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3-2菊花的組織培養(yǎng)-文庫(kù)吧

2025-01-04 05:24 本頁(yè)面


【正文】 Cu、 Zn、 Fe、 Mo、 I、 Co ?有機(jī)物: 甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 ?植物激素: 生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等 培養(yǎng)基的配制 (MS培養(yǎng)基 ) 你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題 2中微生物培養(yǎng)基的配方相比, MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同? 微量元素和大量元素提供植物 細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽 ; 蔗糖提供 碳源 ,同時(shí)能夠維持細(xì)胞的 滲透壓 ; 微生物培養(yǎng)基 以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主 。與微生物的培養(yǎng)不同, MS培養(yǎng)基則需 提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) 。 甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞對(duì) 特殊營(yíng)養(yǎng) 的需求。 影響植物組織培養(yǎng)的因素 不同植物激素濃度的使用順序和使用量 影響植物組織培養(yǎng)的因素 不同植物激素濃度的使用順序和使用量 總結(jié)植物組織培養(yǎng)過(guò)程 : 離體組織或細(xì)胞 植物體 脫分化 細(xì)胞分裂素 ≈生長(zhǎng)素 愈傷組織 芽 根 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 再分化 植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖 上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的? 沒(méi)有進(jìn)行滅菌處理,試管也沒(méi)有做密封等。 ① 細(xì)菌污染: 菌斑呈粘液狀,界限比較明顯,一般接種后 1- 2天即能發(fā)現(xiàn)。主要是大腸桿菌和鏈球菌。 植物組織培養(yǎng)的污染 ②真菌污染: 菌斑呈絨毛狀、絮狀,界限不明顯,伴有不同顏色的孢子接種后 3- 10天才能發(fā)現(xiàn)。主要是霉菌污染。 植物組織培養(yǎng)的污染 外植體帶菌 培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底 接種操作時(shí)帶入 環(huán)境不清潔 污染途徑 消毒:在培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中,都需要是一個(gè) 無(wú)菌環(huán)境 影響植物組織培養(yǎng)的因素 pH、溫度、光照 菊花: pH=、溫度控制在 18— 22℃ 、每日光照 12h 制備 MS固體培養(yǎng)基 外植體消毒 接種 培養(yǎng) 栽培 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 移栽 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 (一)制備 MS固體培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基包括 20多種 營(yíng)養(yǎng)成分,實(shí)驗(yàn)室一般使用 4。 C保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備。 配置各種母液 ①無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮 10倍,微量元素濃縮 100倍,常溫保存 ②激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液 ③用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 配置培養(yǎng)基 ①定容 ②調(diào) PH ③培養(yǎng)基的分裝 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行 高壓蒸汽滅菌 。 注意: ① 溫度為 121℃ 時(shí),維持 1520分鐘。若滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)使培養(yǎng)基中的某些成分變性失效。 ②某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑如
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