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正文內(nèi)容

nti使用手冊中文版-文庫吧

2025-06-14 07:45 本頁面


【正文】 文本塊后可以進(jìn)行上下拖移和改變形狀的功能; 按下鼠標(biāo)右鍵可 以更改格式,點(diǎn)選 Properties 后可選擇許多不同表示方法(圖 ): (圖 )。圖 利用 Properties 進(jìn)行編輯后的結(jié)果 如果是在文本塊下按鼠標(biāo)右鍵, 并點(diǎn)選 Properties 可以進(jìn)行對文字的編輯(圖 ):圖 利用 Properties 進(jìn)行文字的編輯 (圖 )。圖 Properties 文字編輯的結(jié)果   在最旁邊有個回形針的按鈕(圖 ),點(diǎn)選之后可以輸入相關(guān)的文字作為批 注。所輸入的文字也可以進(jìn)行相關(guān)的調(diào)整: 圖 為圖形增加文字批注   按下 OK 就會顯示在圖譜窗口上(圖 ), 所輸入的文字批注也會在文字窗口 中出現(xiàn)。圖 圖形的批注結(jié)果 NOTE:想要刪除圖形或是文字的話可以點(diǎn)選欲刪除的區(qū)塊,按下鼠標(biāo)右鍵或是 進(jìn)入 Edit 內(nèi)選擇 Delete Feature Form FMap,再按確定就可以了。 圖形的輸出:在畫好圖片后,要如何從 Vector NTI 中輸出呢?我們只要執(zhí)行 指令(圖 )就可以將圖形復(fù)制,操作方式同上一章所述。 圖 將編輯好的圖形輸出   圖形輸出后可以進(jìn)行再編輯,以復(fù)制到 PowerPoint 為例子(圖 ),輸出的圖 輸出到 PowerPoint 的圖形結(jié)果 圖形為群組圖案,我們只要取消群組圖案后就可以編輯圖形和文字了。   如此一來我們就有一張漂亮的序列圖形,可以應(yīng)用在報(bào)告或論文寫作上了。  序列轉(zhuǎn)譯  用戶可以將 DNA 序列藉由 Vector NTI 軟件轉(zhuǎn)譯成為胺基酸序列,第一個方 按鈕(圖 ): 式如前一章所介紹的在主程序下直接用 圖 將 DNA 序列轉(zhuǎn)成胺基酸   如果想要取消這項(xiàng)功能,只要按下 就可以了(圖 )。 圖 取消 DNA 序列轉(zhuǎn)成胺基酸 ,輸出后必須 要再調(diào)整字型跟格式。   另一種作法是將欲轉(zhuǎn)譯的序列選取后, 進(jìn)入上方 Analyses→Translation(圖 ) 功能進(jìn)行轉(zhuǎn)譯:圖 利用 Analyses→Translation,將 DNA 序列轉(zhuǎn)成胺基酸   在進(jìn)行轉(zhuǎn)譯之前,使用者可以針對特定的物種設(shè)定轉(zhuǎn)譯的密碼,主程序的密 碼設(shè)定為一般標(biāo)準(zhǔn)的密碼,我可以進(jìn)入 Set Genetic Code(圖 )來更改密碼:圖 利用 Genetic code 更改轉(zhuǎn)譯密碼 ,用戶若要進(jìn)行密碼編輯時(圖 ),可以按下 NEW 這個按鈕進(jìn)行編輯:圖 選取海大斑馬魚密碼進(jìn)行編輯     決定好密碼后,用戶即可使用 Analyses→Translation→Into New Protein 來進(jìn)行圖 利用 Direct Strand 來進(jìn)行序列正股轉(zhuǎn)譯 序列轉(zhuǎn)譯的功能:   其中 Direct Strand(圖 )是將 DNA 序列進(jìn)行正股轉(zhuǎn)譯;Complementary Strand 是將序列的互補(bǔ)股進(jìn)行轉(zhuǎn)譯;而 6 Frame Translation 是將正股和互補(bǔ)股各從起使 第一、第二和第三的位置進(jìn)行轉(zhuǎn)譯,所以會有六個胺基酸序列數(shù)據(jù)產(chǎn)生(圖 ):圖 進(jìn)行 DNA 序列正股轉(zhuǎn)譯后的結(jié)果   執(zhí)行這三個指令后程序會產(chǎn)生一個新的窗口(若采用 6 Frame Translation 功能 則會產(chǎn)生六個),在程序執(zhí)行轉(zhuǎn)譯功能前會跳出一個建立序列的窗口(圖 ),用 戶可以在此窗口命名和進(jìn)行相關(guān)的批注,也可以將此序列檔案存放在 Local Database 的特定位置:圖 序列轉(zhuǎn)譯之前的命名及批注編輯   完成之后按確定就會出現(xiàn)序列轉(zhuǎn)譯后的結(jié)果(圖 ):圖 序列轉(zhuǎn)譯后的結(jié)果   進(jìn)行轉(zhuǎn)譯功能后所產(chǎn)生的窗口,其界面的操作方式跟原本的窗口完全相同, 我們可以進(jìn)行序列編輯、繪圖以及數(shù)據(jù)輸出,在文字窗口的 Analysis 項(xiàng)目可以看 到本程序?qū)D(zhuǎn)譯出蛋白質(zhì)序列的相關(guān)批注。   