【正文】 苷 苷元 3 O 糖苷 7 O 糖苷（平面性分子） 花色素 (平面性分子 ,離子型 ) 非平面性分子 平面性分子 ★ 黃酮苷 (親水性 ) 7， 4′2OH＞ 7或 4′OH＞一般酚羥基 5OH 7， 4′2OH者，由于 ρπ共軛效應(yīng)，使酸性增強而溶于碳酸氫鈉 水溶液。 7或 4′OH者，只溶于碳酸鈉水溶液，不溶于碳酸氫鈉水溶液。 具有一般酚羥基者只溶于氫氧化鈉水溶液。 僅有 5OH者，因可與 C4=O形成分子內(nèi)氫鍵，故酸性最弱。 因此，可用 pH梯度萃取法來分離黃酮類化合物。 酸性 : 黃酮類化合物因分子中具有酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶和甲酰胺等中 。 其酸性強弱與酚羥基數(shù)目的多少和位置有關(guān)。 堿性 : 因母核中 γ吡喃酮環(huán)上的 1位氧原子有未共用電子對，故表現(xiàn)出微弱的堿性?？扇苡跐饬蛩?、濃鹽酸等強無機酸生成 鹽，該鹽極不穩(wěn)定，加水后即分解。 還原反應(yīng) 反應(yīng)類型 鑒別特征 鑒別意義 備注 鹽酸 鎂粉 黃酮、二氫黃酮、紅 ~紫紅 黃酮類特征性 假陽性 反應(yīng) 黃酮醇、二氫黃酮醇 紅 ~紫紅 鑒別反應(yīng) （花色素）（最常用） 查耳酮、橙酮 （ ） 兒茶素類、異黃酮 （ ） 四氫硼鈉 二氫黃酮、二氫黃酮醇 紅 ~紫紅 二氫黃酮類特有 還原反應(yīng) 其它黃酮類 （ ） 鈉汞齊反應(yīng) 黃酮、二氫黃酮 紅 異黃酮、二氫異黃酮 紅 黃酮醇類 黃 ~淡紅色 二氫黃酮醇類 棕黃色 金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng) 反應(yīng)類型 鑒別特征及鑒別意義 備 注 鋯鹽 枸櫞酸 鋯鹽 枸櫞酸 3OH或 5 二 OH 黃色 黃色不褪 PPC 黃色褪去 氨性氯化鍶 (SrCl2) 鄰二酚羥基 綠、棕乃至黑色 三氯化鐵 (FeCl3) 酚羥基 紫、藍(lán)、綠 三氯化鋁 3OH， 4C=O 黃色 （ AlCl3） 5OH， 4C=O 鮮黃色熒光 PPC\TLC 鄰二酚羥基 （ 4‘或 7， 4’黃酮醇，天藍(lán)色熒光） 硼酸顯色反應(yīng) 硼酸 5 羥基， 4 羰基黃酮 黃色，綠色熒光（草酸液） （ H3BO3） 6′ 羥基， 4 羰基查耳酮 黃色，無熒光（枸櫞酸） 三 黃酮的提取與分離 黃酮的提取與分離 提取 分離 pH梯度萃取法 溶劑萃取法 柱色譜法 HPLC色譜法 溶劑提取法 檢識 理化檢識 色譜檢識 （一）提取方法 — 溶劑法 ? 溶劑法 關(guān)鍵 溶劑的選擇 選擇依據(jù) 黃酮類成分的存在狀態(tài)（游離、苷）及溶解性 溶劑的溶解性能 提取方法（煎煮法、滲漉法、回流法等）的選擇 溶劑 提取原理 游離黃酮 黃酮苷 備 注 乙醇 溶解范圍廣 + + （甲醇） 苷、苷元均可溶 （ 90~95%） ( 60%） 甲醇毒性大 沸水 多糖苷易于水 + 成本低、安全 ,水溶性雜質(zhì)多 堿性水或 稀氫氧化鈉溶出能力強 堿性乙醇 酚羥基的酸性 + + 石灰水除雜質(zhì)效果好 HPLC色 譜 （二）分離 分離依據(jù)： 成分 (黃酮與雜質(zhì)、苷與苷元 、苷元與苷元 )之間的極性（分配系數(shù) K）差異。 分離依據(jù)： 游離黃酮類化合物的酸性差異 。 pH梯度萃取法 溶劑萃取法 柱色譜法 常用聚酰胺和硅膠色譜。 （ 1）聚酰胺柱色譜（首選法） 洗脫順序（含水溶劑：乙醇 水等） ①苷元相同：叁糖苷 → 雙糖苷 → 單糖苷 → 苷元（酚羥基比例） ②母核上羥基越多，洗脫越慢（酚羥基數(shù)量） ③酚羥基數(shù)量相同：鄰羥基的 → 對（間）羥基的（酚羥基的位置） ④芳香核、共軛雙鍵越多，洗脫越慢（酚羥基所處母核的共軛程度） ⑤不同苷元： 異黃酮 → 二氫黃酮醇 →黃酮 → 黃酮醇 母核共軛程度較后兩者小 ， 后者比前者多一個羥基。 （ 2）硅膠柱色譜 洗脫順序：羥基越多，極性越大，越后洗出（不分醇羥基、酚羥基） 適用于各種黃酮類化合物的分離。原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大） 固定相： ODS 流動相：水 乙晴不同比例。 任務(wù)一 黃芩中黃酮類化合物的提取分離技術(shù) 學(xué)習(xí)目標(biāo) 一 二 三 任務(wù)導(dǎo)入 必備知識 五 四 六 相關(guān)知識鏈接及拓展 課堂互動 目標(biāo)測試 一 學(xué)習(xí)目