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功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法(已修改)

2025-05-28 14:09 本頁面
 

【正文】 功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法 功能蛋白質(zhì)組學(xué) 是指對(duì)蛋白質(zhì)間、蛋白質(zhì)- DNA/RNA 間的相互作用的研究。 以細(xì)胞內(nèi)與某個(gè)功能有關(guān)或某種條件下的一群蛋白質(zhì)為主要研究內(nèi)容, 由此建立細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)傳遞的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。 ? 蛋白質(zhì)芯片技術(shù) ? 噬菌體展示技術(shù) ? 酵母雙雜交系統(tǒng) 蛋白質(zhì)芯片 蛋白質(zhì)芯片 是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體表面,形成微陣列,根據(jù)蛋白質(zhì)分子間特異性結(jié)合的原理,構(gòu)建微流體生物化學(xué)分析系統(tǒng),以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物分子的準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測。 ? 蛋白質(zhì)芯片反應(yīng)結(jié)果的檢測依據(jù)被檢測蛋白樣品的標(biāo)記種類來選擇不同的檢測設(shè)備。熒光標(biāo)記 是芯片息采集中使用最多也是最成功的報(bào)告標(biāo)志。雜交反后的芯片上各個(gè)反應(yīng)點(diǎn)的熒光位置、熒光強(qiáng)弱經(jīng)過芯片掃描儀和相關(guān)軟件可以進(jìn)行分析,將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)成數(shù)據(jù),即可獲得有關(guān)生物信息。 蛋白質(zhì)芯片分類 根據(jù) 固定介質(zhì) 的不同 ,可以分為兩大類 : 化學(xué)型蛋白質(zhì)芯片( SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片) 生物型蛋白質(zhì)芯片(如抗體、受體、配體等); 根據(jù) 片基材料 的不同可以分為: 膜芯片、玻璃芯片和液相芯片等。 目前常用蛋白質(zhì)芯片有: 1. SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片 2. 抗體芯片 3. 靶蛋白質(zhì)芯片 4. 液相蛋白質(zhì)芯片 SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片 表面加強(qiáng)激光解吸電離 飛行時(shí)間質(zhì)譜 (surface enhanced laser desorption /ionization time of flightmass spectrometry, SELDITOFMS ) 蛋白質(zhì)芯片由3部分組成:蛋白質(zhì)芯片 、 閱讀器和分析軟件 。 蛋白質(zhì)芯片是核心部分 , 芯片上固定的介質(zhì)可以是陰離子 、 陽離子 、 疏水性 、 親水性 、 金屬等 ,根據(jù)蛋白質(zhì)的化學(xué)特性而有選擇性地捕獲特異的蛋白質(zhì) 。 SELDI技術(shù)的基本原理 : 將待測樣品滴到芯片表面 (血清 、 尿液 、 分泌液 、細(xì)胞裂解液等 ),
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