freepeople性欧美熟妇, 色戒完整版无删减158分钟hd, 无码精品国产vα在线观看DVD, 丰满少妇伦精品无码专区在线观看,艾栗栗与纹身男宾馆3p50分钟,国产AV片在线观看,黑人与美女高潮,18岁女RAPPERDISSSUBS,国产手机在机看影片

正文內(nèi)容

生物堆肥現(xiàn)狀及其發(fā)展前景-文庫(kù)吧

2025-03-20 23:38 本頁(yè)面


【正文】 ria中含有的具有氨氧化樣的16s rRNA和rDNA序列。該研究小組2000年再次證實(shí)了PcRDGGE法的有效性和準(zhǔn)確性。1.2.2.DNA序列測(cè)定與系統(tǒng)發(fā)育分析為了得到更為精確的分析序列,需要將PcR擴(kuò)增產(chǎn)物克隆到載體中以構(gòu)建文庫(kù)。回收PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,將其克隆到載體中,經(jīng)轉(zhuǎn)化挑選并驗(yàn)證插入了目的片斷。經(jīng)驗(yàn)證后的克隆子利用ARDRA(Amplmed Ribosomal DNA restriction Analysis)方法進(jìn)行篩選。 從克隆子中獲取質(zhì)粒DNA片斷,可采用全細(xì)胞PcR擴(kuò)增或質(zhì)粒提取方法”1,但后者得到的質(zhì)量較好。將上述得到的質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序,提交GenBank運(yùn)行BLAsT程序與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知序列進(jìn)行相似性比較。同時(shí),還可利用the Ribosomal DaLabasePmject提供的分析軟件進(jìn)行同源性分析。構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(Phylogenetic tree)常用到軟件如MEGA和ARB。這兩種軟件可在相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)中得到。對(duì)食品廢棄物堆肥過程中高溫期的微生物多樣性的研究結(jié)果顯示,通過建立文庫(kù)、DNA測(cè)序測(cè)定和系統(tǒng)發(fā)育分析,得到的22個(gè)16s rDNA序列已在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)登陸;通過同源性比較得到的9個(gè)高溫菌、9個(gè)放線菌屬在堆肥中均未見報(bào)道。schloss等跟蹤研究了堆肥起始階段微生物群落。所不同的是,擴(kuò)增的片斷為16s一23s rRNA基因間隔區(qū)(AmsA)。1.2.3雜交技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種嶄新的分子生物學(xué)技術(shù)。它是基于DNA分子堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理,用特異性的cDNA探針與待測(cè)樣品的DNA或RNA形成雜交分子的過程。由于它的高度特異性和靈敏性,近年來被廣泛應(yīng)用于微生物多樣性的研究中。根據(jù)研究對(duì)象的rDNA序列或者相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)中的信息設(shè)計(jì)探針,探針的設(shè)計(jì)要求專一性較高。該技術(shù)可以在4個(gè)層次上對(duì)特定的微生物在環(huán)境中的存在、分布和豐度等進(jìn)行研究。第一層次是直接在環(huán)境樣品上進(jìn)行原位雜交,通過原位雜交不僅可以測(cè)定不可培養(yǎng)微生物的形態(tài)特征及豐度,而且可以在原位分析其空間分布和動(dòng)態(tài)。第二層次是與富集分離的菌落進(jìn)行全細(xì)胞雜交。最初是以放射性標(biāo)記的rRNA靶探針用于顯微鏡鑒定單個(gè)的微生物細(xì)胞。隨著技術(shù)的發(fā)展,熒光標(biāo)記的rRNA探針與流式細(xì)胞計(jì)可對(duì)混合的微生物種群進(jìn)行自動(dòng)分析。第三層次是與環(huán)境樣品中的提取出的DNA和rRNA進(jìn)行數(shù)量印跡雜交。第四層次是與rDNA的擴(kuò)增產(chǎn)物或rRNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA進(jìn)行southem雜交。16s rRNA基因探針研究堆肥過程中細(xì)菌群落的動(dòng)態(tài)變化結(jié)果表明,細(xì)菌16s rRNA基因探針開始時(shí)僅達(dá)到37%的靶目標(biāo),但隨后在第84h樣品中達(dá)到最大值83%。用假單胞菌屬和低G+c含量的革蘭氏陽性rRNA基因特異性探針得到相應(yīng)的靶結(jié)合率在16%~87%之間。1.3生物標(biāo)志物方法生物標(biāo)志物(Biomakers)通常是微生物細(xì)胞的生化組成成分,其總量通常與相應(yīng)生物量呈正相關(guān)。由于特定結(jié)構(gòu)的標(biāo)記物標(biāo)志著特定類型的微生物,因此一些生物標(biāo)記物的組成模式可作為指紋估價(jià)微生物群落結(jié)構(gòu)。測(cè)定時(shí),首先使用合適的提取劑提取環(huán)境微生物樣品中的這些化合物并加以純化,然后用合適的溶劑制成合適的樣品用Gc或Lc檢測(cè),最后用統(tǒng)計(jì)方法對(duì)得到的生物標(biāo)記物譜圖進(jìn)行定性定量分析。1.3.1生物醌技術(shù)微生物醌是能量代謝過程的電子傳遞體,不同的微生物含有不同種類和分子結(jié)構(gòu)的醌。因此,環(huán)境樣品中微生物醌的組成,即醌指紋可在一定程度上反映微生物的群體結(jié)構(gòu)。泛醌與甲基萘醌的摩爾比在一定程度上可反映革蘭氏陰性菌與革蘭氏陽性菌之比,呼吸醌與光合型醌的摩爾比則可在一定程度上反映環(huán)境中細(xì)菌與藻類的比例。在一定條件下,微生物醌的含量相對(duì)穩(wěn)定,故可利用微生物醌測(cè)定環(huán)境中的活性微生物的濃度。同時(shí),根據(jù)微生物醌的摩爾組成還可計(jì)算出微生物的多樣性和微生物種分布均勻性兩個(gè)指標(biāo)。用微生物醌指紋研究堆肥過程中微生物群落結(jié)構(gòu)的變化結(jié)果表明,微生物量先升后降,而微生物群落多樣性一直連續(xù)增加。在堆肥起始階段存在真菌和Pmteobateria,在第3—7d Bacilluss spp。是主要的微生物種類,后期出現(xiàn)了多種Adf∞6耐硎n的繁殖,且通過總微生物醌(total qllinine content,TQ)和微生物醌的多樣性(divergence 0f quinmm,DQ)與理化參數(shù),如c/N比、p
點(diǎn)擊復(fù)制文檔內(nèi)容
化學(xué)相關(guān)推薦
文庫(kù)吧 www.dybbs8.com
備案圖鄂ICP備17016276號(hào)-1