【正文】 HIV 篩查 實(shí)驗(yàn)室 作業(yè)指導(dǎo)書 手冊(cè)編號(hào)： ***** 01 版 次 號(hào)： 第 1 版 持 有 人： ***** ***醫(yī)院 二 00 八 年 七 月 一 日 1 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 010 第 1 頁(yè) 共 1 頁(yè) 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo)題：目錄 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 標(biāo)題 所在頁(yè)面 HIV 樣品接收、登記和處理 P3 HIV 抗體 篩查 檢測(cè)方法和步驟 P4 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀 使用 P5～ P6 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀 維護(hù) P7 雷勃 MK2 洗板機(jī) 使用 P8～ P10 雷勃 MK2 洗板機(jī) 維護(hù) P11 HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 質(zhì)量控制 P12～ P17 HIV 抗體結(jié)果解釋與報(bào)告 P18 HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 保密程序 P19 HIV 檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存 P20～ P21 HIV 追蹤與處理 P22～ P23 廢棄物處理和消毒 P24 HIV 篩查 實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù) P25 420X 電熱恒溫 培養(yǎng)箱 P26 低速離心機(jī) P27～ P28 HIV 篩查 檢測(cè)操作規(guī)程及安全防護(hù)制度 P29～ P40 附件：樣品登記 本 作業(yè)指導(dǎo)書 血清庫(kù)登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 廢棄物處理登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 儀器設(shè)備使用登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 檢測(cè)人員健康檔案 意外事故登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 設(shè)備（冰箱、恒溫箱）溫度登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 差錯(cuò)登記 本作業(yè)指導(dǎo)書 2 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 01－ 0 第 1 頁(yè) 共 1 頁(yè) 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo)題：前言 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 為加強(qiáng)艾滋病檢測(cè)工作的規(guī)范化、科學(xué)化管理和質(zhì)量控制，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，保證艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室安全，及時(shí)有效地發(fā)現(xiàn) HIV 感染者和上報(bào)疫情，參照 《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》【 2022】 版 ，結(jié)合我縣疾病控制中心的實(shí)際情況，特制定本 作業(yè)指導(dǎo)書 。 本 作業(yè)指導(dǎo)書 包括以下內(nèi)容：樣品的采集、接收、登記和處理； HIV 抗體檢測(cè)的方法和程序；儀器的操作維護(hù)和校正；結(jié)果的解釋與報(bào)告；實(shí)驗(yàn)室的清理與消毒；保密制度；追蹤與處理； HIV 抗體 篩查 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)原始記錄； HIV 抗體篩查報(bào)告； HIV抗體復(fù)檢化驗(yàn)單； HIV 抗體檢測(cè)數(shù)季報(bào)表等。 本 作業(yè)指導(dǎo)書 由 院辦公室 張 **起草、 檢驗(yàn)科 主任 盧 **簽發(fā)之日起執(zhí)行。 本 作業(yè)指導(dǎo)書 為 HIV 抗體 篩查 實(shí)驗(yàn)室作業(yè)指導(dǎo)書，僅供本中心內(nèi)部使用。 ***醫(yī)院 2022－ 07－ 01 3 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 01－ 01 第 1 頁(yè) 共 1 頁(yè) 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo) 題： HIV 樣品接收、登記和處理 編制依據(jù)： 《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 1. 目的 確保 HIV 樣品安全有效地到達(dá)實(shí)驗(yàn)室。 2. 適用范圍 本作業(yè)指導(dǎo)書 適用于 HIV 實(shí)驗(yàn)室安全地接收樣品。 3. 職責(zé) HIV 檢測(cè)人員負(fù)責(zé) 本作業(yè)指導(dǎo)書 的執(zhí)行， 院辦公室 負(fù)責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。 4. 步驟 HIV 樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開(kāi)，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。 核對(duì)樣品與送檢單，檢查樣品管有無(wú)破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立 即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器消毒，同時(shí)報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。 檢查樣品的狀況，記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過(guò)多以及黃疸等情況。如果污染過(guò)重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。 打開(kāi)標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡，以防皮膚或粘膜污染。 接收樣品時(shí)應(yīng) 對(duì)樣品進(jìn)行登記 。 用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品，應(yīng)存放于 20℃以下，短期（ 1 周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣 品可存放于 28℃ 4 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 01－ 02 第 1 頁(yè) 共 1 頁(yè) 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo)題： HIV 抗體 篩查 檢測(cè)方法和步驟 編制依據(jù)： 《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 1. 