原生質體無菌分離培養(yǎng)與融合(已修改)
2025-10-26 13:06 本頁面
【正文】 植物原生質體的分離，培養(yǎng)與融合 ? 了解植物原生質體分離、融合和培養(yǎng)的基本原理及其過程。 ? 植物原生質體是除去細胞壁后為原生質所包圍的 “ 裸露細胞 ” ，是開展基礎研究的理想材料。其中酶解法分離原生質體是一個常用的技術，其原理是植物細胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質組成，因而使用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶能降解細胞壁成分，除去細胞壁。 ? 許多化學、物理學和生物學方法可誘導原主質體融合，現(xiàn)在被廣泛采 用并證明行之有效的融合方法是聚乙二醇 (PEG)法，高 Ca高pH法和電融合法。 ? PEG誘導融合的機理： PEG由于含有醚鍵而具負極性，與水、蛋白質和碳水化合物等一些正極化基團能形成氫鍵，當 PEG分子足夠長時，可阼為鄰近原生質表面之間的分子橋而使之粘連。 實驗器具 ? 材料滅菌：超凈工作臺，酒精燈，解剖刀，長短鑷子，燒杯（ 4個），玻棒，濾紙若干張，培養(yǎng)皿（ 1個）
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