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綠茶多糖對(duì)ⅱ型糖尿病小鼠治療機(jī)制研究的設(shè)計(jì)書-文庫吧

2025-07-03 13:35 本頁面


【正文】 形態(tài)多數(shù)呈圓形或類圓形,部分呈小囊形、楔形及不規(guī)則形,散在分布在基底節(jié)及側(cè)腦室旁白質(zhì)區(qū)域。意大利Cazzato等報(bào)道糖尿病的腦梗死以大腦皮質(zhì)和皮質(zhì)下梗死為多見。大多數(shù)病灶密度不均勻,以低密度為主,CT值介于15Hu-25Hu,糖尿病腦梗塞病灶的CT值比非糖尿病腦梗塞平均低8Hu。梗塞常易反復(fù)發(fā)生,無臨床癥狀的腦梗塞多見,臨床常無神經(jīng)系統(tǒng)定位體征??赡芘c腦血管病變的廣泛及血液流變學(xué)改變有關(guān)。急性頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)腦血管病發(fā)病約占10%-30%左右,主要表現(xiàn)為頸內(nèi)動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈及其分支的病變,表現(xiàn)為偏癱、失語、偏側(cè)感覺障礙等。臨床觀察發(fā)現(xiàn),糖尿病腦血管病常表現(xiàn)為進(jìn)展性卒中,肢體力量持續(xù)下降,意識(shí)障礙加深,血糖持續(xù)升高。綠茶是指采取茶樹新葉,未經(jīng)發(fā)酵,經(jīng)殺青、揉擰、干燥等典型工藝,其制成品的色澤,沖泡后的茶湯較多的保存了鮮茶葉的綠色主調(diào)。綠茶茶葉為山茶科植物茶的芽葉,其藥用歷史悠久。從原料老嫩看,老葉含量比嫩葉多。同種茶類級(jí)別低原料老,含量相對(duì)高。綠茶多糖是一種酸性糖蛋白,并結(jié)合有大量的礦質(zhì)元素,稱為茶葉多糖復(fù)合物,簡(jiǎn)稱為茶葉多糖或茶多糖(Tea Polysaccharide)。其上蛋白部分主要由約20種常見的氨基酸組成,糖的部分主要由阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、葡萄糖、半乳糖等,礦質(zhì)元素主要由鈣、鎂、鐵、錳等及少量的微量元素,如稀土元素等組成,其分子量約為107000114000?!?綠茶多糖粗品在85~90℃熱水中的溶解度為76%。其水溶液呈淺褐色透明半稠狀。該溶液與硫酸蒽酮、硫酸苯酚反應(yīng)呈陽性。綠茶多糖不溶于高濃度的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇等有機(jī)溶劑。 綠茶多糖對(duì)熱穩(wěn)定性較差,表現(xiàn)在其水溶液隨干燥溫度增高,色澤變深,其中部分成分在高溫下發(fā)生氧化。而且在熱的作用下,糖類物質(zhì)會(huì)發(fā)生降解,使多糖含量降低。在堿性條件下,茶多糖水溶液顏色加深且隨堿性提高而加劇,并有絲狀沉淀產(chǎn)生。在酸性條件下,無此現(xiàn)象。但隨酸性增強(qiáng),茶多糖發(fā)生降解,含量下降。綠茶多糖有多種的藥理作用,有降血糖、降血脂、抗凝血及抗血栓、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗癌、防輻射、降血壓、減慢心率增加冠脈流量、耐缺氧等作用。在降血糖方面,茶多糖腹腔注射或灌胃均可使正常或糖尿病鼠血糖下降;綠茶多糖可用于糖尿病的輔助治療,所有患者癥狀均好轉(zhuǎn)。綠茶多糖的降血糖效果優(yōu)于消渴丸(主要成分是黃芪生地黃天花粉葛根五味子山藥和優(yōu)降糖)[1]。目前文獻(xiàn)中關(guān)于茶多糖降血糖治療機(jī)制涉及較少。在我國(guó)和日本民間一直有用粗老茶治療糖尿病的傳統(tǒng);小鼠在腹腔注射茶多糖后,血清甘油三酯、膽固醇含量比對(duì)照組均有降低趨勢(shì);在動(dòng)物免疫功能試驗(yàn)中,注射不同劑量茶多糖的小鼠血清中異物清除率值均有明顯增加。茶多糖的降血糖作用已得到公認(rèn),大量研究證明,茶多糖對(duì)糖尿病有明顯的療效。糖尿病的輔助治療;蔡鴻恩用粗老茶對(duì)糖尿病進(jìn)行臨床運(yùn)用,均取得了良好的效果。糖尿病患者飯后服用含有茶多糖的飲料,4周后,其血糖含量和糖基化血紅蛋白值均有明顯的下降。茶多糖的第2個(gè)功能是降血脂。高脂血癥大鼠口服茶多糖總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇等有明顯降低趨勢(shì)?,F(xiàn)今關(guān)于茶多糖的提取方法,報(bào)道的主要有酸提法、堿提法、水提法、微波輔助提取法、酶提法和超聲波提取法等[2]。