【正文】 ? ? 16 答：二氧化碳與水的反應(yīng)說明了為什么當(dāng) CO2的濃度增加時，同時會引起 pH值下降，迅速進(jìn)行新陳代謝的組織所產(chǎn)生的CO2/SUB與水反應(yīng)生成了碳酸根離子和 H＋。 (a)該反應(yīng)生成的 H＋降低了血液的 pH值，從而穩(wěn)定了血紅蛋白的脫氧形式 (T構(gòu)象 )，凈結(jié)果是 P50的增加，即血紅蛋白對氧的親和力降低，于是更多的氧氣被釋放到組織中。 CO2也可以通過與四條鏈的 N端形成氨甲酸加合物降低血紅蛋白對氧氣的親和力、該加合物使脫氧構(gòu)象 (T)保持穩(wěn)定，因而進(jìn)一步增加了P50，并且促進(jìn)了氧氣向組織中的釋放。 (b)休克病人組織中嚴(yán)重缺乏氧氣供應(yīng)，碳酸鹽靜脈給藥為組織提供了一種 CO2的來源，通過降低血紅蛋白對氧氣的親和力，CO2促使氧合血紅蛋白向組織中釋放氧氣 ? 17 答： 4個亞基。 ? 18：（ a）當(dāng)氧分壓為 4kPa時， HbA只有 33％的氧飽和度，而 HbF為 58％，表明 HbF比 HbA對氧的親和性更高。 （ b） HbF對氧的高親和性可確保氧可以由母體血液流向胎盤中的胎兒血液。 （ c）當(dāng)結(jié)合 BPG時，與 HbF相比， HbA氧飽和曲線發(fā)生了更大的漂移，表明 HbA結(jié)合 BPG比 HbF結(jié)合 BPG更緊密，而結(jié)合 BPG就減少了對氧親和性。 19答：對肌紅蛋白氧親和性的影響： （ a）沒有影響 （ b）沒有影響 （ c）沒有影響對血紅蛋白氧親和性的影響：（ a）降低 （ b）增加 （ c）降低 比較蛋白質(zhì) α 螺旋中的氫鍵和 DNA雙螺旋中的氫鍵，并指出氫鍵在穩(wěn)定這兩種結(jié)構(gòu)中的作用 。 （答案） 第二章 核 酸 ? 一段雙鏈 DNA包含 1000個堿基，其組成中 G+C占 58%，那么在 DNA的該區(qū)域中胸腺嘧啶殘基有多少？ （答案） ?第二章 核酸 ? 雙螺旋 DNA一條鏈的堿基序列為（ 5ˊ ）GCGCAATATTTCTCAAAATATTGCGC3ˊ ，寫出它的互補(bǔ)鏈。該 DNA片段中含有什么特殊類型的序列？該雙鏈 DNA有能力形成另外一種結(jié)構(gòu)嗎？ （答案） ? 用適當(dāng)?shù)膲A基取代下面序列中的 X，給出一個完整的反向重復(fù)結(jié)構(gòu)。 （答案） 5ˊG － A－ T－ C－ A－ T－ X－ X－ X－ X－ X－ X 3ˊ 3ˊX － X－ X－ X－ X－ X－ X－ X－ X－ X－ X－ X 5ˊ ? 兩個 DNA分子，其長度相等，堿基組成不同，一個含有 20%（ A+T），另一個含有 60% （ A+T），哪個分子的 Tm較高？ （答案） ? 有二個 DNA樣品，分別來自兩種未確認(rèn)的細(xì)菌，兩種DNA樣品中的腺嘌呤堿基含量分別占它們 DNA總堿基的 32％和 17％。這兩個 DNA樣品的腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶和胸腺嘧啶的相對比例是多少？其中哪一種 DNA是取自溫泉（ 64℃ ）環(huán)境下的細(xì)菌，哪一種 DNA是取自嗜熱菌？答案的依據(jù)是什么？ （答案） ? 溶液 A中含有濃度為 1M的 20個堿基對的 DNA分子，溶液 B中含有 400個堿基對的 DNA分子，所以每種溶液含有的總的核苷酸殘基數(shù)相等。