【正文】 鍵合交聯(lián)的聚苯乙烯樹脂，并將該產(chǎn)物初步用于對映體的分離。王延等[16]以脫氫樅胺為原料，合成了三種N脫氫樅基N,N二羥乙基季銨鹽類陽離子表面活性劑，表征了產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)，測定了產(chǎn)品的表面物理化學(xué)性質(zhì)，并對產(chǎn)品的抗菌緩蝕性能進(jìn)行了應(yīng)用研究。王延等[17]采用酸堿二步催化乙氧基化反應(yīng)，以脫氫樅胺位原料，合成了一系列具有不同EO加和數(shù)的脫氫樅胺聚氧乙烯醚，并對產(chǎn)物的表面物化性質(zhì)、緩蝕性能及產(chǎn)品結(jié)構(gòu)與性能的關(guān)系進(jìn)行了研究。結(jié)果表明該產(chǎn)品可以作為陽離子表面活性劑及金屬緩蝕劑使用。王延等[18]以脫氫樅胺為原料，合成了6種脫氫樅基季銨鹽，對合成化合物通過UV、IR、NMR及元素分析手段進(jìn)行確認(rèn)?？咕鷮?shí)驗(yàn)測試發(fā)現(xiàn)，該產(chǎn)品對大腸桿菌及金黃色葡萄球菌具有一定抗菌活性。 C=N衍生物1864年，Schiff[19]首次合成了具有碳氮雙鍵結(jié)構(gòu)的化合物，稱作Schiff堿或亞胺。其氮原子上的孤對電子賦予其重要的化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)。Schiff堿能夠參與氨基酸代謝，如L谷氨酸的氧化脫氨途徑，嘌呤核苷酸循環(huán)等，碳氮雙鍵是其生物活性的效應(yīng)基團(tuán)。Schiff堿的合成可以自由選擇反應(yīng)物，改變?nèi)〈姆N類和位置，便于開發(fā)大量結(jié)構(gòu)新穎的產(chǎn)品。脫氫樅胺水楊醛Schiff堿及其銅配合物的分子既有一定的剛性，又有一定的柔性，且在不對稱合成中表現(xiàn)出高的立體選擇性。配合物對漆酚的氧化聚合及松香的氧化反應(yīng)均具有一定的催化性能，并且對銅有緩蝕作用。姚緒杰等[20]以脫氫樅胺為原料，合成了5種脫氫樅胺水楊醛類Schieff堿，用IR、1HNMR確證其結(jié)構(gòu)，并用靜態(tài)失重法研究了它們在酸性介質(zhì)中對銅的緩蝕性能，發(fā)現(xiàn)脫氫樅胺5,6二羥基水楊醛Schiff堿對銅的緩蝕性能最強(qiáng)。饒小平[21]在乙醇溶劑中合成了脫氫樅胺水楊醛Schiff堿，以及脫氫樅胺（5硝基）水楊醛Schiff堿，通過IR進(jìn)行表征，UVVis研究了它們在有機(jī)溶劑中的光至變色和溶致變色性能。研究發(fā)現(xiàn)這兩種Schiff堿都能在氯仿溶液中發(fā)生光至變色，后者能在DMF中發(fā)生溶致變色，并討論了變色的機(jī)理。姜大煒[22]以無水乙醇為溶劑，在回流條件下，將系列取代水楊醛的乙醇溶液加入脫氫樅胺的乙醇溶液中，合成了9種Schiff堿，并對產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。他還用得到的Schiff堿進(jìn)一步合成了8個銅系配合物和6個鎳系配合物，并對產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。 芳環(huán)的改性1938年，F(xiàn)ieser和Campbell[23]系統(tǒng)地研究了脫氫樅酸的取代反應(yīng)。它們利用脫氫樅酸的苯環(huán)能夠被磺化的性質(zhì)，用濃硫酸在低溫下處理歧化松香，用水浸提得到脫氫樅酸磺酸的晶體，將其水解去磺化得到純凈的脫氫樅酸。此法一直被用來分離提純脫氫樅酸，直到1966年被Halbrook和Lawrence[24]報(bào)道的乙醇胺鹽法替代。