【正文】 Medical Chemistry Letters[J]. 2005, 15, 20192021[38]Iwamoto M, Ohtsu H, Tokuda H, et al. Bioorganic amp。陳蛟同學(xué)在我研究生復(fù)試期間，替我處理了班上和實驗室里很多繁雜的事務(wù)，讓我能一門心思準(zhǔn)備復(fù)試，并最終考入復(fù)旦大學(xué)化學(xué)系。接下來通過MS、FTIR、1HNMR、13CNMR對各種化合物的結(jié)構(gòu)進行表征和確認。 DNA切割實驗Supercoiled pBR322質(zhì)粒DNA切割反應(yīng)50 μM TrisHCl /鹽緩沖(% DMF、pH=)為介質(zhì)，對Ha、G、U、Ea四種化合物進行研究，DNA切割實驗條件為20 μL(總量) 反應(yīng)液包含脫氫樅胺衍生物衍生物 (50 μM)、5 μL pBR322 DNA( ug /μL) ,恒溫反應(yīng)3 h。加入350 μL緩沖液N1，立即反轉(zhuǎn)多次至溶液混合均勻，此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀。第三章DNA切割實驗 引言20世紀(jì)50年代以來，對腫瘤醫(yī)學(xué)的研究有3項最為突出的成就：（1）癌基因的發(fā)現(xiàn)及其深入研究；（2）染色體畸變與癌基因表達相互關(guān)系的揭示；（3）抑癌基因的發(fā)現(xiàn)及其表達調(diào)控。1HNMR13CNMRE、Eb和Ec的MS、IR、1HNMR和13CNMR譜圖幾乎完全相同，說明這三種物質(zhì)是同種化合物，在此不再重復(fù)?；衔颒bC22H36N2 Mr=Ethyl(3isopropyl8,11adimethyl 6,7,7a,8,9,10,11,11aoctahydro 5Hdibenzo[b,d]azepin 8ylmethyl)amineMS沒有出現(xiàn)分子離子峰（m/z=），原因有待進一步研究。IR3310cm1是肟OH鍵的伸縮振動[49]，與酰胺NH鍵的伸縮振動重疊。F的提純：梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚:乙酸乙酯=1:1緩慢地調(diào)至石油醚:乙酸乙酯=1:2。 產(chǎn)物的分離提純分別用3種配比的展開劑，將得到的化合物在硅膠板上進行薄層層析(TLC)， 測量每種化合物的比移值，匯總于下表。 合成雜環(huán)化合物的嘗試本文原本希望從α溴代酮Ea出發(fā)，通過FeistBenary反應(yīng)和Hantzsch吡咯合成反應(yīng)在脫氫樅胺B環(huán)構(gòu)造呋喃和吡咯雜環(huán)。TLC分析表明該固體為含有少量F的G。反應(yīng)液的后處理和F基本相同，將反應(yīng)液趁熱倒入冰水，同時不斷攪拌，讓多聚磷酸水解，釋出產(chǎn)物。Beckmann重排是一個很強的放熱反應(yīng)。 Beckmann重排反應(yīng)在制備肟F時，最終將反應(yīng)液直接倒入大量冰水，析出白色沉淀。[48]由于三氧化鉻的氧化性很強，氧化的選擇性不是很好，容易造成過度氧化，收率一般比較低。將反應(yīng)液蒸干，用二氯甲烷萃取，柱層析（石油醚:乙酸乙酯=1:2）得到化合物Eb。分出乙醚層，用氫氧化鈉固體干燥后旋蒸得到淺黃色的膏狀物Ha。該固體可直接用于下一步反應(yīng)。 脫氫樅胺的乙?；脱趸?脫氫樅胺的乙?；脱趸?(50mmol)C溶解在30mL乙酸中，裝入250mL四口瓶。第二章 脫氫樅胺B環(huán)改性的研究 引言脫氫樅胺是一種具有手性的三環(huán)二萜，結(jié)構(gòu)與具有強生物活性的甾類化合物較為接近，其衍生物多具有生物活性。 殺蟲Tan等[47]從Salvia cilicica中提取出兩種二萜（14和15），它們都具有抗利什曼原蟲的活性。 抗菌活性Tapia等[43]通過對脫氫樅酸的微生物轉(zhuǎn)化，得到一種新化合物12，并研究了脫氫樅酸和該新化合物的抗菌活性。實驗結(jié)果表明：1000 mol ratio/TPA時，達到100%抑制；500 mol ratio/TPA時，%抑制。在抗氧化作用方面，現(xiàn)在已經(jīng)成功開發(fā)了食品防腐劑和抗氧化劑。