動物實驗設(shè)計、結(jié)果分析和解釋-文庫吧
2025-07-03 13:23 本頁面
【正文】 。這些情況我們在進行實驗設(shè)計時也應(yīng)加以考慮。 4）動物健康狀況 臨床疾病會引起明顯的疾病癥狀，患病的動物是不能用來做實驗的。而亞臨床疾病不表現(xiàn)出疾病癥狀，不容易判斷它是否存在。它主要的影響有二。一是，疾病可能影響特定的器官，抑制它們的功能，改變動物的生理和生化狀態(tài)。如果這一功能是實驗過程的測定結(jié)果時，那么實驗結(jié)果很可能產(chǎn)生偏差。二是，亞疾病從廣義上講，對動物的健康造成不利影響，使動物對研究的操作影響變得敏感。 感染帶來的更大問題是疾病的嚴重程度根據(jù)動物的體質(zhì)而變化，因此在實驗的整個動物群體中差別被加大。 5）動物之間相互作用引起的差異 A、動物是群居還是獨居要根據(jù)動物種屬的行為學(xué)特性而定。實驗前應(yīng)了解所使用動物對群居的忍耐方式的不同，如，地鼠是獨居動物，在實驗條件下不適合群居生活；而小鼠的大多數(shù)品系獨居是一種應(yīng)激情形。 35只小鼠最佳，或獨居的動物給予一定的豐富生活的物品（遮掩物和玩具）可降低應(yīng)激情形。 B、動物社會階層的建立，會影響到實驗的數(shù)據(jù)的差異。另外還要考慮動物建立社會等級的過程中，存在相當高的侵略性，群體中因而引起持續(xù)的應(yīng)激和明顯影響動物行為學(xué)、生理學(xué)和生化特征的情況。實驗前將動物分組群居時，讓動物等級社會完全建立穩(wěn)定再進行實驗處理是十分必要的。 人員培訓(xùn)的重要性 1）了解動物飼養(yǎng)管理的基本知識。 2）規(guī)范操作減少動物緊張和痛苦水平。 3）隨機化的處理安排減少處理動物對隨后動物處理的困難和帶來實驗數(shù)據(jù)差異。 一個有效減少由于不專業(yè)操作帶來的結(jié)果差異的方法是在單位建立專業(yè)化的中心設(shè)施和部門，由專業(yè)化的操作能手代替研究者進行操作。 SHEFFIELD大學(xué)進行小鼠免疫的例子。 三、實驗設(shè)計的步驟 開始階段 1）文獻查閱 2）科研方法 3）陳述問題、目標和假說 4）動物模型的確定 5）實驗人員的確定 1）文獻查閱 查閱的文獻應(yīng)廣泛包括現(xiàn)在和過去的雜志以及網(wǎng)絡(luò)上的信息資源，如， MEDLINE、 TOXLINE、PUBMED、 NCBI等，目的是了解清楚你所研究的焦點問題都已知道些什么，明確所用的方法、動物模型，排除不必要的重復(fù)研究。也是為 IACUC審查提供項目不是重復(fù)研究、替代動物實驗的方法不可行、可能引起動物疼痛的操作已得到評估認可的證據(jù)。 2）確立科研方法 1 觀察和描述實驗中的現(xiàn)象， 2 系統(tǒng)地提出問題的解釋和學(xué)說， 3 利用學(xué)說預(yù)測新的觀察結(jié)果， 4 驗證學(xué)說。 3）問題的提出 明確提出問題、目標和可能的結(jié)果十分關(guān)鍵。提出的問題應(yīng)包括實驗將要說明的問題和它的意義。目標應(yīng)該對總目標有一個概括性的描述，對特殊的問題加以闡明。應(yīng)對每一個實驗方案有兩個清晰的可能的結(jié)果（如，一個無效，一個預(yù)期）。無效結(jié)果明確兩實驗組間沒有差別，預(yù)期結(jié)果表明在實驗組之間有真實的差別。 例子： ?提出問題：那種飼料引起大鼠體重增加，是飼料A還是 B？ ?無效：各組實驗預(yù)期得到同樣結(jié)果，即大鼠用飼料 A和 B體重增加相同。 ?預(yù)期：實驗組之間預(yù)期出現(xiàn)不同的結(jié)果。 ?不可檢驗：結(jié)果不容易明確或解釋。 4）動物模型的確定 為實驗選擇最適當?shù)膭游锬Ｐ停幸韵聨c建議：1 使用系統(tǒng)發(fā)育水平最低的動物， 2 使用的動物具有想要的種屬或品系專一的特點或者具有特定研究目的必需的特點， 3 考慮在實驗期間得到和維持動物模型所需要的花費， 4 充分查閱文獻，與同一領(lǐng)域的同事討論，與供應(yīng)商或動物模型資源庫聯(lián)系確定動物模型可能的來源渠道， 5 在最終決定動物模型前征詢實驗動物獸醫(yī)的意見。 5）實驗合作者的確定 根據(jù)實驗實施的操作，決定什么樣專長的人是需要的。在開始項目前，就確定每個人的職責和進行的工作以及資格。合理地進行人員的分工安排，參與計算、實驗設(shè)計和樣品收集對確保所得數(shù)據(jù)的有效性是十分重要的。一般一個大型研究單位的實驗動物中心設(shè)施可提供涉及本專業(yè)高技術(shù)含量的操作和昂貴裝備的服務(wù)。 正式設(shè)計階段 1）研究方案 2）實驗單元 3） N因子：實驗組別的動物只數(shù) 4）對照 5）隨機化 1）研究方案 針對提出的問題、研究目標和假說，進行實驗的所有操作及安排應(yīng)細心地計劃和記錄在案。方案中應(yīng)包括針對可控實驗變量的實驗操作、適合測定的變量參數(shù)（即得到準確測定實驗變量控制的效應(yīng)）、獲得樣品和產(chǎn)生實驗數(shù)據(jù)的最適方法。項目的所有實物和數(shù)據(jù)收集和測定的時間安排表都應(yīng)這時確定。 實際操作的討論包括動物模型持續(xù)的時間（慢性研究），模型中預(yù)期疾病的進程（決定測定的最適時間點），人員參加項目的時間和崗位，實驗花費。已知和潛在的危害因子也必須明確，最小危害因子風險適當預(yù)防措施也必須在方案中明確。所有實驗操作步驟應(yīng)通過 SOP詳細規(guī)定。 方案中還應(yīng)包括數(shù)據(jù)分析的方法，如果組間差異是通過統(tǒng)計學(xué)計算而得，那么應(yīng)明確所用統(tǒng)計學(xué)檢驗的方法。由數(shù)據(jù)分析對最初所提問題作出回答并接受或否決假說，由此得出結(jié)論。 2）實驗單元 研究的實體是實驗單元，可以是一個動物個體，也可以是一組動物群體。例如，當測試藥物治療和外科手術(shù)時，一個大鼠個體就是一個實驗單元，當測試環(huán)境致畸時，一整窩大鼠就是一個實驗單元。 3）實驗組別的動物只數(shù) 將適
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