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動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應(yīng)用(1)(已修改)

2025-05-11 04:55 本頁(yè)面
 

【正文】 Section 4:Scalingup of cell culture 動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)失建立在貼壁培養(yǎng)法和懸浮培養(yǎng)法基礎(chǔ)上,再融合了固定化細(xì)胞、填充床、生物反應(yīng)器技術(shù)以及人工灌流等技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的。 主要包括: 懸浮培養(yǎng) 微載體培養(yǎng) 微囊化培養(yǎng) 中空纖維法 ? 利用大規(guī)模培養(yǎng)哺乳類(lèi)細(xì)胞是一項(xiàng)重要的生產(chǎn)生物制品的技術(shù),包括 疫苗、干擾素、激素、生長(zhǎng)因子和單抗 等,具有很高的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。 懸浮培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)是在微生物發(fā)酵的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。動(dòng)物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁保護(hù),不能耐受劇烈的攪拌和通氣。 對(duì)于小規(guī)程培養(yǎng)多采用轉(zhuǎn)瓶和滾瓶培養(yǎng),大規(guī)模培養(yǎng)多采用發(fā)酵罐式的細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器。 懸浮培養(yǎng),設(shè)備結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,有成熟的理論計(jì)算,可以借鑒微生物發(fā)酵的部分經(jīng)驗(yàn),放大效應(yīng)小。 但是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞密度較低,轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸浮培養(yǎng)有潛在致癌危險(xiǎn),培養(yǎng)病毒易失去病毒標(biāo)記而降低免疫強(qiáng)力。此外, 有許多動(dòng)物細(xì)胞屬于貼壁依賴(lài)性的,不能懸浮培養(yǎng)。 懸浮培養(yǎng)的 關(guān)鍵是要選擇適當(dāng)?shù)臄嚢韬屯庋b置 . 微載體培養(yǎng)系統(tǒng) 貼壁依賴(lài)性動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),最初是采用滾瓶系統(tǒng),其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、投資少,技術(shù)成熟,重現(xiàn)性好,放大只是簡(jiǎn)單地增加該瓶數(shù)。但是,滾瓶系統(tǒng)勞動(dòng)強(qiáng)度大,單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小。為了克服這些不利因素, 1967年, van wezell開(kāi)發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁依賴(lài)性細(xì)胞。 微載體是直徑為60~250μ m的微珠。采用微裁體系統(tǒng)培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞,細(xì)胞貽壁于微載體上,微載體 (和細(xì)胞 )懸浮于培養(yǎng)基中,細(xì)胞在微載體表面逐漸生長(zhǎng)
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