【正文】 甚至有時少量的雜質也會阻礙結晶的析出 ， 因此 ， 結晶前應盡可能地除去雜質 。 脂溶性生物堿的提取 —— 親脂性有機溶劑提取法 1. 原理 是將中藥中的生物堿有機酸鹽轉變成水溶性較大的無機酸或小分子有機酸鹽，將其提取出來。 %～ 1%鹽酸、硫酸、醋酸和草酸等。 。不得使用加熱提取法。 ，操作簡便；提取液體積大，濃縮困難，水溶性雜質多。 脂溶性生物堿的提取 —— 酸水提取法 脂溶性生物堿的提取 —— 醇類溶劑提取法 利用游離堿及其鹽均溶于乙醇的性質，將其提取出來。 ，亦可采用回流法。 ，但提出的親脂性雜質較多。 游離堿大多溶于親脂性有機溶劑的性質，故采用氯仿、 乙醚和苯等將其提取出來。 、回流法和連續(xù)回流法。 （石灰乳、稀氨水等）濕潤藥粉，使其中生物堿鹽轉變成游離堿后，再用氯仿等提取。 ，主要提取親脂性生物堿，提出的雜質較少。但成本高、安全性差，故只用于實驗室。 苦參堿與氧化苦參堿的分離 麻黃堿與偽麻黃堿的分離 利用生物堿及其鹽的溶解度不同分離 利用生物堿堿性的差異分離 總堿氯仿溶液 氯仿層 氯仿層 pH 5～ 6緩沖液萃取 （強堿性生物堿）酸水層 pH 3～ 4緩沖液萃取 pH 1～ 2緩沖液萃取 氯仿層 （中強堿性生物堿）酸水層 （弱堿性生物堿）酸水層 CHCl3 Et2O 分離方法 苦參堿 + + 總堿溶于少量 CHCl3，逐滴加入至 Et2O中，過濾 氧化苦參堿 + － CHCl3 甲苯 H2O 分離方法 麻黃堿 + + 麻黃堿草酸鹽 總堿溶于甲苯，用草酸溶液萃取，濃縮萃取液，麻黃堿草酸鹽析出。 偽麻黃堿 + + 偽麻黃堿草酸鹽 + 某些生物堿特殊功能團（羥基、內酯鍵和內酰胺鍵等）能發(fā)生可逆性化學反應，導致 其溶解性改變，從而與其他成分分離。 （常用）常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑，以氯仿、苯等為底劑的溶劑系統(tǒng)作為洗脫 劑，其中加少量堿性試劑，可改善分離效果。 例如三尖衫酯堿和高三尖衫酯堿的分離。（ P129） （ HPLC） 這是一種現(xiàn)代高效的分離分析方法。常用 C18反相色譜柱，流動相以甲醇 水、 乙腈 水為底劑。 利用色譜法分離 利用生物堿的特殊官能團分離 H O－ Ar≡N O－ Ar≡N OH （苛性堿） H＋ （氯化銨） 酚鹽（溶于水） （溶于氯仿等）酚性堿 o oN oC O O O HN H2C O O（溶于氯仿等） （溶于水） OH / Δ H+ （四）生物堿的檢識 理化檢識 物理檢識主要根據(jù)生物堿的形態(tài)顏色嗅味等。 化學檢識主要利用有關的沉淀反應和顯色反應。 色譜檢識 比較樣品與對照品 Rf值（ TLC PC）或 tR（ HPLC GC）是否一致，從而作出判斷。 （一）硅膠（氧化鋁）吸附薄層色譜＊ 硅膠 TLC最好在堿性條件下進行，可在展開劑中加入少量堿性試劑如二乙胺、氨水等，或制備堿性薄層板。 展開劑多以氯仿等親脂性有機溶劑為主，再根據(jù)色譜結果調整展開劑的極性。 大多采用改良碘化鉍鉀試液噴霧顯色，呈橘紅色斑點。亦可直接觀察斑點或在紫外下觀察熒光斑點。 （二）紙色譜 常用正相紙上分配色譜。注意保持生物堿狀態(tài)的均一性。 ①游離堿： 常以甲酰胺為固定相，氯仿苯等為展開劑。 ②生物堿鹽： 常以水為固定相， BAW（ nBuOHHACH2O）溶劑系統(tǒng) 為展開劑。 顯色方法與薄層色譜基本相同，但不宜使用含硫酸的顯色劑。 （三）高效液相色譜法 分辨率高，結果準確可靠。 