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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、結(jié)果分析和解釋-文庫(kù)吧

2025-07-03 13:23 本頁(yè)面


【正文】 。這些情況我們?cè)谶M(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)也應(yīng)加以考慮。 4)動(dòng)物健康狀況 臨床疾病會(huì)引起明顯的疾病癥狀,患病的動(dòng)物是不能用來(lái)做實(shí)驗(yàn)的。而亞臨床疾病不表現(xiàn)出疾病癥狀,不容易判斷它是否存在。它主要的影響有二。一是,疾病可能影響特定的器官,抑制它們的功能,改變動(dòng)物的生理和生化狀態(tài)。如果這一功能是實(shí)驗(yàn)過(guò)程的測(cè)定結(jié)果時(shí),那么實(shí)驗(yàn)結(jié)果很可能產(chǎn)生偏差。二是,亞疾病從廣義上講,對(duì)動(dòng)物的健康造成不利影響,使動(dòng)物對(duì)研究的操作影響變得敏感。 感染帶來(lái)的更大問(wèn)題是疾病的嚴(yán)重程度根據(jù)動(dòng)物的體質(zhì)而變化,因此在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)動(dòng)物群體中差別被加大。 5)動(dòng)物之間相互作用引起的差異 A、動(dòng)物是群居還是獨(dú)居要根據(jù)動(dòng)物種屬的行為學(xué)特性而定。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)了解所使用動(dòng)物對(duì)群居的忍耐方式的不同,如,地鼠是獨(dú)居動(dòng)物,在實(shí)驗(yàn)條件下不適合群居生活;而小鼠的大多數(shù)品系獨(dú)居是一種應(yīng)激情形。 35只小鼠最佳,或獨(dú)居的動(dòng)物給予一定的豐富生活的物品(遮掩物和玩具)可降低應(yīng)激情形。 B、動(dòng)物社會(huì)階層的建立,會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的差異。另外還要考慮動(dòng)物建立社會(huì)等級(jí)的過(guò)程中,存在相當(dāng)高的侵略性,群體中因而引起持續(xù)的應(yīng)激和明顯影響動(dòng)物行為學(xué)、生理學(xué)和生化特征的情況。實(shí)驗(yàn)前將動(dòng)物分組群居時(shí),讓動(dòng)物等級(jí)社會(huì)完全建立穩(wěn)定再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理是十分必要的。 人員培訓(xùn)的重要性 1)了解動(dòng)物飼養(yǎng)管理的基本知識(shí)。 2)規(guī)范操作減少動(dòng)物緊張和痛苦水平。 3)隨機(jī)化的處理安排減少處理動(dòng)物對(duì)隨后動(dòng)物處理的困難和帶來(lái)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)差異。 一個(gè)有效減少由于不專(zhuān)業(yè)操作帶來(lái)的結(jié)果差異的方法是在單位建立專(zhuān)業(yè)化的中心設(shè)施和部門(mén),由專(zhuān)業(yè)化的操作能手代替研究者進(jìn)行操作。 SHEFFIELD大學(xué)進(jìn)行小鼠免疫的例子。 三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的步驟 開(kāi)始階段 1)文獻(xiàn)查閱 2)科研方法 3)陳述問(wèn)題、目標(biāo)和假說(shuō) 4)動(dòng)物模型的確定 5)實(shí)驗(yàn)人員的確定 1)文獻(xiàn)查閱 查閱的文獻(xiàn)應(yīng)廣泛包括現(xiàn)在和過(guò)去的雜志以及網(wǎng)絡(luò)上的信息資源,如, MEDLINE、 TOXLINE、PUBMED、 NCBI等,目的是了解清楚你所研究的焦點(diǎn)問(wèn)題都已知道些什么,明確所用的方法、動(dòng)物模型,排除不必要的重復(fù)研究。也是為 IACUC審查提供項(xiàng)目不是重復(fù)研究、替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法不可行、可能引起動(dòng)物疼痛的操作已得到評(píng)估認(rèn)可的證據(jù)。 2)確立科研方法 1 觀察和描述實(shí)驗(yàn)中的現(xiàn)象, 2 系統(tǒng)地提出問(wèn)題的解釋和學(xué)說(shuō), 3 利用學(xué)說(shuō)預(yù)測(cè)新的觀察結(jié)果, 4 驗(yàn)證學(xué)說(shuō)。 3)問(wèn)題的提出 明確提出問(wèn)題、目標(biāo)和可能的結(jié)果十分關(guān)鍵。提出的問(wèn)題應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)將要說(shuō)明的問(wèn)題和它的意義。目標(biāo)應(yīng)該對(duì)總目標(biāo)有一個(gè)概括性的描述,對(duì)特殊的問(wèn)題加以闡明。