Feature(圖 ):這個選項(xiàng)的功能和上述功能很接近,差別只是在于用戶可 以利用此功能直接轉(zhuǎn)譯序列中的某特定區(qū)段, 只要把光標(biāo)點(diǎn)選欲分析的區(qū)塊就可 以執(zhí)行此功能:圖 利用 Feature 工具,可以直接轉(zhuǎn)譯序列中所選取的部分    CDS with Splicing:這個項(xiàng)目將在日后進(jìn)行 Intron、Exon 分析時再進(jìn)行更進(jìn) 一步的說明。 Analyses→Translation→In Sequence Pane:這個項(xiàng)目其實(shí)就等于 按鈕,其 內(nèi)建的功能跟 Into New Protein 是一樣的, 差別只是在于轉(zhuǎn)譯的結(jié)果直接顯示在原 本的序列上方。除此之外最下面多了一個 ORFs 的功能,這個功能可以幫助我們 分析序列的 Open reading frame: 首先使用者需先將分析 Open reading frame(圖 ) 的功能打開。先將鼠標(biāo)指向序列窗口,按下鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)選 Display Setup:圖 利用 ORF 工具,進(jìn)行序列分析   我們只要把 ORFs 的項(xiàng)目打勾,若需要進(jìn)行調(diào)整則按下 , 此功能用戶可以自行設(shè)定 Open reading frame 的判定標(biāo)準(zhǔn),完成之后按下 OK,用 戶將會在此窗口見到程序所注記的 Open reading frame 片段(圖 ):圖 利用 ORF 得到由 ORF 分析的結(jié)果   若要重新設(shè)定 Open reading frame 的分析只要執(zhí)行 Analyses→Translation→In Sequence Pane→ORFs,就可以重新進(jìn)行條件設(shè)定(此項(xiàng)目等同于 )。   Back Translation:此功能能夠幫助用戶把胺基酸序列反轉(zhuǎn)譯成為 DNA 序列, 使用者只要選取欲分析之片段,接著執(zhí)行 Analyses→Back Translation 即可,執(zhí)行 反轉(zhuǎn)譯功能后會出現(xiàn)一個新窗口(圖 ):圖 利用 Back Translation 將胺基酸序列反轉(zhuǎn)譯為 DNA 序列   窗口上方的序列是原本的胺基酸序列,下方是進(jìn)行反轉(zhuǎn)譯后所產(chǎn)生之 DNA 序列,我們可以根據(jù)物種的不同來進(jìn)行條件的設(shè)定,Translation Table 可以下拉選 擇物種。而 degenerate 的選項(xiàng)則可以調(diào)整退化程度,越往右邊拉則序列退化度會 越大,反轉(zhuǎn)譯出所產(chǎn)生的 DNA 序列也就越趨于復(fù)雜。窗口上方的 Table 指令可 以調(diào)整轉(zhuǎn)譯功能的相關(guān)參數(shù)設(shè)定,Camera 指令可以輸出反轉(zhuǎn)譯的序列。 :// 限制酶切位分析在 NTI 主程序中, 用戶可以針對序列的限制酶切位和切割后的片段進(jìn)行分析 (圖 )。在主程序中,開啟上方 Analysis 選項(xiàng)進(jìn)入 Restriction Analysis:圖 限制酶切位和切割后的片段分析   在 Restriction Sites 的選項(xiàng)中用戶可以設(shè)定欲分析的限制酶:圖 利用 Restriction Sites 選項(xiàng)設(shè)定欲分析的限制酶   在窗口的左邊是程序默認(rèn)的限制酶(圖 ),欲進(jìn)行調(diào)整可以點(diǎn)選 Remove 或 是 Remove All 移除。