動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應用(1)-文庫吧
2025-04-14 04:55 本頁面
【正文】 成單層。 ? 1967年， Van Wezel開發(fā)了微載體系統培養(yǎng)貼壁細胞。 ? 微載體是直徑 60250μm的微珠。多用帶不同基團的葡聚糖交聯成幾種大分子，使其帶有適當電荷或介質，以利于細胞的貼壁及生長。 這種模式，把單層培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點融匯在一起，具有兩種培養(yǎng)方法的優(yōu)點。 1) 表面積／體積比大 2) 由于微裁體懸浮于培養(yǎng)基中，是均勻懸浮 培養(yǎng)，簡化了細胞生長各種環(huán)境因素的監(jiān)測和控制。 3) 培養(yǎng)基利用率高。 4) 采樣重演性好。 5）收獲過程不復雜。 6) 放大較容易。 7) 勞動強度小，占用空間小 與微載體結合的生物反應器系統 ? 收獲細胞 ? 接種 —— 球傳球 包埋培養(yǎng) 懸浮生長和對貼壁依賴生長的細胞都適用，細胞生長的密度高，抗剪切力和抗污染能力強。對懸浮生長的細胞用海藻酸鈣包埋，對貼壁依賴生長細胞用膠原包埋。由于動物細胞培養(yǎng)慢而費有高，且對剪切力敏感， 經包埋后可有效的保護細胞。 微囊化培養(yǎng) 在動物細胞微囊化的制備中，主要是應用海藻酸 — 聚氨基酸的方法，簡單過程是動物細胞與海藻酸溶液混合攪拌，經過微囊發(fā)生器將微球滴入氯化鈣溶液中，形成凝膠，然后再用聚氨基酸處理，使微球表面成膜，最后用檸檬酸處理去除微球內的鈣離子，以便球內的海藻酸成液態(tài)，動物細胞得以懸浮在其中。動物細胞的微囊化中海藻酸和聚氨基酸是關鍵材料。 微囊化方法能使細胞處于相對穩(wěn)定、受剪切力小的環(huán)境中，而養(yǎng)分和氧又可以從微囊外的培養(yǎng)液擴散進入。 中空纖維培養(yǎng)系統 ? 中空纖維是聚砜或丙烯的聚合物制成，一個培養(yǎng)筒內由數千根中空纖維所組成，然后封存在特
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