【正文】 第三章 病毒與亞病毒 第一節(jié) 病毒 第二節(jié) 亞病毒 第三節(jié) 病毒與實踐 第一節(jié) 病毒 ? 概述 ? 病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu) ? 病毒的復制 ? 病毒的溶原性 ? 病毒對理化因素抵抗力 一、病毒的特點和定義 第一節(jié) 概述 特點 1）不具有細胞結(jié)構(gòu)，具有一般化學大分子的特征。 2）一種病毒的毒粒內(nèi)只含有一種核酸， DNA或者 RNA。 3）大部分病毒沒有酶或酶系極不完全，不含催化能量代謝 的酶，不能進行獨立的代謝作用。 4）嚴格的活細胞內(nèi)寄生，沒有自身的核糖體，沒有個體生 長，也不進行二均分裂，必須依賴宿主細胞進行自身的 核酸復制，形成子代。 5）個體微小，在電子顯微鏡下才能看見。 6）對大多數(shù)抗生素不敏感，對干擾素敏感。 例如一些簡單的病毒僅由核酸和蛋白質(zhì)外殼（ coat）構(gòu)成， 故可把它們視為核蛋白分子。 朊病毒甚至僅由蛋白質(zhì)構(gòu)成 病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復制與 表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的 病毒組分裝配（ assembly）成子代毒粒，并以一定方式釋放到 細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制（ replication）。 第一節(jié) 概述 特點 一、病毒的特點和定義 病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征； 既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因 形式的獨特生物類群。 超顯微的、沒有細胞結(jié)構(gòu)的、專性活細胞內(nèi)寄生的實體 第一節(jié) 概述 特點 一、病毒的特點和定義 單細胞微生物與病毒性質(zhì)的比較 a DNA病毒和 RNA病毒中的一部分 。b 性質(zhì) 細菌 立克次氏體 支原體 衣原體 病毒直徑大于 300 nm + + 177。 177。 在無生命培養(yǎng)基生長 + 177。 專性活細胞內(nèi)寄生 + 177。 + +雙分裂 + + + + 含有 DNA 和 R NA + + + + 核酸感染性 +a核糖體 + + + + 產(chǎn)能 代謝 + + + + 細胞膜 + + + + 對抗生素的敏感 + + + + b對干擾素的敏感 +第一節(jié) 概述 定義 一、病毒的特點和定義 迄今仍無一個科學而嚴謹?shù)亩x 病毒為具有獨立于其宿主的進化史的絕對細胞內(nèi)寄生物，它的 DNA 或 RNA基因組被其所編碼的蛋白質(zhì)殼體化（ encapsidation）。 （ Fields等， 1990年） 非細胞生物 （真）病毒：至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分 亞病毒 (subvirus) 類病毒（ viroid)：只含具侵染性的 RNA組分 擬病毒（ virusoid)：只含有不具侵染性的 RNA組分 朊病毒（ prion)：只含蛋白質(zhì) 二 病毒的宿主范圍 第一節(jié) 概述 病毒幾乎可以感染所有的細胞生物，并具有宿主特異性 噬菌體（ phage）、 植物病毒（ plant viruses） 動物病毒（ animal viruses） 三、病毒的培養(yǎng)和純化 第一節(jié) 概述 同微生物學其他學科分支一樣，病毒學的進步完全得益于 研究方法和技術(shù)手段的發(fā)展。 通過病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物 是病毒學研究和實踐的基本技術(shù)。 病毒的培養(yǎng) 病毒的培養(yǎng)： 二元培養(yǎng)物法 四、病毒的培養(yǎng)和純化 病毒的培養(yǎng) 噬菌體 細菌培養(yǎng)物 培養(yǎng)液 營養(yǎng)瓊脂平板 細菌培養(yǎng)液變清亮 細菌平板成為殘跡平板 若是噬菌體標本經(jīng)過適當稀釋再接種細菌平板， 經(jīng)過一定時間培養(yǎng)，在細菌菌苔上可形成圓形局 部透明區(qū)域，即噬斑（ plague）。 雙層平板法 優(yōu)點： ①彌補玻璃皿底面不平的缺陷 ②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上 ③形成的噬菌斑較大，更有利于計數(shù) 噬菌斑 四、病毒的培養(yǎng)和純化 病毒的培養(yǎng) 動物病毒 實驗動物 雞胚 多種細胞培養(yǎng) 四、病毒的培養(yǎng)和純化 病毒的培養(yǎng) 植物病毒 敏感植物葉片 產(chǎn)生壞死斑，或稱枯斑 蛋白質(zhì)提純方法 （鹽析、等電點沉淀、有機溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等） 四、病毒的培養(yǎng)和純化 病毒純化 標準 純化的病毒制備物應保持其感染性 病毒是有感染性的生物體 病毒具有化學大分子的屬性 純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應具有均一性 方法 主要化學組成為蛋白質(zhì) 具有一定的大小、形狀和密度 差速離心 梯度離心 （ 超速離心 ） 第二節(jié) 毒粒的性質(zhì) 病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征； 既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因 形式的獨特生物類群。 毒粒（病毒顆粒）： 病毒的細胞外顆粒形式，也是病毒的感染性形式。 一團能夠自主復制的遺傳物質(zhì) 保護遺傳物質(zhì)免遭環(huán)境破壞，并作為將遺傳物質(zhì)從一個宿主細胞 傳遞給另一個宿主細胞的載體。 蛋白質(zhì)外殼 包膜 第二節(jié) 毒粒的性質(zhì) 一、毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu) 病毒的大小和形狀 個體小，必需在電鏡下觀察； 不同病毒的毒粒大小差別很大； 毒粒的形狀 :動物病毒有球狀、卵圓狀 、磚形 植物病毒有桿狀、絲狀、球狀 噬菌體有蝌蚪狀和絲狀 采用各種電鏡技術(shù)觀察毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu) Orf virus： 口瘡病毒 (接觸性膿皰皮炎病毒 ) （ 負染技術(shù)） Ebola virus ：埃博 拉病毒（正染技術(shù)） Vaccinia virus 痘苗病毒 （投影技術(shù)） 甲型 H1N1型流感病毒 SARS病毒 第二節(jié) 毒粒的性質(zhì) 毒粒 的化學組成 毒粒 （化學組成） 核酸； 蛋白質(zhì)； 脂類； 碳水化合物； 基本化學組成 病毒顆粒在化學上表現(xiàn)為核蛋白 二、毒粒的化學組成 病毒的核酸 ? 核酸是病毒的遺傳物質(zhì)； ? 一種病毒的毒粒只含有一種核酸： DNA或是 RNA； 病毒核酸 單鏈 DNA（ ss DNA， singlestranded DNA）； 雙鏈 DNA（ ds DNA）； 單鏈 RNA（ ss RNA）； 雙