象細(xì)菌一樣，以細(xì)胞分裂方式繁殖，裂殖。即核分裂，繼而質(zhì)分裂，最后形成兩個(gè)子細(xì)胞。 無性孢子：少數(shù)種類可以此方式繁殖。如擲孢酵母屬產(chǎn)生擲孢子，地霉屬產(chǎn)生節(jié)孢子；白假絲酵母產(chǎn)生厚垣孢子。（二） 有性繁殖：以產(chǎn)生子囊孢子的形式繁殖 鄰近的兩個(gè)性別不同的細(xì)胞各自向?qū)Ψ缴斐鲆桓軤畹脑|(zhì)突起，相互接觸，局部融合并形成一個(gè)通道，再質(zhì)配，核配、減數(shù)分裂，最后形成4個(gè)或8個(gè)子核，每個(gè)子核與其相近的原生質(zhì)一起，在其表面形成一層孢子壁，就是一個(gè)子囊孢子，原來的母細(xì)胞壁形成子囊。（三） 生活史： 指上代個(gè)體經(jīng)一系列生長、發(fā)育階段而產(chǎn)生下一代個(gè)體的全部歷程，稱為該種生物的生活史。酵母菌的生活史可分為三種類型：營養(yǎng)體即可以單倍體，也可以二倍體形式存在：如啤酒酵母，其主要特點(diǎn)是：① 營養(yǎng)體一般以出芽繁殖②營養(yǎng)體可以單倍體又可以二倍體形式存在③特定條件下才可進(jìn)行有性生殖。過程：①子囊孢子在合適的條件下產(chǎn)生單倍體營養(yǎng)細(xì)胞②單倍體細(xì)胞不斷出芽繁殖③兩性別不同的單倍體細(xì)胞接合形成二倍體④二倍體不斷出芽繁殖⑤在特定條件下（mcclary培養(yǎng)基或胡蘿葡萄塊、kleyn培養(yǎng)基上）二倍體轉(zhuǎn)變成子囊，細(xì)胞核進(jìn)行減分，并形成四個(gè)子囊孢子⑥子囊經(jīng)自然或人工破壁釋放出單倍體孢子。 營養(yǎng)體只以單倍體形式