植物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)(已修改)
2025-05-26 00:25 本頁面
【正文】 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化的方法種類及特點(diǎn) 植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的一般操作過程 ? 間接轉(zhuǎn)化法： 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法 病毒介導(dǎo)法 植物基因轉(zhuǎn)化技術(shù)方法 ? DNA直接轉(zhuǎn)化法： 基因槍法 電擊法 花粉管通道法 化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)法 顯微注射法 脂質(zhì)體法 間接轉(zhuǎn)化法是以生物體為媒介的植物轉(zhuǎn)基因方法 ,有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和病毒介導(dǎo)法。 間接轉(zhuǎn)化法 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是以 農(nóng)桿菌 為媒介對植物進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的方法。 它是通過根癌農(nóng)桿菌的 Ti質(zhì)粒 (Tumer inducing plasmid)和發(fā)根農(nóng)桿菌的 Ri質(zhì)粒 (Root inducing plasmid)上的一段 TDNA區(qū) 在農(nóng)桿菌侵染 植物形成腫瘤的過程中 ,TDNA可以被轉(zhuǎn)移到植物細(xì) 胞并插入到染色體基因中 。 TDNA能夠進(jìn)行 高頻率 的轉(zhuǎn)移 ,而且 Ti質(zhì)粒和 Ri質(zhì)粒上可以插入到 50kb的外源基因 ,因此 Ti質(zhì)粒和 Ri質(zhì)粒就成為植物基因轉(zhuǎn)化的理想載體系統(tǒng)。 TDNA可以將其攜帶的外源基因 整合 到植物基 因組中 ， T DNA 上較重要的是 T 區(qū)兩端 左右邊 界 各為 25bp 的重復(fù)序列 。 其中 14bp 是中心 ,分 10bp 和 4bp 兩組 ,是完全保守的 。 這兩個(gè)邊界是 T DNA 轉(zhuǎn)移所必需的 。 其中尤以右邊界最為重 要 。 ?TDNA ?vir基因 Ti 質(zhì)粒的 vir 區(qū)大小為 30kb ,分 VirA 、 B 、C 、 D 、 E 、 G 、 H 等 7 個(gè)操縱子 ,一共有 24 個(gè) 基因共同控制著 T DNA 的 加工和轉(zhuǎn)移 ,它們總 稱調(diào)控子。 葉盤 消毒 切取 土壤農(nóng)桿菌浸泡 篩選培養(yǎng)基 愈傷組織 分化幼苗 優(yōu)點(diǎn) ： ?技術(shù)較 成熟 ,轉(zhuǎn)化 效率高
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1