若要新增限制酶可以點(diǎn)選 Add 增加:圖 選取數(shù)據(jù)庫中所要的限制酶   選取欲分析的限制酶后按 OK(圖 ), Restriction Sites 窗口下再按一次 OK 在圖 選取的限制酶,分析產(chǎn)生的結(jié)果 就可以進(jìn)行分析了:   使用者可以看到圖譜和序列窗口都會顯示用戶加入的限制酶, 并且都注明了 剪切的位置;在文字窗口(圖 ) 打開文件夾,可整理每種限制酶的切位位置: (圖 ):點(diǎn)選此項(xiàng)目可以分析剪切出來的片段大小:圖 選擇欲分析的片段進(jìn)行分析   選擇想要分析的限制酶按 OK:   在文字窗口(圖 )就可以看到分析的結(jié)果。 RFLP:這個項(xiàng)目可以比較分析同一限制酶對不同序列切出來的片段數(shù)目(圖 ):圖 利用 RELP 比較分析同一限制酶對不同序列切出來的片段數(shù)目   左邊的項(xiàng)目為其他的序列(可復(fù)選) ,這些序列數(shù)據(jù)是已經(jīng)內(nèi)建或是儲存在 Local Database 中, 用戶可以在 Subset 項(xiàng)目中轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)。 右邊的字段可以選擇限制 酶(可復(fù)選) 。選擇好之后按下 Calculate 程序就會顯示分析后的結(jié)果(圖 ):圖 利用 RELP 顯示出所選取的分析結(jié)果     窗口中 Create Gel 的項(xiàng)目往后會再進(jìn)一步介紹。 Find Common NonCutting Enzymes(圖 ):這個項(xiàng)目可以幫用戶分析哪些限制酶 不會對序列進(jìn)行切割:圖 使用 Find Common NonCutting Enzymes   左邊的窗口可以選擇序列(可復(fù)選) ,右邊可以選擇限制酶(可復(fù)選) 。點(diǎn)選 完畢之后再按下 Start:   分析的結(jié)果會以一個窗口顯示(圖 ),用戶可以按 Print 打印結(jié)果,或是按 Save 儲存。 (也可用 Camera 指令復(fù)制到別的檔案)   Restriction Report(圖 ):這個選項(xiàng)可以把所有限制酶對序列剪切的結(jié)果進(jìn) 行統(tǒng)計(jì),這份表格同樣可以進(jìn)行打印、儲存和復(fù)制:圖 將所有限制酶對序列剪切的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)   假設(shè)海大頂尖中心研發(fā)出一個限制酶 TsjI,其辨認(rèn)剪切的序列是目前市上所 沒有的,若要放入 Vector NTI 軟件進(jìn)行分析,用戶需先進(jìn)入到 Local Database 里 面點(diǎn)選左上角的 Enzymes 選項(xiàng)(圖 ):圖 選取 Enzymes 選項(xiàng),將新的限制酶加入數(shù)據(jù)庫   接下和建立序列資料的作法一樣,使用者可以制作一個新的限制酶的檔案 (圖 ):圖 制作新的限制酶檔案 (圖 ):圖 設(shè)定限制酶的辨認(rèn)序列和切點(diǎn) 按下確定就可建立好限制酶的數(shù)據(jù)(圖 ),用戶可以針對此限制酶進(jìn)行分析:圖 建好的限制酶資料結(jié)果 NOTE:限制酶的辨認(rèn)序列除了 A、T、C、G 之外還有其他字母,這些字母分別 代表: R = A or G Y = T or C  W = A or T S = G or C M = A or C K = G or T  H = A or T or C  B = C or T or G V = A or C or G  D = A or G or T  N = A or C or G or T  電泳膠片分析  Vector NTI 可以將使用者的基因序列放在一個模擬的膠片中,并且模擬電泳 選項(xiàng)后會出現(xiàn)下列窗口(圖 ):圖 模擬電泳圖分析設(shè)定 圖分析的結(jié)果。點(diǎn)選   此窗口中用戶可以設(shè)定電泳的條件,例如電泳片的大小、種類、電壓、緩沖 液等;在左下角的 View Parameters 選項(xiàng)可以設(shè)定電泳運(yùn)作的時間。設(shè)定好之后按 OK 就可以進(jìn)入以下畫面: ,會得到左邊窗口的樣子   選 右邊的窗口是用戶的電泳膠片,左邊的窗口會有詳細(xì)的文字?jǐn)⑹?。