蛋白質(zhì)分析法(已修改)
2025-08-17 16:14 本頁面
【正文】 蛋白質(zhì)分析法 蛋白質(zhì)純化 蛋白質(zhì)測序 分子量的測定 X－射線晶體學(xué)與核磁共振 功能分析 蛋白質(zhì)折疊 蛋白質(zhì)組學(xué) 蛋白質(zhì)芯片 蛋白質(zhì)純化 ? 為了研究某一種蛋白質(zhì)，必須首先將該蛋白質(zhì)從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出來 ? 用于分離蛋白質(zhì)的最重要的依據(jù) – 分子大小 – 電荷 – 疏水性 – 親和性 – 重組技術(shù) 凝膠過濾 原理：依據(jù)蛋白質(zhì)分子大小的分離方法 電泳 原理：依據(jù)蛋白質(zhì)帶凈電荷量不同從而在電場中移動速度不同而分離開來 親和層析 原理：依據(jù)親和性進(jìn)行分離，如酶與底物、受體與配體和抗原與抗體反應(yīng)。 重組技術(shù) ? 在一個適合的宿主細(xì)胞中過量表達(dá)重組蛋白質(zhì)，產(chǎn)量的提高大大簡化純化過程 ? 通過在基因的 5’或 3’端加入 6個組氨酸密碼子，形成純化的標(biāo)簽，可進(jìn)一步加速純化進(jìn)程，這使得含有固定金屬離子如可與組氨酸結(jié)合的Ni2+的親和柱上 ? 標(biāo)簽通常對蛋白質(zhì)的功能沒有什么影響 蛋白質(zhì)測序 ?蛋白質(zhì)在測序之前首先需要經(jīng)過水解，得到小肽，然后用自動蛋白質(zhì)測序儀用Edman降解法測定氨基酸序列 蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的測定 ? 依據(jù)凝膠過濾層析將樣品蛋白質(zhì)洗脫時間與已知標(biāo)準(zhǔn)蛋白的洗脫時間相比可給出樣品蛋白的近似
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