植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉(已修改)
2025-05-26 00:25 本頁面
【正文】 第四章 胚胎培養(yǎng)及離體授粉 目的與要求 了解植物胚培養(yǎng)類型、過程、培養(yǎng)條件，以及胚培養(yǎng)的應(yīng)用。了解植物胚乳培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件，了解胚乳培養(yǎng)在實(shí)踐中的應(yīng)用。認(rèn)識植物胚珠和子房培養(yǎng)方法及其在生產(chǎn)上應(yīng)用。 具備胚胎培養(yǎng)基本認(rèn)知，有進(jìn)行各類胚胎培養(yǎng)的基本能力。 一、胚胎培養(yǎng)概念 胚胎培養(yǎng)是將植物的胚胎與母體分離，培養(yǎng)在已知化學(xué)成分的培養(yǎng)基上。 二、胚胎培養(yǎng)應(yīng)用： 解決育種中實(shí)踐中遇到的問題； 研究胚胎發(fā)育過程中與胚發(fā)育有關(guān)的內(nèi)外因素。 三、胚胎培養(yǎng)類型 幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng) 第一節(jié) 胚培養(yǎng) 一、培養(yǎng)類型 所謂胚培養(yǎng)就是采用人工方法把胚從種子、子房、胚珠中分離出來，放在無菌條件下讓其進(jìn)一步生長發(fā)育、以至形成幼苗的過程。 離體胚培養(yǎng)時期 自養(yǎng)期： 能在基本的無機(jī)鹽和蔗糖培養(yǎng)基上生長。 異養(yǎng)期： 幼胚由胚乳及周圍的組織提供養(yǎng)分。 離體胚培養(yǎng)類型 ⑴ 成熟胚培養(yǎng)（子葉形成以后） ⑵ 幼胚培養(yǎng)（子葉形成之前） 二、培養(yǎng)過程 幼胚培養(yǎng)過程 Hanning早在 1904年就培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚，發(fā)現(xiàn)離體胚可以充分發(fā)育，并且提前萌發(fā)形成小苗，這是世界上胚培養(yǎng)最早獲得成功的一例。 幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)：取材時期 幼胚剝離 培養(yǎng)條件的控制 （是否需要特殊處理） 成熟或未成熟子房 —— 70%酒精浸數(shù) S—— %升汞或飽和漂白粉浸 1030min—— 無菌水沖洗 ——剖出胚珠 —— 取出完整胚 —— 接種在培養(yǎng)基上。 一般采用固體培養(yǎng)法。（同時配制兩種培養(yǎng)基） 培養(yǎng)條件： 2030℃ ， 2021Lx。 1014h 幼胚離體培養(yǎng)的生長發(fā)育方式； (1)胚性發(fā)育 胚只是在體積上增大甚至超過正常胚大小而不能萌發(fā)成苗。 (2)早熟萌發(fā) 幼胚不再發(fā)育，迅速萌發(fā)成幼苗。多數(shù)情況一個幼胚萌發(fā)成一個植株，有時因細(xì)胞分裂形成許多胚狀體，進(jìn)而形成許多植株，即叢生胚現(xiàn)象。 (3)愈傷組織 多數(shù)植物幼胚形成愈傷組織。再分化成胚狀體或形成芽苗。 成熟胚培養(yǎng)過程 種子 —— 95%酒精消毒 —— 選取完好種子 —— 70%酒精浸數(shù) S—— %升汞或 10%次氯酸鈉浸泡 —— 無菌水沖洗 —— 種子培養(yǎng)幾天 —— 剝離種胚 —— 接種在培養(yǎng)基上。 培養(yǎng)條件： 黑暗培養(yǎng)、 25℃ 三、影響因素 （一）培養(yǎng)基 無機(jī)鹽 成熟胚是含有根原基和莖原基以及一個或兩個次生附屬子葉。培養(yǎng)時進(jìn)一步發(fā)育產(chǎn)生根和莖，此時在營養(yǎng)上相對獨(dú)立， 只需要提供簡單的營養(yǎng)條件，在含有大量元素的無機(jī)鹽和糖的培養(yǎng)基上即能生長。 幼胚則是異樣的，要求更復(fù)雜的培養(yǎng)基。 除了一般的無機(jī)鹽成分外，還要加入微量元素和生長輔助物質(zhì)，不同發(fā)育時期的幼胚對培養(yǎng)基成份要求不同，胚齡越小培養(yǎng)及成份越復(fù)雜。
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