任務一 麻黃中生物堿類成分的提取分離技術 學習目標 一 二 三 麻黃中生物堿的提取分離技術 必備知識 五 四 六 相關知識鏈接及拓展 課堂互動 目標測試 一 學習目標 2 掌握 麻黃中生物堿類化合物 的提取、分離及鑒定技術。 熟悉 麻黃中生物堿類化合物 的結構及性質。 了解 麻黃中生物堿類化合物 的存在及生物活性。 知識要求 3 能力要求 1 掌握麻黃中生物堿類化學成分的提取分離原理及操作技術。 熟練進行 麻黃中生物堿類化合物的提取、分離及鑒定操作。 學會 麻黃中生物堿類化合物 的色譜鑒定技術 。 學習目的 麻黃（ herba ephedrae）為麻黃科草麻黃 (Ephedra sinica Stapf.)、中麻黃 (Ephedra intermedia Schrenk et .)或木賊麻黃 (Ephedra equisetina Bge.)的干燥草質莖。具有發(fā)汗解表、宣肺平喘、利水消腫的作用。麻黃中含有多種生物堿 ,因產(chǎn)地和品種的不同有一定的差異 ,一般以麻黃堿和偽麻黃堿為主 ,此外還含少量甲基麻黃堿、甲基偽麻黃堿和去甲基麻黃堿、去甲基偽麻黃堿。 二 麻黃中生物堿類化學成分的提取分離技術 麻 黃 草 段加 8 倍 量 水 ， 浸 煮 2 至 3 次浸 煮 液N a O H 堿 化 調 P H 1 0 1 2甲 苯 萃 取有 機 溶 劑 層 堿 水 層 2 % 草 酸 溶 液 調 P H 6 . 5 7 萃 取草 酸 溶 液減 壓 濃 縮 ,冷 卻 后 過 濾結 晶 母 液加 8 倍 量 水 煮 沸 加 飽 和 C a C l2濾 液( 草 酸 鈣 )加 H C l調 P H 6 . 5 7濃 縮 ， 過 濾母 液（ 甲 基 麻 黃 堿 鹽 酸 鹽 ）加 飽 和 C a C l2溶 液 ,靜 置 ， 過 濾結 晶( 鹽 酸 偽 麻 黃 堿 )甲 苯 溶 液( 循 環(huán) 使 用 )( 草 酸 麻 黃 堿 )加 飽 和 N a2S 溶 液 調 P H 7 7 . 5靜 置 ， 過 濾沉 淀粗 結 晶加 水 溶 解 ， H C l調 P H 5 . 5 6 . 0活 性 炭 脫 色 , 重 結 晶鹽 酸 麻 黃 堿麻黃堿與偽麻黃堿提取分離工藝流程 麻 黃 草 段加 8 倍 量 水 ， 浸 煮 2 至 3 次浸 煮 液N a O H 堿 化 調 P H 1 0 1 2甲 苯 萃 取有 機 溶 劑 層 堿 水 層 2 % 草 酸 溶 液 調 P H 6 . 5 7 萃 取草 酸 溶 液減 壓 濃 縮 ,冷 卻 后 過 濾結 晶 母 液加 8 倍 量 水 煮 沸 加 飽 和 C a C l2濾 液( 草 酸 鈣 ) 加 H C l調 P H 6 . 5 7濃 縮 ， 過 濾母 液（ 甲 基 麻 黃 堿 鹽 酸 鹽 ）加 飽 和 C a C l2溶 液 ,靜 置 ， 過 濾結 晶( 鹽 酸 偽 麻 黃 堿 )甲 苯 溶 液( 循 環(huán) 使 用 )( 草 酸 麻 黃 堿 )加 飽 和 N a2S 溶 液 調 P H 7 7 . 5靜 置 ， 過 濾沉 淀粗 結 晶加 水 溶 解 ， H C l調 P H 5 . 5 6 . 0活 性 炭 脫 色 , 重 結 晶鹽 酸 麻 黃 堿（二） 麻黃生物堿的性質 （一）麻黃中主要有效成分及結構 三 必備知識 （一）麻黃中主要有效成分及結構 麻黃中含有多種生物堿，以麻黃堿和偽麻黃堿為主，其次是甲基麻黃堿和去甲基麻黃堿。