實(shí)驗(yàn)一蛋白質(zhì)的吸光分析測(cè)定(已修改)
2024-10-15 09:17 本頁面
【正文】 實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的吸光分析測(cè)定 張亞東 譚理 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 通過實(shí)驗(yàn)使學(xué)生掌握蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的三種方法的原理、實(shí)驗(yàn)步驟 ? 了解改良 lowry法、 Coomassie亮藍(lán)法、紫外分光光度法測(cè)定蛋白濃度的區(qū)別、優(yōu)缺點(diǎn)以及適用范圍。 實(shí)驗(yàn)原理 ? 改良 Lowry法 在堿性條件下蛋白質(zhì)的肽鍵與 Cu2+螯合，形成蛋白質(zhì) 銅復(fù)合物。（雙縮脲反應(yīng) ） 蛋白質(zhì)分子中帶有酚基的酪氨酸極易使酚試劑中的磷鉬酸磷鎢酸還原，生成鉬藍(lán) 鎢藍(lán)藍(lán)色化合物，藍(lán)色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。利用藍(lán)色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比的關(guān)系可繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定樣品中蛋白質(zhì)含量。（還原反應(yīng)） 改良 lowry法的原理圖
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