高中生物同步課件：22 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（4）（人教版選修1）-文庫(kù)吧
2025-10-14 07:23 本頁(yè)面
【正文】 利用空氣中的 N 2 ，硝化細(xì)菌可以利用空氣中的 CO 2 通過(guò)化 能合成作用合成含碳有機(jī)物，而青霉素能抑制原核生物合成肽聚糖，只能將酵母菌從原核生物中分離出來(lái)。 一、分離土壤中分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn) 1 ．本實(shí)驗(yàn)的流程：土壤取樣 → 樣品稀釋 → 取樣涂布 → 微生物的培養(yǎng) → 觀察并記錄結(jié)果 → 細(xì)菌計(jì)數(shù) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離實(shí)驗(yàn) 2 ．課題延伸 —— 菌種的進(jìn)一步鑒定 (1) 原因：由于分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基上可能生長(zhǎng)著以分解尿素的細(xì)菌的代謝產(chǎn)物為氮源的其它微生物。 (2) 原理： CO(N H2)2＋ H2O ―― →脲酶 CO2＋ 2N H3；由于 NH3的產(chǎn)生，培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)， pH 升高，因此可通過(guò)檢測(cè) pH 的變化來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。 (3) 方法：以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌，若指示劑變紅，則 pH 升高，說(shuō)明該種細(xì)菌能分解尿素。 3 ．注意事項(xiàng) (1) 要設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)。主要目的是排除實(shí)驗(yàn)中人為因素對(duì) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)服力和準(zhǔn)確性。統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí)，要至少涂布 3 個(gè)平板作重復(fù)組。 (2) 要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)：主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。 ① 判斷培養(yǎng)基是否有雜菌污染，需將未接種的相同培養(yǎng)基同條件下同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。 ② 判斷該培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基接種相同樣品后同條件下同時(shí)培養(yǎng)。 二、統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目的方法 1 ．顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 ( 1) 原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。 ( 2) 方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 ( 3) 缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。 2 ．間接計(jì)數(shù)法 ( 活菌計(jì)數(shù)法 ) ( 1) 原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落
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