此外，他們還制得了12,14二硝基脫氫樅酸、12乙酰脫氫樅酸，并通過衍生物的制備確定了結(jié)構(gòu)。同年，Littmann[25]制得了12,14二氨基脫氫樅酸及其鹽酸鹽。Wada等[26]在研究脫氫松香衍生物抗?jié)儠r發(fā)現(xiàn)，脫氫樅酸的磺化只發(fā)生在12位。得到的12位磺酸不但具有顯著的抗癌活性，而且沒有類似醛甾酮的副作用。Esteves等[27]在12,14二氨基脫氫樅酸的氮原子上連接甲氧基苯基，制得一系列化合物。通過測定各化合物的氧化勢能和清除自由基的能力大小，確定了清除自由基效果最佳的3種化合物為12N對甲氧基苯氨基14氨基脫氫樅酸甲酯，12N對甲氧基苯氨基脫氫樅酸甲酯，和12,14N,N二（對甲氧基苯氨基）脫氫樅酸甲酯。這三種具有最低的氧化勢能，且都含有對甲氧基苯基。Jipa等[28]把12N苯氨基14氨基脫氫樅酸甲酯用于低密度聚乙烯的抗老化試驗(yàn)?？疾炝巳N溫度下化學(xué)熒光強(qiáng)度隨熱降解時間的變化，計(jì)算了聚合物的動力學(xué)穩(wěn)定參數(shù)、氧化率、活化能等，并且與常用的抗老化劑A4010（苯胺類化合物）和Irganox101070（酚類化合物）比較。結(jié)果表明，化合物12N苯氨基14氨基脫氫樅酸甲酯的抗老化作用機(jī)理與Irganox1010相同，但抗老化性能優(yōu)于Irganox1070和A4010。Gigante小組[29]分別利用它們自己得到的12溴13硝基脫異丙基脫氫樅酸甲酯和12溴13,14二硝基脫異丙基脫氫樅酸甲酯相繼合成了脫氫松香的喹惡啉、苯并咪唑、吲哚衍生物，并測試了它們的抗病毒活性。結(jié)果表明，這三種化合物都有抗病毒活性，且有望通過繼續(xù)修飾進(jìn)一步提高。 B環(huán)的改性脫氫樅胺的B環(huán)是個飽和環(huán)，缺乏官能團(tuán)，不能進(jìn)行親電取代反應(yīng)。因此對B環(huán)進(jìn)行改造的報(bào)導(dǎo)很少。1955年，Barnes和Beachem[30]對一種和脫氫樅胺極其類似的環(huán)系進(jìn)行了改造。他們從B環(huán)中處于A環(huán)芐基位的亞甲基入手，通過氧化反應(yīng)在B環(huán)引入羰基，并在此基礎(chǔ)上合成了肟和2,4二硝基苯腙，并將肟進(jìn)行Beckmann重排反應(yīng)，得到七員環(huán)內(nèi)酰胺，氫化鋁鋰還原得到氮雜卓。他們通過結(jié)晶分離了肟的兩種順反異構(gòu)體，并分別進(jìn)行Beckmann重排，發(fā)現(xiàn)反式肟重排的收率大于順式肟。 Barnes和Beachem對B環(huán)的修飾脫氫樅胺的氨基容易氧化，事先必須進(jìn)行?；Ｗo(hù)。用乙?；Ｗo(hù)，操作方便成本低，但乙?；鶐缀醪荒苊摮齕31]。三氟乙?；囊胍玫絼《緩?qiáng)腐蝕性的三氟乙酸酐，但三氟乙?；梢院苋菀椎赝ㄟ^堿性水解脫除。B環(huán)在引入羰基后，出現(xiàn)了一個有α氫的芳酮結(jié)構(gòu)。這是一個非常有用的合成砌塊。由此可通過Hantzsch吡啶合成反應(yīng)構(gòu)造吡啶環(huán)或Fischer吲哚合成反應(yīng)構(gòu)造吡咯環(huán)；也可先制成α鹵代酮，再通過FeistBenary反應(yīng)構(gòu)造呋喃環(huán)，或Hantzsch吡咯合成反應(yīng)構(gòu)造吡咯環(huán)[32]。谷文和王石發(fā)[33]將該化合物與苯肼縮合得到苯腙，經(jīng)過Fischer吲哚合成反應(yīng)，構(gòu)造了一個吡咯環(huán)，合成了一個松香基吲哚化合物。 脫氫樅胺衍生物的生物活性脫氫樅胺具有三環(huán)二萜的結(jié)構(gòu)，與具有強(qiáng)生物活性的甾類化合物較為接近，其同系物和衍生物具有生物活性。