它們的結構如下： CH OCHC H 3HN H C H 3 H OC CHC H 3HN H C H 3l 麻 黃 堿 ( 1 R ， 2 S ) d 偽 麻 黃 堿 ( 1 S ， 2 S )1 21 2 CH OCHC H 3HN ( C H 3 ) 2l 去 甲 麻 黃 堿 ( 1 R ， 2 S )1 2CH OCHC H 3HN H 21 2l 甲 基 麻 黃 堿 ( 1 R ， 2 S ) （二）麻黃生物堿的理化性質 麻黃堿和偽麻黃堿的分子量較小，為無色結晶，游離麻黃堿含水物熔點為 40℃ 。兩者都具有揮發(fā)性。 麻黃堿和偽麻黃堿為仲胺生物堿，且氮原子在側鏈上，堿性較強，而且偽麻黃堿的堿性（ ）稍強于麻黃堿（ ）。 由于麻黃堿和偽麻黃堿的分子較小，且屬芳烴仲胺生物堿，其溶解性與一般生物堿不完全相同。游離的麻黃生物堿可溶于水，而偽麻黃堿由于形成較穩(wěn)定的分子內氫鍵，所以在水中的溶解度比麻黃堿小。麻黃堿和偽麻黃堿也能溶解于氯仿、乙醚、苯及醇類溶劑中。麻黃堿草酸鹽比偽麻黃堿草酸鹽在水中溶解度小。 四 知識鏈接與拓展 溶劑提取法 基本原理 操作形式 影響因素 浸漬法 煎煮法 滲漉法 回流法 連續(xù)回流法 般來說 ， 天然藥物化學成分在常溫下多半是固體物質 ， 常具有結晶的通性 ， 因此 ， 可根據(jù)溶解度得不同 ， 用結晶法來達到分離 、 純化 、 精制的目的 。 結晶法是實驗室常用的成分純化方法 。 但并不能利用結晶法直接進行提取液的分離和純化 ， 因為過多的雜質會干擾結晶的形成 ， 甚至有時少量的雜質也會阻礙結晶的析出 ， 因此 ， 結晶前應盡可能地除去雜質 。 基本原理 根據(jù)中藥化學成分與溶劑間“極性相似相溶”的原理，依據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對所提成分溶解度大、對雜質溶解度小的溶劑，依據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來的方法。 影響因素 溶劑、方法、粉碎度、溫度、時間等 1 藥材粉碎度：藥粉越細、表面積越大，提取效率越高。但太細，藥粉對成分 的吸附也越強。因此水提取宜用粗粉；用有機溶劑可細些 ,以 20目為好。 2 提取溫度：一般熱提效率高，但要考慮有些成分溫度高易破壞，應選擇適宜 溫度。 3 提取時間：一般提取時間長提出量大。但被提成分在細胞內外溶解一旦平衡， 時間長即無意義。一般熱水提以 1/2hr為宜，乙醇提 1hr為宜。 4 提取溶劑的選擇 : 遵循 “ 相似者相溶 ” 規(guī)律，選擇對有效成分溶解度大，對無 效成分溶解度小的溶劑做為提取溶劑 。溶劑沸點要適中、低毒安全、環(huán)保。 5 提取方法的選擇 :見后面 操作形式 方 法 常用溶劑 優(yōu) 點 缺 點 浸漬法 水和醇 室溫提取不易破壞成分，設備簡單，適合提取含淀粉或黏液質多的藥材?？膳浜?超聲波 處理提高提取效率。 時間長次多，提取效率低。提取液易發(fā)霉 滲漉法 水和醇 室溫提取不易破壞成分，設備簡單，保持較 高濃度差 提取效率高。 溶劑用量較多 煎煮法 水 設備簡單，提取較全面 加熱提取易破壞成分，揮發(fā)性成分易損失，不適合提取含淀粉或黏液質多的藥材 回流法 有機溶劑 加熱提取效率較高 易破壞熱敏性成分，操作較繁 連續(xù)回流法 有機溶劑 保持較 高濃度差 提取效率高，操作 簡便 ，溶劑 用量少 提取液受熱時間長，成分易破壞 水蒸氣蒸餾法 基本原理 適用范圍 裝置示意圖 是將水蒸氣通入含有揮發(fā)性