蛋白質分析法(已修改)
2025-08-17 16:14 本頁面
【正文】 蛋白質分析法 蛋白質純化 蛋白質測序 分子量的測定 X－射線晶體學與核磁共振 功能分析 蛋白質折疊 蛋白質組學 蛋白質芯片 蛋白質純化 ? 為了研究某一種蛋白質，必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來 ? 用于分離蛋白質的最重要的依據(jù) – 分子大小 – 電荷 – 疏水性 – 親和性 – 重組技術 凝膠過濾 原理：依據(jù)蛋白質分子大小的分離方法 電泳 原理：依據(jù)蛋白質帶凈電荷量不同從而在電場中移動速度不同而分離開來 親和層析 原理：依據(jù)親和性進行分離，如酶與底物、受體與配體和抗原與抗體反應。 重組技術 ? 在一個適合的宿主細胞中過量表達重組蛋白質，產量的提高大大簡化純化過程 ? 通過在基因的 5’或 3’端加入 6個組氨酸密碼子，形成純化的標簽，可進一步加速純化進程，這使得含有固定金屬離子如可與組氨酸結合的Ni2+的親和柱上 ? 標簽通常對蛋白質的功能沒有什么影響 蛋白質測序 ?蛋白質在測序之前首先需要經過水解，得到小肽，然后用自動蛋白質測序儀用Edman降解法測定氨基酸序列 蛋白質分子質量的測定 ? 依據(jù)凝膠過濾層析將樣品蛋白質洗脫時間與已知標準蛋白的洗脫時間相比可給出樣品蛋白的近似
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