韓宏星[34]報(bào)道了60多個具有生物活性且含樹脂酸結(jié)構(gòu)的衍生物。這些化合物的生物活性主要表現(xiàn)為抗氧化、抗菌、抗病毒和抗腫瘤作用。其中生物活性較好的是二萜酚類化合物。研究發(fā)現(xiàn)，大部分化合物都具有一定的生物活性，值得進(jìn)一步開發(fā)利用。在抗氧化作用方面，現(xiàn)在已經(jīng)成功開發(fā)了食品防腐劑和抗氧化劑。陳泳[35]在其文獻(xiàn)綜述里報(bào)道了52個樹脂酸及其衍生物的抗菌、抗病毒、抗腫瘤等方面的生物活性，并展望了它們未來在生物醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域的應(yīng)用。樹脂酸及其衍生物現(xiàn)在已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，可以作為漁網(wǎng)和輪船的防腐劑和農(nóng)作物、木材、紙張、牙膏、糖果等產(chǎn)品的殺蟲劑[36]。而樹脂酸衍生物作為抗動脈硬化、抗癌藥物在很多國家申請了專利[3738]。 抗腫瘤活性KwangHee Son等[37]從紅杉的球果中分離得到了具有脫氫樅烷骨架的化合物，其中化合物1和2在GI50=，對結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌等具有強(qiáng)烈的抑制作用。Iwamoto等[38]從日本香柏(Thuja standishii)中分離出兩個三環(huán)二萜化合物，化合物3對TPA誘導(dǎo)EBVEA具有很強(qiáng)的抑制作用。化合物4對TPA誘導(dǎo)EBVEA具有中等的抑制作用。Ukiya等[39]研究了脫氫樅酸甲酯對TPA誘導(dǎo)EBVEA活性的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：1000 mol ratio/TPA時，達(dá)到100%抑制；500 mol ratio/TPA時，%抑制。Gigante等[40]以5種癌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對象，研究了4種化合物對癌細(xì)胞生長的抑制作用。這5種癌細(xì)胞分別是：MCF7(breast)，NCIH460(lung)，SF268(CNS)，TK10(renal)以及UACC62(melanoma)。當(dāng)濃度超過20 μmol/L時，化合物5和6對癌細(xì)胞的生長表現(xiàn)中等的抑制作用；化合物7和8表現(xiàn)出最大的抑制作用。 抗病毒活性Paris等[41]從迷迭香(rosemary)中提取出鼠尾草酸9，具有很強(qiáng)的HIV1蛋白酶抑制活性(IC90= mg/L)，并且可以抑制HIV1病毒的復(fù)制(IC90= mg/L)。對于H9淋巴細(xì)胞的毒性，90%毒性濃度(TC90) mg/L。在小于10mg/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，不會抑制細(xì)胞中天冬氨酸酶、組織蛋白酶D和胃蛋白酶的活性。Fonseca等[42]以人胚肺細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對象，研究發(fā)現(xiàn)一些樹脂酸的衍生物1011在濃度低于細(xì)胞毒素濃度(MCC或CC50)510倍的情況下能夠抑制CMV（巨細(xì)胞病毒）和VZV（水痘帶狀皰疹病毒）的復(fù)制。 抗菌活性Tapia等[43]通過對脫氫樅酸的微生物轉(zhuǎn)化，得到一種新化合物12，并研究了脫氫樅酸和該新化合物的抗菌活性。結(jié)果表明，新化合物只對沙雷氏菌和枯草桿菌有抗菌活性，脫氫樅酸對除沙雷氏菌和綠膿桿菌以外所研究的其他細(xì)菌都有抗菌活性。