植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉(參考版)
2025-05-14 00:25本頁面
【正文】 三、影響離體授粉受精的因素 （一）外植體 柱頭和花柱的影響 胎座的影響（子房或胚珠上帶有胎座，有利于離體受精的成功） 外植體的生理狀態(tài)（開花后 1~2d剝離的胚珠比當天剝離的胚珠結(jié)實率高） （二）培養(yǎng)基（ Nitsch,white,MS等） CaCl 培養(yǎng)基中蔗糖濃度一般為 4%~5%、常用的 有機附加物 （三）培養(yǎng)條件 一般在黑暗或光照較弱的條件下培養(yǎng)，溫度 2025℃ 思考： 解釋胚胎培養(yǎng)概念 說明成熟胚與幼胚對培養(yǎng)基成分的不同要求 什么是胚乳培養(yǎng)？其培養(yǎng)的溫度要求一般在多少范圍？ 胚乳培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基種類是哪些？ 簡述子房發(fā)育成植株的染色體情況 胚珠培養(yǎng)和子房培養(yǎng)有何應(yīng)用？ 。 將帶有完整胎座或部分胎座的胚珠接種在培養(yǎng)基上，并撒播花粉進行受精。 （三）離體胚珠授粉 定義： 離體培養(yǎng)未受精的胚珠，并在胚珠上授粉，最終在試管內(nèi)結(jié)出正常種子的技術(shù)。 2） 離體子房內(nèi)授粉： 指用無菌花粉對離體培養(yǎng)的子房進行授粉，使其發(fā)育為成熟種子的技術(shù)。 注射法： 用 100mg/L硼酸將花粉粒配制成懸浮液，每滴含 100300個花粉粒。 ①步驟： 確定供試植物的開花和花藥開裂時間； 對母本花蕾去雄并套袋； 采集父本花粉； 將花粉引入子房。又稱 子房內(nèi)授粉 。 方法 :在花藥尚未開裂時切取母本花蕾，消毒后，在無菌條件下用鑷子剝?nèi)セò旰托廴?，保留萼片，將整個雌蕊接種在培養(yǎng)基上，當天或第二天在其柱頭上授以無菌的父本花粉。 三種方式 ： 離體柱頭授粉（授于離體雌蕊的位置） 離體子房授粉 離體胚珠授粉 一般都在 試管內(nèi) 完成的。 N6， MS， BN， Nitsch培養(yǎng)基 （二）培養(yǎng)子房的發(fā)育 子房性細胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 單倍體植株 子房體細胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 二倍體植株 三、胚珠和子房培養(yǎng)的應(yīng)用 胚珠 受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 打破種子的休眠 挽救胚的發(fā)育以獲得雜交種 未受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體細胞發(fā)育而來 的植株 子房 授粉子房培養(yǎng)目的 —— 挽救子房內(nèi)雜種胚的發(fā)育 未授粉子房培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體植株 試管受精解決雜交育種中不 親和問題。 撥開幼花，子房接種到培養(yǎng)基上。 根據(jù)培養(yǎng)的子房是否授粉分為： 授粉子房培養(yǎng) 未授粉子房培養(yǎng) （一）子房培養(yǎng)的過程 子房的獲取 未授粉子房在開花前 15天摘取子房，授粉子
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