假設(shè) DNA分子都有相同的堿基組成。 （答案） （ a）當(dāng)兩種溶液的溫度都緩慢上升時，哪個溶液首先得到完全變性的 DNA？ （ b）哪個溶液復(fù)性的速度更快些？ ? 一 DNA樣品，為線性的雙螺旋。取部分樣品涂布在柵板上，溫度維持在 20℃ 用電子顯微鏡觀察；另取部分樣品進(jìn)行同樣的操作，只是溫度為 60℃ ， 30分鐘后，用電子顯微鏡觀察。發(fā)現(xiàn)線性的雙螺旋中出現(xiàn)了一些 眼 形（也稱之 θ 形）結(jié)構(gòu)，請解釋此現(xiàn)象？這種現(xiàn)象能提供什么有用的信息？ （答案） ? 兩條長度、濃度都相同的單鏈 DNA探針加入到從人細(xì)胞系中提取的 DNA片段混合組分中。一個探針與核糖體 RNA的某個區(qū)域互補(bǔ)，另一個與球蛋白 mRNA的某個區(qū)域互補(bǔ)。加熱混合物使 DNA片段變性，然后再冷卻。為什么核糖體 RNA探針形成雙鏈 （答案 ） ? 如果人體有 1014個細(xì)胞，每個體細(xì)胞的 DNA含有 109對核苷酸，試計(jì)算人體 DNA 的總長度為多少千米？這個長度相當(dāng)于地球與太陽之間距離（ 109千米）的多少倍？ ? （答案） ? 10答： 1011千米； 100倍 返回 ? 1 答 : 在 α 螺旋中，一個殘基上的羧基氧與旋轉(zhuǎn)一圈后的（該殘基后面）第四個殘基上的 α 氨基中的氮形成氫鍵，這些在肽鏈骨架內(nèi)原子間形成的氫鍵大致平行于該螺旋的軸，氨基酸側(cè)鏈伸向骨架外，不參與螺旋內(nèi)的氫鍵形成。在雙鏈 DNA中糖 磷酸骨架不形成氫鍵，相反在相對的兩條鏈中互補(bǔ)的堿基之間形成 2個或 3個氫鍵，氫鍵大致垂直于螺旋軸。 在 α 螺旋中，單獨(dú)的氫鍵是很弱的，但是這些鍵的合力穩(wěn)定了該螺旋結(jié)構(gòu)。尤其是在一個蛋白質(zhì)的疏水內(nèi)部，這里水不與氫競爭成鍵。在 DNA中形成氫鍵的主要作用是使每一條鏈能作為另一條鏈的模板，盡管互補(bǔ)堿基之間的氫鍵幫助穩(wěn)定螺旋結(jié)構(gòu)，但在疏水內(nèi)部堿基對之間的堆積對螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性的供獻(xiàn)更大。 返回 ? 1答 : 如果 58%的殘基是 G+C， 42%的殘基必定為 A+T。因?yàn)槊恳粋€ A與相對鏈上的一個 T相配， A殘基的數(shù)量與T殘基的數(shù)量相等，因而 21%或 420個殘基為 T（ 2022 =420）。 ? ? 2 答：（ 5ˊ ）GCGCAATATTTTGAGAAATATTGCGC3ˊ ，含有回文序列；單鏈內(nèi)可形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)；雙鏈可形成十字結(jié)構(gòu)。 ? 3答： 5ˊG － A－ T－ C－ A－ T－ A－ T－ G－ A－T－ C 3ˊ 3ˊC － T－ A－ G－ T－ A－ T－ A－ C－ T－ A－ G 5ˊ ? ? 4答：含有 20%（ A+T）的 DNA分子具有更高的 Tm。因?yàn)樗?80%（ G+C）。因?yàn)?GC堿基對之間存在 3個氫鍵，所以使富含 G/C的 DNA變性需要更多的能量。 ? ? 5 答：一個 DNA含量為 32％ A、 32％ T、 18％ G和 18％ C，另一個為 17％ A、 17％ T、 33％ G和 33％ C，均為雙鏈 DNA。