國標-》桉樹無性系組培快繁技術規(guī)程-文庫吧
2025-07-21 22:41 本頁面
【正文】 Y／T 1000容器育苗技術3術語和定義 下列術語和定義適用于本標準。3．1褐變browning外植體或培養(yǎng)材料釋放出酚類物質，經(jīng)氧化產(chǎn)生醌類物質的現(xiàn)象。褐變對外植體或培養(yǎng)材料具有 一定的毒害作用。3．2污染contamination培養(yǎng)基或培養(yǎng)材料生長有真菌或細菌等微生物的現(xiàn)象。3．3母液stock solution為稱量準確和方便，將培養(yǎng)基的成分配制成一定濃度和比例的溶液或混合溶液。3．4光培養(yǎng)light culture有光照的培養(yǎng)。通常的植物組織培養(yǎng)，每天均需要12 h～16 h的光照。3．5暗培養(yǎng)dark culture全天無光照的培養(yǎng)。外植體培養(yǎng)初期或愈傷組織再生時，有些植物需要暗培養(yǎng)。3．6增殖培養(yǎng)proliferation culture 繼代培養(yǎng)subculture 離體芽苗、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細胞不斷倍增的培養(yǎng)過程。3．7生根培養(yǎng)rooting culture誘導無根離體芽苗產(chǎn)生根的培養(yǎng)過程。1LY／T 177020083．8瓶苗tube seedling 試管苗 通過植物組織培養(yǎng)產(chǎn)生的離體小植株。3．9叢芽shoot clump由多個基部相連的離體小芽組成的一團芽。3．10瓶苗煉苗acclimatization將組培苗連培養(yǎng)容器一起移至室外近自然環(huán)境中培養(yǎng)，提高苗木的木質化程度，增強苗木對自然光 照和溫差變化適應能力的過程。3．11移栽outplanting 移植 將組培苗種植到苗圃，并使苗木逐漸適宜自然條件的過程。3．12采穗母苗hedge seedling用于建采穗圃的苗木。4繁殖材料來源 采集外植體的母樹應是省級以上良種審(認)定的無性系原株和早期無性系分株。5外植體的采集、消毒與接種5．1外植體的采集與處理5．1．1將母樹環(huán)割或伐倒，采集萌芽條做外植體?；虿杉笜涞闹l，嫁接到同種桉樹或父母本桉樹的小苗砧木上，采集接穗上萌發(fā)的枝條做外植體。5．1．2宜在生長旺盛的季節(jié)，選擇連續(xù)晴天3天以上的天氣，采集半木質化、生長旺盛和無病蟲害的枝 段做外植體。5．1．3采集外植體時，應對每個無性系或優(yōu)樹的外植體加標簽，標明無性系、采集地點、采集時間等。5．1．4宜當天采集，當天消毒。若需要長途運輸或儲藏2日～3日，宜用保濕材料包扎，以免外植體失 水。不宜向外植體或包扎材料噴水，否則容易污染。5．2外植體表面消毒5．2．1 消毒前用洗潔劑將外植體洗凈，并用自來水沖洗15 min～20 rain。5．2．2在超凈工作臺中，用75％酒精消毒8 s～10 S，無菌水沖洗1次。5．2．3用0．1％氯化汞加4滴～5滴吐溫一20的消毒液浸投材料，輕微搖動，嫩枝段消毒2 min～5 rain，老枝段消毒6 min～lO min，后用無菌水沖洗4次～5次，每次8 min～10 min。5．2．4使用后的氯化汞消毒液應按照國家有關劇毒化學藥物使用的法規(guī)進行處理。5．2．5采白干凈少菌環(huán)境的外植體或已用殺菌劑控制雜茵的外植體，可用10％的次氯酸鈣消毒液消毒，嫩枝段10 min～15 rain，老枝段15 min～20 rain。消毒后用無菌水沖洗2次～3次，每次8 min～10min。5．3外植體接種5．3．1將消毒后的外植體切成含有1個～2個腋芽的枝段，垂直或略傾斜接種到叢芽誘導培養(yǎng)基上。5．3．2為了防止褐變，有些無性系的外植體接種后宜暗培養(yǎng)5天～7天后再轉入光培養(yǎng)。2LY／T 177020086培養(yǎng)基的配制6．1培養(yǎng)基成分6．1．1培養(yǎng)基宜含有氮、磷、鉀、鈣、鎂等大量元素，鐵、鋅、錳、銅、鉬、鈷、碘、硼等微量元素，肌醇、甘氨 酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、生物素等有機營養(yǎng)成分，維生素c、半胱氨酸和聚乙烯吡咯烷酮等抗 褐變劑，細胞分裂素和生長素等植物生長調節(jié)劑，糖以及凝固劑瓊脂或卡拉膠。6．1．2培養(yǎng)基應分為叢芽誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。三種培養(yǎng)基的主要差別是大量元素 和植物生長調節(jié)劑的組成與含量。6．1．3不同無性系的培養(yǎng)基配方有所不同，需要調整主要成分銨態(tài)氮的含量、激素的含量、大量元素的總含量等。以尾巨桉為例，叢芽誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基三種培養(yǎng)基的配方參見附錄A。6．2母液配制6．2．1母液宜分為大量元素母液、微量元素母液、有機營養(yǎng)成分母液和植物生長調節(jié)劑母液。蔗糖、瓊脂或卡拉膠和聚乙烯吡咯烷酮不宜配成母液，需要時直接稱樣。6．2．2大量元素母液和有機營養(yǎng)成分母液的各組分濃度應與培養(yǎng)基的組分濃度成50～100的倍數(shù)關系，微量元素母液成200～500的倍數(shù)關系，而植物生長調節(jié)劑母液宜配成0．5 mg／mL或1．0 mg／raL。6．2．3母液宜用無菌的蒸餾水、去離子水或超純水配制。6．2．4配制大量元素母液時，每個組分應單獨溶解，后按氮、磷、鈣、鎂的順序逐個混合，否則容易引起 沉淀。6．2．5微量元素母液應用棕色瓶保存，植物生長調節(jié)劑母液和有機物母液應置于冰箱中保存。6．2．6母液配制后應及時使用，貯存時間不宜超過1個月。母液如有沉淀，或有微生物和藻類生長，應廢棄不用。6．3培養(yǎng)基配制6．3．1依照培養(yǎng)基配方，按比例吸取母液放入容量瓶，加水定容后轉至不銹鋼鍋等容器內(nèi)。6．3．2加入適量凝固劑和糖，并攪拌使凝固劑充分分散，糖充分溶解。6．3．3加熱至剛沸騰，使凝固劑完全溶解。若采用邊分裝邊攪拌的自動化儀器配制培養(yǎng)基時，可省去加熱使凝固劑溶解的過程。6．3．4用1．0 mol／L鹽酸或1．0 mol／L氫氧化鈉調整至適當?shù)乃釅A度。6．3．5盡快將培養(yǎng)
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