第九章糖類物質(zhì)的測(cè)定-文庫(kù)吧
2025-07-17 12:57 本頁(yè)面
【正文】 ：準(zhǔn)確稱取經(jīng) 98 ～ 100 ℃ 干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖，加水溶解后移入 1000 m1容量瓶中，加入 5m1鹽酸 (防止微生物生長(zhǎng) )。 澄清劑 ⑥ 測(cè)定方法 樣品處理 取適量樣品，按本章第二節(jié)中的原則對(duì)樣品進(jìn)行提取，提取液移入 250 m1 容量瓶中，慢慢加入 5 m1乙酸鋅溶液和 5 m1亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，搖勻后靜置 30分鐘。用于燥濾紙過(guò)濾，棄初濾液，收集濾液備用。 堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定 準(zhǔn)確吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各 5ml，置于 250 ml 錐形瓶中，加水 10ml，加玻璃珠 3粒。從滴定管滴加約 9ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加熱使其在 2分鐘內(nèi)沸騰，準(zhǔn)確沸騰 30秒鐘，趁熱以每 2秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。 記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積。平行操作 3次，取其平均值。 m1 = ρ V F—— 10ml 堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄 糖的質(zhì)量 , mg。 ρ—— 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 , mg／ ml； V—— 標(biāo)定時(shí)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積， ml。 也可不標(biāo)定，直接查表求 ρ值。 樣品溶液預(yù)測(cè) 吸取堿性灑石酸銅甲液及乙液各 ，置于250m1錐形瓶中，加水 10 ml．加玻璃珠 3粒，加熱使其在 2分鐘內(nèi)至沸，準(zhǔn)確沸騰 30秒鐘， 趁熱以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣品溶液，滴定時(shí)要始終保持溶液呈沸騰狀態(tài)。待溶液藍(lán)色變淺時(shí)．以每 2秒 1滴的速度滴定，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄樣品溶液消耗的體積。 樣品溶液測(cè)定 吸取堿性灑石酸銅甲液及乙液各 ml，置于250 ml 錐形瓶中，加玻璃珠 3粒，從滴定管中加入比預(yù)測(cè)時(shí)樣品溶液消耗總體積少 1 ml 的樣品溶液，加熱使其在 2分鐘內(nèi)沸騰，準(zhǔn)確沸騰 30秒鐘，趁熱以每 2秒 1滴的速度繼續(xù)滴加樣液，直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。 記錄消耗樣品溶液的總體積。同法平行操作 3份，取平均值。 m 1 m2 m2 m 1 6．說(shuō)明與討論 ① 此法測(cè)得的是總還原糖量。 ② 在樣品處理時(shí)，不能用銅鹽作為澄清劑，以免樣液中引入 Cu2+，得到錯(cuò)誤的結(jié)果。 ③ 堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時(shí)才混合，否則酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物長(zhǎng)期在堿性條件下會(huì)慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。 ④ 滴定必須在沸騰條件下進(jìn)行，其原因一是可以加快還原糖與 Cu2+的反應(yīng)速度；二是次甲基藍(lán)變色反應(yīng)是可逆的，還原型次甲基藍(lán)遇空氣中氧時(shí)又會(huì)被氧化為氧化型。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定， 易被空氣中氧所氧化。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進(jìn)入，避免次甲基藍(lán)和氧化亞銅被氧化而增加耗糖量。 ⑤ 滴定時(shí)不能隨意搖動(dòng)錐形瓶，更不能把錐形瓶從熱源上取下來(lái)滴定，以防止空氣進(jìn)入反應(yīng)溶液中。 ⑥ 樣品溶液預(yù)測(cè)的目的；一是本法對(duì)樣品溶液中還原糖濃度有一定要求 (%左右 )，測(cè)定時(shí)樣品溶液的消耗體積應(yīng)與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)消耗的體積相近，通過(guò)預(yù)測(cè)可了解樣品溶液濃度是否合適，濃度過(guò)大或過(guò)小應(yīng)加以調(diào)整，使預(yù)測(cè)時(shí)消耗樣液量在 10 ml 左右； 二是通過(guò)預(yù)測(cè)可知道樣液大概消耗量，以便在正式測(cè)定時(shí)，預(yù)先加入比實(shí)際用量少 1 ml 左右的樣液，只留下 1 ml 左右樣液在續(xù)滴定時(shí)加入，以保證在 1 分鐘內(nèi)完成續(xù)滴定工作，提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。 ⑧影響測(cè)定結(jié)果的主要操作因素是反應(yīng)液堿度、熱源強(qiáng)度、煮沸時(shí)間和滴定速度。反應(yīng)液的堿度直接影響二價(jià)銅與還原糖反應(yīng)的速度、反應(yīng)進(jìn)行的程度及測(cè)定結(jié)果。 在一定范圍內(nèi)，溶液堿度愈高，二價(jià)銅的還原愈快。因此，必須嚴(yán)格控制反應(yīng)液的體積，標(biāo)定和測(cè)定時(shí)消耗的體積應(yīng)接近，使反應(yīng)體系堿度一致。 熱源一般采用 800 w 電爐，電爐溫度恒定后才能加熱，熱源強(qiáng)度應(yīng)控制在使反應(yīng)液在兩分鐘內(nèi)沸騰，且應(yīng)保持一致。否則加熱至沸騰所需時(shí)間就會(huì)不同，引起蒸發(fā)量不同，使反應(yīng)液堿度發(fā)生變化，從而引入誤差。 沸騰時(shí)間和滴定速度對(duì)結(jié)果影響也較大 ,一般沸騰時(shí)間短，消耗糖液多。反之，消耗糖液少；滴定速度過(guò)快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。因此，測(cè)定時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制上述實(shí)驗(yàn)條件，應(yīng)力求一致。平行試驗(yàn)樣液消耗量相差不應(yīng)超過(guò) 。 (二 )高錳酸鉀滴定法 1．原理 將一定量的樣液與一定量過(guò)量的堿性酒石酸銅溶液反應(yīng)，還原糖將二價(jià)銅還原為氧化亞銅，經(jīng)過(guò)濾，得到氧化亞銅沉淀，加入過(guò)量的酸性硫酸鐵溶液將其氧化溶解，而三價(jià)鐵鹽被定量地還原為亞鐵鹽，用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定所生成的亞鐵鹽，根據(jù)高錳酸鉀溶液消耗量可計(jì)算出氧化亞銅的量，再?gòu)臋z索表中查出與氧化亞銅量相當(dāng)?shù)倪€原糖量，即可計(jì)算出樣品中還原糖含量。（ 447—— 452頁(yè)） 2．適用范圍及特點(diǎn) 本法是國(guó)家
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