儀器分析高效液相色譜法(1)(已修改)
2024-10-31 10:08 本頁面
【正文】 1 高效液相色譜法 high performance liquid chromatography 2 ? 以經(jīng)典液相色譜法為基礎(chǔ)，引入氣相色譜的理論與實(shí)驗(yàn)方法，發(fā)展而成的分離分析方法。 ? 以高壓泵輸送液體流動(dòng)相，采用高效固定相，實(shí)現(xiàn)在線檢測和儀器化。具有分離效能高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等的優(yōu)點(diǎn)。 第一節(jié) 概述 3 與氣相色譜法對比 ? GC 快速、分離效率高、樣品用量少。在約300萬個(gè)有機(jī)化合物中，可以直接用該法分析的占 20%。 ? HPLC 快速、分離效率高、樣品不受揮發(fā)性及熱穩(wěn)定性的約束，因而分析對象廣。 4 與經(jīng)典液相色譜法的比較 LC HPLC 固定相粒度 (?m) 70~590% 3~10 柱長（ cm） 10~100 10~30 柱內(nèi)徑（ cm） 2~5 ~ 柱效（ n） 10~100 103~105 樣品用量（ g） 1~10 107~102 分析時(shí)間（ h） 1~20 ~1 裝置 非儀器化 儀器化 5 第一節(jié) 高效液相色譜法的主要類型和原理 ? LLC和 LSC ? 分配、吸附、離子交換和空間排阻 ? 化學(xué)健合相色譜法 ISC和 PIC/IPC 6 二、化學(xué)鍵合相色譜法 ? 將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體的表面構(gòu)成化學(xué)鍵合相。 ? 以化學(xué)鍵合相為固定相的色譜法稱為鍵合相色譜法。 ? 鍵合相色譜法是應(yīng)用最廣的色譜法。 7 鍵合相色譜法 ? 正相色譜法 ? 反相色譜法 ?RHPLC ?ISC ?PIC or IPC 8 （一）正相鍵合相色譜法 ? 固定相：氰基、氨基化學(xué)鍵合相。氨基鍵 合相色譜柱是分析糖類最重要的色譜柱。 ? 流動(dòng)相：烷烴（底劑） +極性調(diào)節(jié)劑 ? 分離機(jī)制：范德華作用力（定向力、誘導(dǎo)力或氫鍵） 流動(dòng)相的極性與容量因子的關(guān)系： 流動(dòng)相極性 ?，洗脫能力 ?， k?， tR? 9 （二）反相鍵合相色譜法 ?常用固定相：十八烷基硅烷（ C18， ODS） ?常用流動(dòng)相：甲醇 — 水，乙腈 — 水 ?分析對象：非極性、中等極性的分子型化合物 ?分離機(jī)制：疏溶劑理論認(rèn)為在該法中溶質(zhì)的保留是溶質(zhì)分子與極性分子間的排斥力。 10 反相鍵合相色譜法 影響保留行為的因素 ? 溶質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)
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