這是一個非常有用的合成砌塊。因此對B環(huán)進行改造的報導(dǎo)很少。通過測定各化合物的氧化勢能和清除自由基的能力大小，確定了清除自由基效果最佳的3種化合物為12N對甲氧基苯氨基14氨基脫氫樅酸甲酯，12N對甲氧基苯氨基脫氫樅酸甲酯，和12,14N,N二（對甲氧基苯氨基）脫氫樅酸甲酯。 芳環(huán)的改性1938年，F(xiàn)ieser和Campbell[23]系統(tǒng)地研究了脫氫樅酸的取代反應(yīng)。Schiff堿的合成可以自由選擇反應(yīng)物，改變?nèi)〈姆N類和位置，便于開發(fā)大量結(jié)構(gòu)新穎的產(chǎn)品。王延等[16]以脫氫樅胺為原料，合成了三種N脫氫樅基N,N二羥乙基季銨鹽類陽離子表面活性劑，表征了產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)，測定了產(chǎn)品的表面物理化學(xué)性質(zhì)，并對產(chǎn)品的抗菌緩蝕性能進行了應(yīng)用研究。Goodson[11]合成了一系列含肽鍵的脫氫樅胺衍生物。 脫氫樅胺的衍生物 氨基成鹽衍生物作為氨基化合物，脫氫樅胺能夠和酸反應(yīng)成鹽。脫氫樅胺及其衍生物廣泛用于手性拆分、金屬離子浮選、表面活性劑、殺菌、制藥等領(lǐng)域。 歧化松香人們發(fā)現(xiàn)松香在熱處理后，其抗氧化性和耐候性都發(fā)生了顯著提高。104 t/a。羧基使得松香具有酸性，可以通過酯化、酰胺化進行改性。松樹在我國從南到北都有分布，因此松香是我國林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)中最重要的產(chǎn)品之一。本文的研究目的是對脫氫樅胺的B環(huán)進行改性，合成新的脫氫樅胺衍生物，并測試其與DNA的相互作用，希望能將脫氫樅胺衍生物的應(yīng)用領(lǐng)域拓展到生物制藥領(lǐng)域，促進松香產(chǎn)品深加工的發(fā)展。關(guān)鍵詞：脫氫樅胺；Beckmann重排；DNA切割A(yù)bstractDehydroabietic amine is one of the rosin derivatives. Its characteristic tricyclic diterpene structure feature the molecule with antibacterial, antivirus and anticancer activities. The purpose of this paper is to modify the B ring of dehydroabietic amine, synthesize new derivatives of dehydroabietic amine and investigate its interaction with DNA. It is hoped that the further processing industry of rosin can be promoted, while these rosin derived pounds applied to bio pharmaceutical fields.Starting from dehydroabietic amine, a carbonyl group is introduced to B ring by chromic acid oxidation, a ketone is obtained. A nitrogen atom is inserted to B ring via Beckmann rearrangement with ring extension, then reduce it to Ethyl (3isopropyl 8,11adimethyl6,7,7a,8,9,10,11,11aoctahydro5Hdibenzo[b,d]azepin8ylmethyl)amine by lithium aluminum hydride. The author also attempt to construct furan and pyrrole heterocycles fused with B ring, but the original ketone and an elimination product is obtained.The