龍牙百合在組織培養(yǎng)過程中的酶譜分析-文庫吧
2025-06-09 21:19 本頁面
【正文】 ation of the course of differentiation.Key words： Browh Var virdum baker, polyacrylamide gel electrophoresis, Peroxidase isozyme1 文獻綜述龍牙百合(Lilumbrownii Browh Var virdum baker)為百合科百合屬中能形成鱗莖的栽培品種, 多年生宿根草本植物。鱗莖近球形, 橫莖2—，鱗片披針形, 白色, 無節(jié), 味淡不苦。根系由肉質(zhì)根和纖維狀根組成, 肉質(zhì)根又叫“ 下盤根” , 著生于鱗莖下部；纖維狀根又叫“上盤根” , 著生在鱗莖上部。葉散生, 倒披針形?；ㄈ榘咨邢銡? 一般稱白花百合。龍牙百合喜涼爽, 耐蔭蔽, 喜濕潤, 怕水澇, 10℃以上可以萌發(fā)生苗, 生長適溫為16—24℃, 土層深厚、—。排水良好的砂質(zhì)壤土最適宜生長[1]。龍牙百合以其干品瓣形肥大微彎，色澤潔白至寶黃，形似龍牙而著稱。 龍牙百合是一類藥食同源、有較高經(jīng)濟價值的特產(chǎn)蔬菜和藥用植物。龍牙百合以鱗莖入藥 ,為常用中藥 ,也可供提取淀粉或食用。龍牙百合含多種氨基酸、蛋白質(zhì)、淀粉、磷脂、百合苷 A、B等抗癌性植物堿及維生素 BB2等營養(yǎng)物質(zhì) ,具有潤肺止咳、寧心安神、清熱解毒等作用 ,性微寒、味甘 ,是目前市場走俏的藥用保健食品[2]。具有養(yǎng)陰潤肺止咳，清心安神功用；主治陰虛燥咳，勞嗽咯血、肺瘺、虛熱、煩噪驚悸、失眠、多夢等；有鎮(zhèn)咳、平喘、祛痰、抗疲勞、鎮(zhèn)靜、催眠、提高免疫力，升高外周白細胞等藥理作用。龍牙百合是最名貴的一種百合，它內(nèi)含豐富的生物堿，蛋白質(zhì)，礦質(zhì)元素等，是食品中的珍品，由開其價格昂貴，被奉為貴族食品。近幾年,我國百合產(chǎn)量增加較快,經(jīng)濟效益顯著[3]。在龍牙百合的組織培養(yǎng)過程中，植物過氧化物酶以其廣泛存在和特殊的生物學意義而引起日益深入的研究[4]。龍牙百合組培過程中對過氧化物酶活性變化的研究和其他百合屬植物一樣，一般都是通過測定植物發(fā)育不同時期內(nèi)的過氧化物酶活性變化規(guī)律,來研究植物的組織分化狀況[5]。過氧化物酶與呼吸作用、光合作用及生長素的氧化等都有關系[6]。在植物的代謝過程中它可以除去過多的H2O2，從而維持正常生理過程，避免了H2O2的毒害[7]。因此，研究過氧化物酶活性變化是非常必要。有許多公司、研究中心在過氧化物酶活性方面作了大量工作，并取得了較好的成就［８］。同工酶的研究得到了很大發(fā)展，同工酶在植物體內(nèi)調(diào)節(jié)一定的代謝過程，因此，常被用于細胞分化、器官發(fā)生及個體發(fā)育過程中基因表達的研究，從同工酶的器官組織特異性也反映了基因表達的時空特異性。過氧化物同工酶在各種動物體內(nèi)廣泛存在[9]，而且在某些動物的不同器官組織內(nèi)酶譜存在一定的差異。研究分化進程及其與過氧化物酶同工酶的關系，可以進一步深入探索龍牙百合生長分化的基因表達差異，為龍牙百合生長分化調(diào)控提供理論指導。酶譜的變化已作為鑒定物種、研究分類與進化、遺傳與變異的重要指標[10]。而且由于同工酶是基因的產(chǎn)物，能直接反映基因的異同，易于觀察研究，目前已作為一種分化遺傳分化標志廣泛地應用于發(fā)育生物學、群體依次學、醫(yī)學、分類學等各個領域。利用聚丙烯酰胺凝膠電泳測定同工酶，方法簡便，靈敏度高，重現(xiàn)性強，測定結果便于觀察、記錄和保存[11] [12]。但至今尚未見到有關龍牙百合生長分化狀況與過氧化物同工酶關系的研究。 研究的目的和意義在組織培養(yǎng)過程中，過氧化物酶同工酶不斷發(fā)生變化[13]。通過比較不同階段過氧化物同工酶譜的差異，來研究龍牙百合生長分化與過氧化物酶同工酶的關系。作為基因表達的產(chǎn)物，測定同工酶譜是認識基因存在和表達的一種工具，在植物的生長分化研究中有重要的意義。在植物生長發(fā)育過程中它的活性不斷發(fā)生變化，測定這種酶的同工酶[14]，可以反映某一時期植物體內(nèi)代謝的變化，研究分化進程及其與過氧化物酶同工酶的關系，可以進一步深入探索龍牙百合生長分化的基因表達差異，為龍牙百合生長分化調(diào)控提供理論指導[15] [16]。2 實驗材料、主要儀器與試劑 實驗材料 涂藝聲教授細胞實驗室培養(yǎng)的龍牙百合(Lilumbrownii Browh Var virdum baker)無菌苗。每隔10天對龍牙百合的莖段取一次樣?！嶒炛饕獌x器垂直板電泳槽及附件（玻璃板、硅膠條、梳子、導線等）、穩(wěn)壓穩(wěn)流直流電泳儀、高速冷凍離心機、電子分析天平實
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