目的 規(guī)范 HIV 抗體 篩查 檢測(cè)方法和步驟，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。 2. 適用范圍 本作業(yè)指導(dǎo)書 適用于 HIV 抗體檢測(cè)。 3. 職責(zé) HIV 檢測(cè) 人員負(fù)責(zé) 本作業(yè)指導(dǎo)書 的執(zhí)行， 院辦公室 負(fù)責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。 2. 內(nèi)容： 試驗(yàn) 前儀器、材料的準(zhǔn)備 恒溫 培養(yǎng)箱 酶標(biāo)儀 微量振蕩器 洗板機(jī) 定時(shí)鐘 HIV 抗體檢測(cè) ELISA 試劑盒 0－ 50ul， 50－ 250ul 移液器各一把，配備相應(yīng)干燥潔凈吸嘴 1 個(gè) /人份 500ml 燒杯 1 只， 500ml 量筒一個(gè) 試驗(yàn)開(kāi)始前將試劑和樣品放置在室溫 (18～ 23℃ ) 試驗(yàn) 步驟： 檢查 培養(yǎng)箱 溫度是否調(diào)至 37 ℃ (見(jiàn) 培養(yǎng)箱 使用 ) 檢查試劑盒是否在有效期內(nèi)使 用 ,檢查試劑文號(hào)、批號(hào)、有無(wú)衛(wèi)生部批檢合格封簽。 燒杯內(nèi)裝 5000mg/l 次氯酸鈉消毒液。 從試劑盒中取出反應(yīng)板，按試劑盒內(nèi)說(shuō)明書操作及判斷結(jié)果。洗板用洗板機(jī)操作具體見(jiàn)洗板機(jī)操作 注意事項(xiàng)：結(jié)果判斷用酶標(biāo)儀操作具體見(jiàn)酶標(biāo)儀操作 。 5 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 01－ 03 第 1 頁(yè) 共 2 頁(yè) 作業(yè) 指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo)題： 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀使用 編制依據(jù) ： 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀使用說(shuō)明書 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 1. 目的：維護(hù)酶標(biāo)儀的正常工作，規(guī)范酶標(biāo)儀的使用與保養(yǎng)。 2. 適用范圍：適用于 雷勃 MK2 酶標(biāo)儀 3. 職責(zé)： HIV 檢測(cè)人員負(fù)責(zé) 本作業(yè)指導(dǎo)書 的執(zhí)行， 院辦公室 負(fù)責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。 4. 儀器操作： 開(kāi) 機(jī)：將酶標(biāo)儀后部的電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，儀器自檢完畢顯示“準(zhǔn)備就緒…” ，如果聯(lián)機(jī) 電腦是開(kāi)機(jī)狀態(tài)，此時(shí)酶標(biāo)儀顯示“正在由計(jì)算機(jī)控制” ，酶標(biāo)儀開(kāi)機(jī)完畢。 點(diǎn)擊電腦桌面上“ 酶免 ”圖標(biāo)選擇用戶名，輸入密碼，進(jìn)入酶標(biāo)儀控制軟件。 酶標(biāo)儀軟件操作 首次使用應(yīng)在“ 工具 ” →“ 測(cè)試項(xiàng)目 ” →“ 增加 ” 中填寫相應(yīng)的 “代碼”和“名稱”均為“ HIV”，“處理方法”設(shè)置為“定性計(jì)算 1”，然后按“確認(rèn)”。 并 在“ 工具 ” →“ 試劑 ”→“ 增加 ”中填寫相應(yīng)的 試劑信息 （批號(hào)等信息） ，然后按“確認(rèn)”。 依次選擇“ 常用設(shè)置 ”→“ 測(cè)量規(guī)劃 ” → “ 樣本設(shè)置 ”中選擇需要的參數(shù)，在 “ 測(cè)量試劑 ” 中選擇合適的試劑，最后點(diǎn)設(shè)置，依次類推。并在 “ 測(cè)量 1” 對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行設(shè)置，選“ 450NM”。 需要插入步驟的選 “ 選項(xiàng) ” →“ 插入步驟 ”→“ 震動(dòng)步驟 ” ，根據(jù)需要選擇 。 板子布局 根據(jù)試驗(yàn)中板子的布局 ,先選定所要確定的標(biāo)本類型，然后在對(duì)應(yīng)的板孔位置左鍵點(diǎn)擊，例如 A1 孔是空白，先選擇標(biāo)本類型為空白，再左鍵點(diǎn)擊 A1 孔就可以了，定好的布局在試劑盒不變的情況下可以存為模版，以后可以在模版的下拉框直接選擇就可以使用了，確定板子的布局與實(shí)際情況相符，將板子放在樣品盤上，可以點(diǎn)擊“ 測(cè)量 ” 6 ***醫(yī)院 文件編號(hào)： SXX**YY 01－ 03 第 2 頁(yè) 共 2 頁(yè) 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時(shí)間 ： 2022－ 07－ 01 標(biāo)題： 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀使用 編制依據(jù) ： 雷勃 MK3 酶標(biāo)儀使用說(shuō)明書 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 酶標(biāo)儀會(huì)自動(dòng)測(cè)量各孔的 SOD 值并判斷結(jié)果。 樣品的錄入 在“ 常用設(shè)置 ” →“ 測(cè)試樣本 ”可以 錄入對(duì)應(yīng)標(biāo)本的性別、年齡、送檢科室、樣品來(lái)源、送檢醫(yī)生、標(biāo)本 等。 結(jié)果查詢及打印 在“ 文件 ” →“ 打開(kāi) ”中可以根據(jù)日期和 酶標(biāo)板號(hào) 批量打印報(bào)告。 質(zhì)量控制 質(zhì)控血清的設(shè)定 在 工具→質(zhì)控 維護(hù)中輸入質(zhì)控血清的靶值、 SD 值、批號(hào)、濃度、測(cè)量方法等信息。 6 注意事項(xiàng) 保養(yǎng) 為保證儀器持續(xù)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，應(yīng)避免干擾光學(xué)系統(tǒng)的任何部件。光路調(diào)校錯(cuò)誤會(huì)影響測(cè)量結(jié)果。 保持光學(xué)系統(tǒng)的清潔，以確保正常功能和結(jié)果的準(zhǔn)確，應(yīng)避免任何液體流入儀器內(nèi)部，并防塵、防止其它外源性物資，不要用手指摸透鏡表面、慮光鏡、光電監(jiān)測(cè)器。 儀器的常規(guī)清潔應(yīng)該關(guān)閉儀器并拔掉插頭，使用一次性手套，用一次性擦布沾水或溫和去污劑，清潔儀 器外部、導(dǎo)軌和板架。 儀器的工作環(huán)境溫度應(yīng)在 10～ 30℃，相對(duì)濕度不超過(guò) 80％，存儲(chǔ)環(huán)境溫度應(yīng)該在 0～ 40℃，儀器