【正文】
端必須帶有 PPP 游離 dNTP具有 ppp ppp OH 3’ A T C G 在 Nacl 的生理環(huán)境中, 使 dNTP難以聚合到 DNA的 5’端 需要其他機制以解脫 The initiation of a new strand of DNA requires an RNA primer (primase) DNA helicases unwind the double helix in advance of the replication fork Singlestranded DNA binding proteins stabilize ssDNA prior to replication Topoisomerases remove supercoils produced by DNA unwinding at the replication fork DNA polymerase extend the DNA chain Table 81 (factors involved in the replication) 1)、 解螺旋酶 ( helicase) :又稱解旋酶 , 通過水解ATP獲得能量 ,解開 DNA雙鏈 . 2). 單鏈結(jié)合蛋白 ( SSB): 結(jié)合在 DNA單鏈上 ,有時有協(xié)同效應(yīng) . 3)、 DNA旋轉(zhuǎn)酶 :消除復(fù)制叉前進(jìn)過程中產(chǎn)生的正超螺旋,產(chǎn)生負(fù)超螺旋 . The initiation of DNA replication ( 1) OriC in E. coli chromosomal DNA ? 四個 9bp的重復(fù)序列 dnaA結(jié)合位點 ? 三個 13bp的重復(fù)序列 若干 GATC位點 酵母菌的復(fù)制起點 稱為 ARS(autonomously replicating sequence),有100多個 bp。 ARS包括一個共有序列 (A)和附加元件 (B1~B3)。 A功能域為 ARS的中心,可能是起始蛋白的結(jié)合位點。 A的序列為(T/A)AAATA(T/C)AAA(T/A); A元件在芽殖酵母中高度保守,是復(fù)制起始所必需的。其中有富含 AT的 11bp序列是復(fù)制起始識別復(fù)合物( origin recognition plex, ORC)結(jié)合復(fù)制起始位點所必需的,對起始因子在復(fù)制起始位點的組裝起基本作用。 Replication fork 真核生物( Eukaryote) : 多復(fù)制起點 即-- 一個 genome中有 多個復(fù)制單位 The initiation of DNA replication DnaA is the initiator primase an RNA enzyme involved in the replication of DNA. P