應(yīng)對(duì)每一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案有兩個(gè)清晰的可能的結(jié)果(如,一個(gè)無(wú)效,一個(gè)預(yù)期)。無(wú)效結(jié)果明確兩實(shí)驗(yàn)組間沒(méi)有差別,預(yù)期結(jié)果表明在實(shí)驗(yàn)組之間有真實(shí)的差別。 例子: ?提出問(wèn)題:那種飼料引起大鼠體重增加,是飼料A還是 B? ?無(wú)效:各組實(shí)驗(yàn)預(yù)期得到同樣結(jié)果,即大鼠用飼料 A和 B體重增加相同。 ?預(yù)期:實(shí)驗(yàn)組之間預(yù)期出現(xiàn)不同的結(jié)果。 ?不可檢驗(yàn):結(jié)果不容易明確或解釋。 4)動(dòng)物模型的確定 為實(shí)驗(yàn)選擇最適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型,有以下幾點(diǎn)建議:1 使用系統(tǒng)發(fā)育水平最低的動(dòng)物, 2 使用的動(dòng)物具有想要的種屬或品系專(zhuān)一的特點(diǎn)或者具有特定研究目的必需的特點(diǎn), 3 考慮在實(shí)驗(yàn)期間得到和維持動(dòng)物模型所需要的花費(fèi), 4 充分查閱文獻(xiàn),與同一領(lǐng)域的同事討論,與供應(yīng)商或動(dòng)物模型資源庫(kù)聯(lián)系確定動(dòng)物模型可能的來(lái)源渠道, 5 在最終決定動(dòng)物模型前征詢實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)的意見(jiàn)。 5)實(shí)驗(yàn)合作者的確定 根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)施的操作,決定什么樣專(zhuān)長(zhǎng)的人是需要的。在開(kāi)始項(xiàng)目前,就確定每個(gè)人的職責(zé)和進(jìn)行的工作以及資格。合理地進(jìn)行人員的分工安排,參與計(jì)算、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和樣品收集對(duì)確保所得數(shù)據(jù)的有效性是十分重要的。一般一個(gè)大型研究單位的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心設(shè)施可提供涉及本專(zhuān)業(yè)高技術(shù)含量的操作和昂貴裝備的服務(wù)。 正式設(shè)計(jì)階段 1)研究方案 2)實(shí)驗(yàn)單元 3) N因子:實(shí)驗(yàn)組別的動(dòng)物只數(shù) 4)對(duì)照 5)隨機(jī)化 1)研究方案 針對(duì)提出的問(wèn)題、研究目標(biāo)和假說(shuō),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的所有操作及安排應(yīng)細(xì)心地計(jì)劃和記錄在案。方案中應(yīng)包括針對(duì)可控實(shí)驗(yàn)變量的實(shí)驗(yàn)操作、適合測(cè)定的變量參數(shù)(即得到準(zhǔn)確測(cè)定實(shí)驗(yàn)變量控制的效應(yīng))、獲得樣品和產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的最適方法。項(xiàng)目的所有實(shí)物和數(shù)據(jù)收集和測(cè)定的時(shí)間安排表都應(yīng)這時(shí)確定。 實(shí)際操作的討論包括動(dòng)物模型持續(xù)的時(shí)間(慢性研究),模型中預(yù)期疾病的進(jìn)程(決定測(cè)定的最適時(shí)間點(diǎn)),人員參加項(xiàng)目的時(shí)間和崗位,實(shí)驗(yàn)花費(fèi)。已知和潛在的危害因子也必須明確,最小危害因子風(fēng)險(xiǎn)適當(dāng)預(yù)防措施也必須在方案中明確。所有實(shí)驗(yàn)操作步驟應(yīng)通過(guò) SOP詳細(xì)規(guī)定。 方案中還應(yīng)包括數(shù)據(jù)分析的方法,如果組間差異是通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算而得,那么應(yīng)明確所用統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)的方法。由數(shù)據(jù)分析對(duì)最初所提問(wèn)題作出回答并接受或否決假說(shuō),由此得出結(jié)論。 2)實(shí)驗(yàn)單元 研究的實(shí)體是實(shí)驗(yàn)單元,可以是一個(gè)動(dòng)物個(gè)體,也可以是一組動(dòng)物群體。例如,當(dāng)測(cè)試藥物治療和外科手術(shù)時(shí),一個(gè)大鼠個(gè)體就是一個(gè)實(shí)驗(yàn)單元,當(dāng)測(cè)試環(huán)境致畸時(shí),一整窩大鼠就是一個(gè)實(shí)驗(yàn)單元。 3)實(shí)驗(yàn)組別的動(dòng)物只數(shù) 將適
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