chapter_2_蛋白質-3-蛋白質分離技術(已修改)
2025-01-24 07:41 本頁面
【正文】 Chapter 2 蛋白質 Chapter 2 蛋白質 蛋白質的概念、重要性及分類 氨基酸 蛋白質的結構 蛋白質的結構和功能的關系 蛋白質的性質 蛋白質的提取、分離和純化 蛋白質的分離、純化 研究一個新的蛋白質首先要從它的 基本性質 作為突破口，然后 根據它的基本性質進行分離純化 ，最終用 純品 對其進行分析鑒定。如果對蛋白質的基本性質尚未搞清楚，工作起來將會困難重重。 因此，蛋白質研究技術主要是 對蛋白質的基本性質進行的分析鑒定 。 研究蛋白質的結構、性質和功能，首先需要得到純的蛋白質樣品。 (1)蛋白質來源：微生物細胞、動物細胞和植物細胞； (2)分離和純化過程都必須 0－ 4℃ 的低溫 下進行。 蛋白質的分離、純化 1．蛋白質的分離步驟 (1)生物組織的 機械破碎 。常用的方法有 研磨法、超聲波法、凍融法和酶解法 等。 (2)根據蛋白質的特性，選擇不同的溶劑進行抽提 。 水溶性蛋白用 中性緩沖溶液 抽提； 酸性蛋白用 稀堿性溶液 抽提； 脂溶性蛋白用 表面活性劑 抽提等。 (3)粗提 : 離心除去固體雜質后，可通過鹽析、沉淀法、凝膠濾法、超過濾等處理，得到蛋白質粗制品。 (4)精制 ：可用層析法、電泳法等進行精制。 (5)成品 加工 ：測定蛋白質的性質并干燥成成品。 2．蛋白質的純化方法 ? 透析是利用 蛋白質分子不能透過半透膜 ，而使它與 其它小分子化合物 ，如無機鹽、單糖、雙糖、氨基酸、小肽以及水等分離。 常用的半透膜是玻璃紙或稱賽璐玢紙、火棉紙和其它合成材料。膜有玻璃紙 或 高分子合成材料 ，截止分子量一般為 1萬 。 （ 1）透析法（ dialysis) 透析法 2．蛋白質的純化方法 此法又稱為分子篩層析。凝膠過濾所用的介質是由 交聯(lián)葡萄糖、瓊脂糖或聚丙烯酰胺 形成的凝膠珠。凝膠珠的內部是多孔的網狀結構。 凝膠層析介質： Sephadex葡聚糖凝膠 G10G200 Sepharose瓊脂糖凝膠 2B,4B,6B Seph
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