酶工程技術(shù)是近年來用于天然植物有效成分提取的一項(xiàng)新型生物工程技術(shù),選用合適的酶,可較溫和地將植物組織分解,加速有效成分的釋放,從而提高得率。超聲波提取主要是利用超聲波在液體中的空化作用加速植物有效成份的浸出提取,具有高效、適用性廣、條件溫和等優(yōu)點(diǎn)。茶多糖的水提法提取工藝的研究,國(guó)內(nèi)許多報(bào)道,可分為單獨(dú)提取法和綜合提取法。(1)茶多糖單獨(dú)提取法→水浸提 (2~3次)→沉淀過濾→取濾液濃縮→乙醇沉淀→過濾、回收乙醇→粗多糖→精制、干燥→茶多糖?!掖冀莼亓?3次)→取濾渣→水浸提 (3次)→過濾→提取液濃縮、脫脂、脫蛋白、脫色等→乙醇沉淀(2次)→取濾渣精制、干燥→茶多糖。和方法a相比,該方法在原料提取前用乙醇浸泡脫去一些酚類色素和溶于醇的小分子雜質(zhì),為純化精制打下了基礎(chǔ)?!A(yù)處理(乙醇浸泡或者酶水解)→水浸提→超濾→取濾液→乙醇沉淀→干燥→茶多糖。該方法在前兩種的方法的基礎(chǔ)上將超濾膜引入到茶多糖的提取工藝上,用超濾法對(duì)提取液進(jìn)行粗分離,實(shí)現(xiàn)了茶多糖與茶多酚、咖啡堿的分離,提高了多糖的純度。(2)茶多糖綜合提取法該方法的最后產(chǎn)物不但得到茶多糖,還得到咖啡堿和茶多酚,具有簡(jiǎn)化、效益高等優(yōu)點(diǎn)。大致也可分下面兩類?!兴?2次)→離心、除渣→提取液氯仿萃取→①有機(jī)層→回收氯仿、精制、干燥→ 咖啡堿有機(jī)層→回收、精制、干燥→茶多酚②水層→乙酸乙酯萃取→水層→乙醇醇析→離心、取濾渣、精制、干燥→茶多糖→乙醇浸提→①濾渣酸性乙醇提取→濾液丙酮分離→回收、精制、干燥→茶多糖 有機(jī)層回收、精制、干燥→咖啡堿②濾液濃縮氯仿萃取→回收、精制、干燥→茶多酚 水層乙酸乙酯萃取→水層濃縮、干燥→水溶性復(fù)合物這兩種方法的區(qū)別就在于前者是用水提取的,而后者是用醇提取的,并且后者用了丙酮來粗分離。單獨(dú)提取法與綜合提取法的比較:對(duì)由以上提取方法所得到的產(chǎn)物進(jìn)行比較可知,單獨(dú)提取法僅提取茶多糖,其中的茶多酚和咖啡堿則未被利用;綜合提取法分別提取茶葉中的茶多糖、茶多酚、咖啡堿,可以得到3種產(chǎn)品,具有簡(jiǎn)化、省試劑、效益高等優(yōu)點(diǎn)。在工業(yè)生產(chǎn)中,宜采用綜合提取法,有利于降低成本、提高經(jīng)濟(jì)效益[34]。目前國(guó)內(nèi)對(duì)茶多糖的提取分離和純化的研究不夠深入,阻礙了茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究和作為功能原料的開發(fā)。同時(shí)茶多糖是一種糖蛋白在脫蛋白的同時(shí)帶走大量的糖類含量降低,造成大量的浪費(fèi),損失了珍貴的資源。糖尿病的主要特征為胰島素抵抗和胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足,以及由此導(dǎo)致糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝紊亂。從天然植物中尋找有效的降血糖成分可能為治療糖尿病提供新的方法。前人大量實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)綠茶的確具有降低血糖的功效,其主要的藥理成分為綠茶多糖。粗老綠茶中含有較豐富的多糖。綠茶多糖灌胃后,正常和高血糖小鼠血糖均表現(xiàn)為顯著下降,認(rèn)為綠茶多糖對(duì)糖代謝的影響與胰島素類似。陳海霞(2002)[5]研究了低檔綠茶中的茶多糖對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性糖尿病的防治作用,結(jié)果表明,以400mg/Kg茶多糖灌胃,對(duì)正常小鼠及實(shí)驗(yàn)性糖尿病小數(shù)均有降血糖的作用。陳建國(guó)等(2003)從老茶樹粗老茶葉中提取茶多糖,研究其降血糖和改善糖尿病癥狀的效果,結(jié)果表明,茶多糖能明顯換屆糖尿病小鼠的“三多一少”癥狀,明顯降低其空腹血糖,控制其飲水量,促進(jìn)其體重恢復(fù),并存在一定的劑量反應(yīng)關(guān)系。 研究不足由于糖尿病的發(fā)病機(jī)理復(fù)雜,因此關(guān)于綠茶多糖降低血糖的作用機(jī)理、應(yīng)用前景以及純化和結(jié)構(gòu)分析還沒有探究明白,正
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