【正文】 第五章 中藥制劑中各類化學(xué)成分分析 藥物分析學(xué)科 ?掌握中藥制劑中生物堿、黃酮、三萜皂苷、醌類成分的定性、定量原理與方法。 ?熟悉中藥制劑中揮發(fā)性成分、木質(zhì)素類成分的定性、定量原理與方法。 ?了解其他成分（有機(jī)酸類、環(huán)烯醚萜類、香豆素類、單萜及二萜類、多糖類）的分析方法。 【 目的要求 】 藥物分析學(xué)科 第五章 中藥制劑中各類化學(xué)成分分析 學(xué)習(xí)方法 結(jié)構(gòu) 性質(zhì) 分析方法 ? 結(jié)構(gòu)：母核、官能團(tuán)、分子量等 ? 物理化學(xué)性質(zhì)：溶解性、酸堿性、揮發(fā)性、氧化還原性、 旋光性、光譜特性等 ? 分析方法： 總類成分：化學(xué)分析法、分光光度法 單一成分：各種色譜法（ GC、 HPLC、 HPCE、 TLCS、 SFC等） 藥物分析學(xué)科 一、概述 概念：生物堿是生物界除生物體必需的含氮化合物（如 氨基酸、蛋白質(zhì)和 B族維生素等）之外的所有含氮有機(jī)化合 物，因其結(jié)構(gòu)中氮原子上的未共享電子對(duì)而大多具有 堿性 。 含生物堿成分的常用中藥： 第一節(jié) 生物堿類成分分析 中藥名稱 主要生物堿成分 中藥名稱 主要生物堿成分 山豆根 制川烏 馬錢子 延胡索 苦參堿、氧化苦參堿、 槐果堿、金雀花堿 烏頭堿 、 次烏頭堿、 新烏頭堿 馬錢子堿、番木鱉堿 （士的寧）、 偽馬錢子 堿、偽番木鱉堿 延胡索乙素、延胡索甲 素、 原阿片堿、黃連堿 苦 參 麻 黃 黃 連 黃 柏 防 己 苦參堿、 槐定堿、槐果堿、氧化苦參堿 麻黃堿、偽麻黃堿、 去甲麻 黃堿、甲基麻黃堿 小檗堿、 巴馬丁、藥根堿、 黃連堿 小檗堿、藥根堿、 木蘭花堿 粉防己堿、 防己諾林堿、輪 環(huán)藤酚堿、木蘭堿 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 二、理化性質(zhì) 溶解性 大多數(shù)生物堿難溶于水，易溶于 氯仿 、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有機(jī)溶劑； 與酸結(jié)合成鹽后水溶性增加，但酸不同，生成的鹽水溶性有差異； 季銨型生物堿、有氮氧配位鍵的生物堿易溶于水 液體生物堿及一些小分子固體生物堿則既溶于水也可溶于有機(jī)溶劑； 含有酸性官能團(tuán)或酯鍵的生物堿還可溶于一些堿液或熱苛性堿液。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 二、理化性質(zhì) 沉淀反應(yīng) ? 大多數(shù)生物堿在酸性水溶液中可以與某些試劑生成不溶于水的復(fù)鹽或分子復(fù)合物。 ? 生物堿沉淀劑：碘化物復(fù)鹽、重金屬鹽、大分子有機(jī)酸 馬錢子散中生物堿成分的鑒別 取馬錢子散 1g，加濃氨試液數(shù)滴及氯仿 10ml，浸泡數(shù)小時(shí)， 濾過(guò)，取濾液 1ml蒸干，殘?jiān)酉←}酸 1ml使溶解，加碘化鉍 鉀試液 1~2滴，即生成黃棕色沉淀。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 二、理化性質(zhì) 顯色反應(yīng) ? 生物堿在一定 pH條件下可與一些 酸性染料 （多為磺酸肽類）生成有色絡(luò)合物，可被 氯仿 等有機(jī)溶劑定量提出 ? 結(jié)構(gòu)中具有酯鍵的酯堿如烏頭堿等可與 異羥肟酸鐵試劑 反應(yīng)產(chǎn)生 紫紅色 ； 這些特點(diǎn)可用于中藥制劑中生物堿成分的分析 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 二、理化性質(zhì) 紫外光譜特性 ? 結(jié)構(gòu)中具有 共軛體系 的生物堿均有紫外吸收 ? 結(jié)構(gòu)中的氮原子與發(fā)色團(tuán)直接連接或參與發(fā)色團(tuán)的生物堿，其吸收峰位置與測(cè)定時(shí)溶劑的 pH有關(guān) 。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 三、定性鑒別 一般理化鑒別 ? 沉淀反應(yīng)是生物堿理化鑒別常用方法，此反應(yīng)一般在酸性水溶液 中進(jìn)行 ? 制備樣品供試液時(shí)必須凈化處理，防止假陽(yáng)性結(jié)果 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 三、定性鑒別 薄層色譜法 ①吸附劑： 硅膠 、氧化鋁； ②展開劑：多以 氯仿 、苯等低極性溶劑，加入其他溶劑調(diào)整展 開劑的極性； ③由于 硅膠顯弱酸性， 強(qiáng)堿性的生物堿在硅膠色譜板上能形成 鹽， 使 Rf值很小或拖尾、形成復(fù)斑等 。 ④顯色劑： 常用改良碘化鉍鉀試劑 ，有時(shí)噴 碘化鉍鉀 試劑之后 再噴硝酸鈉試劑，可使樣品斑點(diǎn)更加清晰。 如有熒光，不用顯色 ⑤ 亦可用碘蒸汽、硫酸鈰、碘鉑酸等其他的試劑顯色。 討論：如何改進(jìn)？ 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 三、定性鑒別 紙色譜法 ? 可用于生物堿鹽或游離堿的鑒別 HPLC： ? 保留時(shí)間定性 GC： ? 可用于小分子生物堿的鑒別 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （一）總生物堿的含量測(cè)定 化學(xué)分析法 ①主要使用 酸堿滴定法 。 ②強(qiáng)堿滴定生物堿鹽時(shí)，在 70%~90%的乙醇介質(zhì)中終點(diǎn)比在水中明顯，因此常將生物堿鹽溶于 90%乙醇，再用標(biāo)準(zhǔn)堿乙醇液滴定。 ③若選擇的溶劑及指示終點(diǎn)方法合適，還可用非水滴定法進(jìn)行 ④要求：總生物堿的 純度較高 ，用于藥味少成分簡(jiǎn)單制劑的測(cè)定 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （一）總生物堿的含量測(cè)定 分光光度法 （ 1）直接測(cè)定法 ①不經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)、利用生物堿物質(zhì) 自身的光吸收 直接進(jìn)行比色測(cè)定的方法。 ②一般用于 藥味較少 、 干擾小 的中藥制劑中總生物堿的含量測(cè)定。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （一）總生物堿的含量測(cè)定 （ 2）酸性染料比色法（例題 P124） 原理： BH++ In → BH+In（水相） → BH+In（有機(jī)相） 關(guān)鍵： ? 酸性染料的選擇 ：甲基橙、 溴麝香草酚蘭 （ BTB）和溴甲酚綠等； ? pH值的選擇： 與生物堿和酸性染料的性質(zhì)有關(guān)。 ? 有機(jī)溶劑的選擇： 一般用 氯仿、二氯甲烷 ? 水分的干擾及消除 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （一）總生物堿的含量測(cè)定 （ 3）雷氏鹽比色法（注意事項(xiàng) p126） 原理： BH++ [Cr(NH3)2(SCN)4]→ BH [Cr(NH3)2(SCN)4] 測(cè)定方法： （復(fù)鹽沉淀） 復(fù)鹽沉淀 → 溶于 丙酮（或甲醇） → 直接比色測(cè)定 樣品＋ 定量過(guò)量的雷氏鹽 → 過(guò)濾 → 濾液 → 比色測(cè)定 λmax=520nm （ 4）異羥肟酸鐵比色法 用于含有酯鍵結(jié)構(gòu)的生物堿的測(cè)定 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （二）單體生物堿成分含量測(cè)定 TLCS ① 生物堿不具有紫外吸收或揮發(fā)性時(shí)可用本法測(cè)定； ②選用的吸附劑、展開劑及顯色方法與鑒別相似； ③使用改良 碘化鉍鉀等 作為顯色劑時(shí)，必須完全揮干展開劑后（尤其在堿性環(huán)境下展開的）才可噴灑，否則背景深、反差小，影響測(cè)定。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （二）單體生物堿成分含量測(cè)定 HPLC(例題 P128) ① 以 反相高效液相 色譜應(yīng)用較多； ②在反相高效液相色譜中，由于硅膠表面殘留硅醇基的影響，使生 物堿分析易產(chǎn)生保留時(shí)間延長(zhǎng)、峰形變寬、拖尾； ③可在流動(dòng)相中加入 硅醇基抑制劑 、 離子對(duì)試劑等 措施以克服游離 硅醇基的影響，滿足定量分析的要求； ④中藥制劑中生物堿成分進(jìn)行高效液相色譜法測(cè)定時(shí)，使用較多的 是 紫外檢測(cè)器。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 四、含量測(cè)定 （二）單體生物堿成分含量測(cè)定 GC ① 只適用于有揮發(fā)性的，遇熱不分解的生物堿類，如麻黃堿、檳榔 堿、苦參堿和顛茄類生物堿等 ②制備供試品溶液時(shí)一般應(yīng)采用 冷提取 ，凈化過(guò)程也要避免加熱以 防成分的流失，最后需用氯仿等低極性有機(jī)溶劑為溶媒制備成供試 液。 藥物分析學(xué)科 第一節(jié) 生物堿類成分分析 五、常見生物堿成分分析 化合物名稱 結(jié)構(gòu)式 理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及 光譜特征 常用定量分析方法 小檗堿 （黃連