【正文】
高。Beffa腦等曾經(jīng)在堆肥過程中的高溫期篩選出嗜熱菌屬,這些細(xì)菌能夠在65℃以上,甚至高達(dá)82℃的垛溫下生長。在惡劣條件下,放線菌則以孢子的形式存活。各種基于生物標(biāo)志物(biomarker)的測(cè)定方法(微生物醌法,脂肪酸法)和分子生物學(xué)方法在微生物多樣性和群落結(jié)構(gòu)研究中相繼得到了廣泛應(yīng)用。 參考文獻(xiàn)(22條)【1】.Godden B。PF Lyon。Z S Naoumenko。U B Gbel。W C Ghiorse Microbial diversity in hot synthetic post as revealed by PCRamplified rRNA sequences from cultivated isolates and extracted DNA[外文期刊] 2001【14】.Haug R T The practical handbook of post engineering 1993【15】.羅宇煊。T Yasuta S Yoshida Arata Katayama Changes in the microbial munity structure during thermophilic posting of manure as detected by the quinone profile method[外文期刊] 2004【20】.Schloss P D。J P Stenphen。A G Hay。Baath E Microbial munity dynamics during posting of straw material studied usingphospholipids fatty acid analysis 1998【18】.Herrmann R F。Elwell D L Jr Burtt E H Jr Michel F C Bacterial munity profiles on feathers during posting as determined by terminal restriction fragment length polymorphism analysis of 16SrDNA genes[外文期刊] 2005(3)【12】.LaMontagne M G。L P Walker A quantitative analysis of DNA extraction and purification from post[外文期刊] 2003(1)【9】.Zhu N。劉德明 滾動(dòng)式高溫堆肥中微生物種類數(shù)量的研究[期刊論文]中國環(huán)境科學(xué) 1999(06)【6】.Hassen A。Vikman M。雜交技術(shù)具有簡便的特點(diǎn),但需要具有很強(qiáng)的研究基礎(chǔ)和特異性的序列,以便從中篩選出有效的序列。但是,研究人員不應(yīng)拘泥于該方法。當(dāng)溫度下降到60℃以下時(shí),嗜溫性真菌和嗜熱性真菌又都會(huì)重新出現(xiàn)在堆肥中。有些細(xì)菌,例如芽孢桿菌,能形成很厚的孢子壁以抵抗高溫、輻射和化學(xué)腐蝕等不良環(huán)境。當(dāng)適宜條件時(shí),微生物迅速生長繁殖,中溫微生物數(shù)量快速增長,堆肥溫度隨之上升;當(dāng)達(dá)到不適于中溫微生物生長繁殖的溫度時(shí),盡管中溫微生物數(shù)景還會(huì)進(jìn)一步增長,但其生長繁殖速度減慢或結(jié)束。結(jié)果表明,微生物量(用磷酸脂肪酸總量表示)在1 d后達(dá)到峰值,約為堆肥起始時(shí)的6倍。用微生物醌指紋研究堆肥過程中微生物群落結(jié)構(gòu)的變化結(jié)果表明,微生物量先升后降,而微生物群落多樣性一直連續(xù)增加。1.3生物標(biāo)志物方法生物標(biāo)志物(Biomakers)通常是微生物細(xì)胞的生化組成成分,其總量通常與相應(yīng)生物量呈正相關(guān)。第一層次是直接在環(huán)境樣品上進(jìn)行原位雜交,通過原位雜交不僅可以測(cè)定不可培養(yǎng)微生物的形態(tài)特征及豐度,而且可以在原位分析其空間分布和動(dòng)態(tài)。對(duì)食品廢棄物堆肥過程中高溫期的微生物多樣性的研究結(jié)果顯示,通過建立文庫、DNA測(cè)序測(cè)定和系統(tǒng)發(fā)育分析,得到的22個(gè)16s rDNA序列已在GenBank數(shù)據(jù)庫登陸;通過同源性比較得到的9個(gè)高溫菌、9個(gè)放線菌屬在堆肥中均未見報(bào)道。1.2.2.DNA序列測(cè)定與系統(tǒng)發(fā)育分析為了得到更為精確的分析序列,需要將PcR擴(kuò)增產(chǎn)物克隆到載體中以構(gòu)建文庫??梢詳U(kuò)增環(huán)境中少量的DNA這一能力使檢出非常靈敏。自從Muyzer等首次報(bào)道了16SrDNA應(yīng)