3-2菊花的組織培養(yǎng)-在線瀏覽
2025-02-15 05:24本頁(yè)面
【正文】 素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液 ③用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 配置培養(yǎng)基 ①定容 ②調(diào) PH ③培養(yǎng)基的分裝 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行 高壓蒸汽滅菌 。若滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使培養(yǎng)基中的某些成分變性失效。 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 選材： 菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝 （二）外植體消毒 表面消毒 ①流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗 20min左右 ② 酒精處理 — 無(wú)菌水沖洗 用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為 70％的酒精中搖動(dòng) 2－ 3次，持續(xù) 6－ 7s，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗 ③氯化汞（升汞） — 無(wú)菌水沖洗 取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 ％的氯化汞溶液中 1－ 2min，取出后在無(wú)菌水中至少清洗 3次，漂凈消毒液 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 流水沖洗 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 （三）接種 接種室消毒 污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。 無(wú)菌操作要求 操作要在 酒精燈火焰旁 完成，每次使用器械后，都需要用 火焰灼燒滅菌 ，接種后立即蓋好瓶蓋。 材料的切取和接種 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 ?進(jìn)行外植體的接種 接種前用體積分?jǐn)?shù)為 70%的酒精將工作臺(tái)擦拭一遍，打開(kāi)紫外燈照射 20分鐘。 酒精搖動(dòng) 傾倒酒精 無(wú)菌水沖洗 升汞消毒 傾倒升汞 無(wú)菌水沖洗 特別提醒： 接種過(guò)程必須始終在酒精燈旁進(jìn)行，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，操作過(guò)程中避免雙手從培養(yǎng)皿上方移動(dòng)。 思考：你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？ 每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 實(shí)驗(yàn)具體操作過(guò)程 （四）培養(yǎng) 無(wú)菌箱中培養(yǎng)，定期消毒，保持適宜的溫度，光照 ?接種后的錐形瓶放在培 養(yǎng)箱或培養(yǎng)室中培養(yǎng)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ?57天，外植體膨脹、生長(zhǎng)，顏色變淺，若出現(xiàn)染菌，及時(shí)轉(zhuǎn)瓶。 染菌 57天后 染菌 12周后 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ?35周之后，誘導(dǎo)出的新葉片和芽。 蛭石 是一種天然、無(wú)毒的礦物質(zhì)，在高溫作用下會(huì)膨脹的礦物。其晶體結(jié)構(gòu)為單斜晶系，從外形上它看上去像云母。它一般與石棉同時(shí)產(chǎn)生。 蛭石的化學(xué)式為（ Mg， Ca） （ Mg， Fe， Al） [（ Al， Si） ]（ ）。 無(wú)菌條件如何保證？ 三、課題延伸 一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物，也容易進(jìn)行組織培養(yǎng) 實(shí)例：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季
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