酸奶微生物檢驗(yàn)-文庫(kù)吧
2025-03-23 04:05 本頁(yè)面
【正文】 無(wú)菌器材準(zhǔn)備BPW無(wú)菌器材配置MRS平板第2天配置樣液制平板接種LST配置BGLB配置樣品液制平板劃線接種到Baird－Parker氏培養(yǎng)基和血平板配置樣液制BS和XLD平板第3天培養(yǎng)（36℃）觀察LST產(chǎn)氣情況，有產(chǎn)氣的接種BGLB培養(yǎng)(28℃)革蘭氏染色鏡檢劃線接種到BS和XLD平板第4天菌落計(jì)數(shù)觀察BGLB菌落計(jì)數(shù)觀察XLD平板第5天報(bào)告查MPN表報(bào)告報(bào)告報(bào)告觀察BS平板無(wú)菌器材樣品液培養(yǎng)皿試管移液管1ml*3/10ml*1。錐形瓶500ml*1/250ml*1。燒杯*1稀釋度配置菌落總數(shù)9212325g(ml)樣品+%的生理鹽水大腸菌數(shù)—10123五、 樣品配置及器材準(zhǔn)備霉菌和酵母菌92123金黃色葡萄菌屬沙門(mén)氏菌乳酸菌六、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（1）菌落總數(shù)操作步驟樣品的稀釋液體樣品：稱(chēng)取25g樣品置盛有225mL生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶，搖勻，制成1:10的樣品勻液。用1mL無(wú)菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無(wú)菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。另取1mL無(wú)菌吸管，按上述操作程序，制備1:1000稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1mL無(wú)菌吸管或吸頭。根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)～3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，吸取1mL樣品勻液于無(wú)菌平皿內(nèi)，及時(shí)將涼至46℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿20mL左右，并混合均勻，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1mL空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。及時(shí)將15mL～20mL冷卻至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46℃177。1℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。培養(yǎng)待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，置于36℃177。1℃恒溫箱中培養(yǎng)48h177。2h。菌落計(jì)數(shù)可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（colonyformingunits，CFU）表示。選取菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300CFU的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無(wú)明顯界線的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。7結(jié)果與報(bào)告菌落總數(shù)的計(jì)算方法若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)
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