王延等[44]以脫氫樅胺為原料，合成了6種脫氫樅基季銨鹽。它們對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有一定的抗菌活性， mg/L和250500 mg/L。梁夢蘭等[45]由脫氫樅胺制備出2種松香基季銨鹽型陽離子表面活性劑，對金黃色葡萄球菌具有滅殺作用。Justino等[46]對一種脫氫樅酸的衍生物13(MDTO)進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化性和清除DPPH和ABTS自由基的能力。它可以保護(hù)脂質(zhì)體不受抗壞血酸鐵鹽的誘導(dǎo)氧化，還可以清除次氯酸。結(jié)果表明，該化合物可以用作抗氧化劑。 殺蟲Tan等[47]從Salvia cilicica中提取出兩種二萜（14和15），它們都具有抗利什曼原蟲的活性。 本文研究的目的、意義及主要內(nèi)容松香是我國重要的非木質(zhì)林產(chǎn)品之一，但大部分以原料的形式低價(jià)出口，同時又從國外高價(jià)進(jìn)口松香深加工產(chǎn)品。因此開展松香深加工產(chǎn)品的研發(fā)工作，具有重大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和戰(zhàn)略意義。鑒于目前脫氫樅胺B環(huán)改性衍生物的研究和報(bào)道較少，本文的研究目的在于合成新的脫氫樅胺B環(huán)改性衍生物，并進(jìn)行DNA切割活性測試。希望新化合物能夠用于抗癌藥物，或?yàn)樾滤幍难兄铺峁┬碌碾s環(huán)母體。本文的研究內(nèi)容主要包括：(1) 合成3～4個脫氫樅胺B環(huán)改性衍生物。(2) 對合成的新化合物進(jìn)行分離、提純和結(jié)構(gòu)表征。(3) 測試新化合物的DNA切割效果。第二章 脫氫樅胺B環(huán)改性的研究 引言脫氫樅胺是一種具有手性的三環(huán)二萜，結(jié)構(gòu)與具有強(qiáng)生物活性的甾類化合物較為接近，其衍生物多具有生物活性。關(guān)于脫氫樅胺B環(huán)改性的研究報(bào)道較少，因此本文將對B環(huán)進(jìn)行改性，期待能夠發(fā)現(xiàn)具有DNA切割活性的新物質(zhì)，用于抗癌藥物中，或?yàn)樾滤幍难兄铺峁┬碌碾s環(huán)母體。B環(huán)的改性可以從芐位亞甲基入手，通過氧化引入羰基，Beckmann重排擴(kuò)環(huán)獲得氮雜卓新骨架。 實(shí)驗(yàn)部分 試劑儀器試劑名稱生產(chǎn)廠家規(guī)格歧化松香胺桂林松塔林化有限公司含脫氫樅胺70%對甲苯磺酸上海凌峰化學(xué)試劑有限公司分析純無水乙醇南京化學(xué)試劑有限公司分析純氫氧化鈉南京化學(xué)試劑有限公司分析純乙酸酐上海凌峰化學(xué)試劑有限公司分析純乙酸南京化學(xué)試劑有限公司分析純鉻酸上海久億化學(xué)試劑有限公司分析純乙醚上海中試化工總公司分析純無水硫酸鈉南京化學(xué)試劑有限公司分析純鹽酸羥胺南京化學(xué)試劑有限公司分析純無水乙酸鈉南京化學(xué)試劑有限公司分析純多聚磷酸上海凌峰化學(xué)試劑有限公司化學(xué)純氨水南京化學(xué)試劑有限公司分析純氫化鋁鋰天津市化學(xué)試劑研究所含量不少于95%柱層析用硅膠青島海洋化工廠分廠200300目乙酸乙酯南京化學(xué)試劑有限公司分析純石油醚南京化學(xué)試劑有限公司分析純儀器名稱生產(chǎn)廠家規(guī)格電子天平常熟雙杰測試儀器廠JJ2000 M=2000g d=電子天平上海精密科學(xué)儀器有限公司JA3003N M=300g d=1mg強(qiáng)力恒速攪拌機(jī)常州市新析儀器廠QHJ756B磁力攪拌器天津Autoscience儀器有限公司AM3250B 分析方法IR: Nic