專題22土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)安中-文庫吧
2025-04-16 18:57 本頁面
【正文】 計算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。 優(yōu)點：設(shè)備簡單、能觀察微生物的形態(tài)特征。 缺點：不能區(qū)分死菌和活菌；不適于運動的細(xì)菌計數(shù) 難以計數(shù)微小的細(xì)菌。 應(yīng)用：一般用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細(xì)胞菌體的計數(shù)。 （二）統(tǒng)計菌落數(shù)目 （ 活菌計數(shù)法） ⑴原理： 在稀釋度足夠高時，微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個菌落是由一個單細(xì)胞繁殖而成的，即一個菌落代表原先的一個單細(xì)胞。 ⑵常用方法：稀釋涂布平板法。 每克樣品中的菌落數(shù)＝ (C247。 V) M 其中， C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)， V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積 (ml)， M代表稀釋倍數(shù)。 注意事項 ①為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 30—— 300的平板上進(jìn)行計數(shù)。 ②為使結(jié)果接近真實值可將 同一稀釋度加到三個或三個以上的平皿中 ，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計算出菌落平均數(shù)。 ③ 統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目低。 ④ 涂布平板法所選擇的稀釋度很重要，一般以三個稀釋度中的第二個稀釋度所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在 50個左右為最好。 說明設(shè)置重復(fù)組的重要性 。 第一位同學(xué)只涂布了一個平板 ， 沒有設(shè)置重復(fù)組 ， 因此結(jié)果不具有說服力 。 第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題 ， 涂布了 3個平板 ，但是 ， 其中 1個平板的計數(shù)結(jié)果與另 2個相差太遠(yuǎn) ， 說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤 ， 因此 ， 不能簡單地將 3個平板的計數(shù)值用來求平均值 。 這個實例啟示學(xué)生 ，在設(shè)計實驗時 ， 一定要涂布至少 3個平板 ， 作為重復(fù)組 ，才能增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性 。 在分析實驗結(jié)果時 ，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致 ， 結(jié)果不一致 ， 意味著操作有誤 ， 需要重新實驗 。 （三）設(shè)置對照 對照實驗： 指除了被測試條件以外，其他條件都相同的實驗，作用是比照實驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試條件引起的相應(yīng)結(jié)果。 對照實驗的目的： 排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果 的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 一是由于土樣不同 ， 二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤 。 究竟是哪個原因 ， 可以通過實驗來證明 。實驗方案有兩種 。 一種方案 是可以由其他同學(xué)用與 A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實驗 ， 如果結(jié)果與 A同學(xué)一致 ， 則證明 A無誤；如果結(jié)果不同 ， 則證明 A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題 。
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