使用者點(diǎn) 選項(xiàng)就可以選擇 Marker(圖 ):圖 選擇所要制作的膠片 (圖 ):圖 加入膠片之后的結(jié)果,呈現(xiàn)在右邊窗口   接著加入使用者的樣品,只要點(diǎn)選   選項(xiàng)即可: 圖 加入使用者樣品 此設(shè)定窗口(圖 )和上一章所提到的 RFLP 設(shè)定完全相同,用戶只要選取數(shù) 據(jù)庫中的基因序列及限制酶后,再按下 Add to Gel 就可以加入膠片中了:   此窗口(圖 )樣品和限制酶一樣可以復(fù)選, 使用者可以針對不同的需求進(jìn)行 調(diào)整,要放入膠中的分析物只要按下 Add to Gel,選取完所有的樣品后關(guān)閉此窗 口就可以進(jìn)行電泳分析,把光標(biāo)移至電泳片上方:圖 加入樣品后的結(jié)果,電泳分析的結(jié)果   使用者可以見到上方有一個時間軸的按鈕 ,只要點(diǎn)最 ,時間旁邊的兩個按鈕可以手動控制電泳分析的時 間:圖 控制電泳分析時間,分析不同的時間點(diǎn)   若要停止電泳分析只要在膠片上面在點(diǎn)一下鼠標(biāo)左鍵就可以了。 電泳分析的 結(jié)果的儲存方式和主程序的儲存方式相同。使用者打開左邊的文件夾后,會見到 電泳分析的結(jié)果;右手邊膠片數(shù)字編號的部分,按下鼠標(biāo)右鍵后也可以見到電泳 分析的結(jié)果(圖 ):圖 打開左窗口的檔案,于右窗口得到電泳分析結(jié)果   使用者還可以計(jì)算被限制酶剪切的片段在膠片上分離的時間, 只要用鼠標(biāo)選 就可以了(圖 ): 取欲分析之片段,再按下 圖 剪切限制酶的片段,進(jìn)行片段的電泳分析   電泳圖的顏色和線條可以進(jìn)行編輯,用戶只要在左邊窗口(圖 、)中 選項(xiàng)進(jìn)行編輯: 的文件夾按下鼠標(biāo)右鍵或是點(diǎn)選 圖 在文件夾按鼠標(biāo)右鍵,以編輯電泳圖的顏色或線條 圖 設(shè)定電泳圖的線條 ,使用者可以在 Local Database 里 面設(shè)定使用者自己的 Marker(圖 ):圖 選取自己數(shù)據(jù)庫的 Marker   用戶在 Local Database 的窗口(圖 )中點(diǎn)選 Gel Markers 選項(xiàng),就可以自行 加入新的 Marker 檔案,用戶將 Marker 的數(shù)據(jù)設(shè)定好之后按下確定即可。圖 加入新的 Marker 檔案   如此一來就可以在電泳分析的功能中加入用戶自己的 Marker。除此之外, 選項(xiàng)之 使用者還可以利用內(nèi)建的序列和限制酶建立屬于自己的 Marker。 點(diǎn)選 :圖 使用內(nèi)建的序列和限制酶,建立屬于自己的 Marker   選擇序列數(shù)據(jù)和限制酶之后點(diǎn)選 Save as Gel Marker 即可儲存在 Local Database 中。   Add to Gel Sample List:這一項(xiàng)功能可以將用戶欲分析的電泳片段存取在一 個程序內(nèi)建的數(shù)據(jù)窗口,用戶可以利用此窗口進(jìn)行快速存取,接口十分友善。 用戶可以利用鼠標(biāo)選取欲分析之序列后,點(diǎn)選 按下 ,結(jié)果如圖 :圖 使用 Add to Gel Sample List,來進(jìn)行快速存取 選項(xiàng),接著在電泳的操作窗口   選取使用者欲加入電泳片的 sample, 再點(diǎn)選 選項(xiàng)就可以加入膠片中 (畫 面(圖 )上膠片為選取第 7 個樣品) :圖 選擇觀看電泳片中的某些樣品   用戶可以善用 Add to Gel Sample List 指令收集欲分析的 sample 后,再將數(shù) 就可以刪除;如果 據(jù)匯入電泳片進(jìn)行分析,如果不要此筆數(shù)據(jù),按下 想要把此數(shù)據(jù)當(dāng)作 Marker 的話只要按下 就會把該筆數(shù)據(jù)設(shè)定成為 Marker(圖 )。 (和自己建立 Marker 的作法相同) :圖 將選取的數(shù)據(jù)當(dāng)作 Marker :上一章提到 RFLP 時,有個 Create Gel 的指令(圖 ),點(diǎn)選后就會 變成膠片電泳分析的操作畫面:圖 使用 Create Gel,進(jìn)行膠片電泳分析   藉由此操作模式,可以直接觀看電泳分析的結(jié)果,對于要經(jīng)常
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