interation of those 4 pounds with DNA is analysed by gel electrophoresis. They are all able to cleavage plasmid DNA of E. coli.Keywords: dehydroabietic amine, Beckmann rearrangement, DNA cleavage目 錄第一章 綜述 1 松香 1 松香的來源 1 松香的化學(xué)成分 1 松香的生產(chǎn)狀況 1 歧化松香 2 脫氫樅胺 3 概述 3 脫氫樅胺的生產(chǎn)和制備 3 脫氫樅胺的衍生物 4 氨基成鹽衍生物 4 CN衍生物 4 C=N衍生物 5 芳環(huán)的改性 5 B環(huán)的改性 6 脫氫樅胺衍生物的生物活性 7 抗腫瘤活性 8 抗病毒活性 9 抗菌活性 10 抗氧化 10 殺蟲 11 本文研究的目的、意義及主要內(nèi)容 11第二章 脫氫樅胺B環(huán)改性的研究 12 引言 12 實驗部分 12 試劑儀器 12 分析方法 13 脫氫樅胺的提純 13 脫氫樅胺的乙?；脱趸?13 Beckmann重排 14 氫化鋁鋰還原 15 氧化乙酰脫氫樅胺的α溴化 16 合成呋喃雜環(huán)的嘗試 17 合成吡咯雜環(huán)的嘗試 17 合成2,4二硝基苯腙 17 結(jié)果與討論 18 反應(yīng)條件的選擇 18 產(chǎn)物的分離提純 21 產(chǎn)物結(jié)構(gòu)分析 22 本章小結(jié) 36第三章DNA切割實驗 37 引言 37 實驗部分 37 測試材料 37 測試步驟 37 結(jié)果與討論 38第四章 結(jié)論 39致謝 40參考文獻 41第一章 綜述 松香 松香的來源松香是松樹分泌的粘稠液體經(jīng)過蒸餾得到的一種天然樹脂。樹脂酸中，樅酸型其為主要成分。世界松香消費主要在美國、歐洲、中國、日本和非洲。[2]我國松香產(chǎn)業(yè)發(fā)展還存在一些問題。C，其中的二氫樅酸、四氫樅酸發(fā)生脫氫反應(yīng)，生成脫氫樅酸，最終得到以脫氫樅酸為主要成分的歧化松香(disproportionated rosin)。將歧化松香腈在骨架鎳催化劑存在下加壓氫化，得到歧化松香胺(disproportionated abietic amine)，其主要成分為脫氫樅胺[1]。雖然脫氫樅胺對植物有毒性，但脫氫樅胺五氯酚鹽在用作殺菌劑時不會傷害植物。曾韜等[14]研究了醛酸法合成N,N二甲基脫氫樅胺的方法，并對合成產(chǎn)物進行了表征。 C=N衍生物1864年，Schiff[19]首次合成了具有碳氮雙鍵結(jié)構(gòu)的化合物，稱作Schiff堿或亞胺。研究發(fā)現(xiàn)這兩種Schiff堿都能在氯仿溶液中發(fā)生光至變色，后者能在DMF中發(fā)生溶致變色，并討論了變色的機理。Wada等[26]在研究脫氫松香衍生物抗?jié)儠r發(fā)現(xiàn)，脫氫樅酸的磺化只發(fā)生在12位。Gigante小組[29]分別利用它們自己得到的12溴13硝基脫異丙基脫氫樅酸甲酯和12溴13,14二硝基脫異丙基脫氫樅酸甲酯相繼合成了脫氫松香的喹惡啉、苯并咪唑、吲哚衍生物，并測試了它們的抗病毒活性。用乙?；Ｗo，操作方便成本低，但乙?；鶐缀醪荒苊摮齕31]。這些化合物的生物活性主要表現(xiàn)為抗氧化、抗菌、抗病毒和抗腫瘤作用。Iwamoto等[38]從日本香柏(Thuja standishii)中分離出兩個三環(huán)二萜化合物，化合物3對TPA誘導(dǎo)EBVEA具有很強的抑制作用。對于H9淋巴細胞的毒性，90%毒性濃度(TC90) mg/L。Justino等[46]對一種脫氫樅酸的衍生物13(MDTO)進行了研究，發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化性和清除DPPH和ABTS自由基的能力。本文的研究內(nèi)容主要包括：(1) 合成3～4個脫氫樅胺B環(huán)改性衍生物。將沉淀物脫氫樅胺對甲苯磺酸鹽B抽濾出來，用乙醇洗滌至濾液無色，抽干。室溫下滴加8g氫氧化鈉于50mL水中的溶液，將pH調(diào)至8。 將固體用二氯甲烷萃取，分去水層，蒸干得到淺黃色固體G。室溫攪拌下滴加4g()溴，加完后繼續(xù)攪拌2h，靜置10h。稍冷后加入