前一種取自溫泉的細(xì)菌，后一種取自嗜熱菌，因?yàn)槠?G－ C含量高，變性溫度高因而在高溫下更穩(wěn)定。 ? 6答：（ a）溶液 A中的 DNA將首先被完全變性，因?yàn)樵?20個堿基對螺旋中的堆積作用力比在 400個堿基對螺旋中的力小很多，在 DNA雙鏈的末端的 DNA的堿基對只是部分堆積。在片段短的分子中這種 末端效應(yīng) 更大。 （ b）在溶液 A中復(fù)性的速率更大。成核作用（第一個堿基對的形成）是一個限速步驟，單鏈分子的數(shù)目越大，重新形成堿基對的機(jī)率就越大，因而在溶液 A中的DNA（含有 2M單鏈 DNA）將比溶液 B中的 DNA（含有 單鏈 DNA）更快地復(fù)性。 ? 8 答： 眼 形結(jié)構(gòu)是由于雙螺旋 DNA局部片段解旋形成的。這些片段富含 A－ T堿基對， A－ T比 G－ C的熱穩(wěn)定性差。用這種方法可以檢測 DNA雙螺旋鏈中堿基組成上的差別。 ? ? 9答：因?yàn)楹颂求w RNA基因是多拷貝的。在人體內(nèi)的任一個細(xì)胞中，核糖體 RNA基因在數(shù)目上遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于球蛋白基因，因此一個 rRNA探針遇到一個互補(bǔ)的人 DNA序列的幾率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于球蛋白探針。 ? 稱取 25mg蛋白酶粉配制成 25毫升酶溶液，從中取出 ，以酪蛋白為底物，用 Folin酚比色法測定酶活力，得知每小時產(chǎn)生 1500微克酪氨酸。另取 2毫升酶液，用凱氏定氮法測得蛋白氮為 克（蛋白質(zhì)中氮的含量比較固定： 16％）。若以每分鐘產(chǎn)生 l微克酪氨酸的酶量為 1個活力單位計(jì)算。根據(jù)以上數(shù)據(jù)求：（ a） 1毫升酶液中所含蛋白質(zhì)量及活力單位。（ b）比活力。（ c） 1克酶制劑的總蛋白含量及總活力。 （答案 ） 第三章 酶 ? 從肝細(xì)胞中提取的一種蛋白水解酶的粗提液300ml含有 150mg蛋白質(zhì)，總活力為 360單位。經(jīng)過一系列純化步驟以后得到的 4ml酶制品（含有），總活力為 288單位。整個純化過程的收率是多少？純化了多少倍？ （答案） ? 1/v對 1/[S]的雙倒數(shù)作圖得到的直線斜率為 103min，在 1/v軸上的截距為 102nmol1ml min。計(jì)算 Vmax和 Km。 （答案） ? 一個二肽酶對二肽 AlaGly和二肽 LeuGly的Km分別為 104和 102，哪一個二肽是酶的最適底物？該酶的兩個非競爭性抑制劑的 Ki值分別為 102和 104。哪一個是最強(qiáng)的抑制劑？ （答案） ? 根據(jù)米式方程求（ a） Kcat為 30s1， Km為，在底物濃度為多少時，酶促反應(yīng)的速度為 1/4 Vmax？（ b）底物濃度為 1/2Km， 2 Km和 10 Km時，酶促反應(yīng)的速率分別相當(dāng)于多少Vmax？ （答案） ? 延胡索酸酶催化延胡索酸水化生成 L蘋果酸： 該酶由四個相同的亞基組成，分子量為 194,000。下面表格中的數(shù)據(jù)是延胡索酸作為底物，初始水化速率是在 ， 25℃ 下，酶濃度 2 106M時得到的。用雙倒數(shù)作圖求出延胡索酸酶在這些條件下的 Vmax， kcat和 Km。 （答案） ? 紅細(xì)胞中的碳酸酐酶（ Mr30000），具有很高的轉(zhuǎn)換數(shù)。它催化 CO2的可逆水合反應(yīng)。 H2O十 CO2＝＝ H2CO3 此反應(yīng)對 CO2從組織運(yùn)往肺部很重要。如果 10mg的純碳酸酐酶， 37℃ 下一分鐘內(nèi)以最大速度可催化 CO2的水合反應(yīng)。碳酸酐酶的轉(zhuǎn)換數(shù)（ Kcat）是多少？。 答案 ? 許多酶會受到重金屬離子，如 Hg2+、 Cu2+、 Ag+等的不可逆抑制。這類重金屬與酶中的活性巰基作用而使酶失活。 ESH＋ Ag+→E SAg+＋ H＋ Ag+ 與巰基的親和性如此之大，以至于 Ag+可以用于 SH的定量滴定。欲使含有 活，需加入 AgNO3。計(jì)算此酶的最小分子量 。為什么能用此法計(jì)算酶的最小分子量？ （答案） ? 酶溶液加熱時，隨著時間的推移，酶的催化活性逐漸喪失。這是由于加熱導(dǎo)致天然酶的構(gòu)象去折疊。己糖激酶溶液維持在 45℃12 分鐘后，活性喪失百分之五十。但是若己糖激酶與大量的底物葡萄糖共同維持在 45℃12 分鐘，則活性喪失僅為 3％。請解釋，為什么在有底物存在下，己糖激酶的熱變性會受到抑制？ （答案） ? 新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖濃度高?？墒顷碌挠衩踪A存幾天后就不那么甜了，因?yàn)?50％糖已經(jīng)轉(zhuǎn)化為淀粉了。如果將新鮮玉米去掉外皮后浸入沸水幾分鐘，然后于冷水中冷卻，儲存在冰箱中可保持其甜味。這是什么道理？ （答案） ? 10答：采下的玉米在沸水中浸泡數(shù)分鐘，可以使其中將糖轉(zhuǎn)化成淀粉的酶基本失活，而后將玉米存放在冰箱中，可以使殘存的酶處于一種低活性狀態(tài)，從而保持了玉米的甜度。 ? 返回 ? 1答 :（ a） ， 250單位 （ b） 400單位/mg （ c） , 105單位 ? 2 答 : 80％； 1500倍。 。 ? 3答： Vmax＝ 50 nmol ml1 min1； Km＝ 10－ 2 nmolml1 ? 4答： AlaGly是最適底物； Ki值最小的那個是最強(qiáng)的抑制劑。 ? 5答：（ a） 103M ? （ b） 。 。 ? 6答：首先要分別計(jì)算出底物濃度和產(chǎn)物生成初始速度的倒數(shù)（注意在計(jì)算和繪圖過程中選取合適的數(shù)值及單位），然后作圖。 1/Vmax＝ L min 所以Vmax＝ L1min1 － 1/Km＝－ Km＝ 103M kcat可以通過用 Vmax除以 [E]total而得到， [E]total為酶活性中心的濃度。因?yàn)檠雍魉崦赣?4個相同的亞基構(gòu)成，即每一個四聚體的酶分子有四個活性部位，濃度為 2 106M的延胡索酸酶可以表示為 8 106M濃度的活性部位，或 8 － 1。kcat的單位為 S－ 1。 ? ? 7答： 107min1或 105s1 ? 8答： 29,000。 需要假定每一個酶分子只含有一個可滴定的巰基。 ? 9答：酶 底物復(fù)合物比單獨(dú)的酶更穩(wěn)定。 確定下列各種輔酶，并指出它們是由哪種維生素衍生來的。 （答案） （ a）在使一個酮（例如丙酮酸）還原成次級醇（例如乳酸）反應(yīng)中用的輔酶。 （ b）在使初級醇（例如乙醇）氧化為醛（例如乙醛）反應(yīng)中用的輔酶。 （ c）在依賴 ATP