食品質(zhì)量與安全實驗技術(shù)-6食品安全現(xiàn)代生物檢測技術(shù)武漢工業(yè)學(xué)院-文庫吧
2024-12-24 13:03 本頁面
【正文】 ）；酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；酶的底物；陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；洗滌液；酶反應(yīng)終止液。 ? 1 免疫吸附劑 ? 2 結(jié)合物 ? 3 酶的底物 ? 4 洗滌液 ? 5 酶反應(yīng)終止液 ? 6 陽性對照品和陰性對照品 ? 7 參考標(biāo)準(zhǔn)品 ? 三、磺胺二甲嘧啶的間接競爭 ELISA檢測 ? （一）人工完全抗原的合成 ? （二）合成抗原的鑒定 ? （三）抗體的制備與純化 ? （四）標(biāo)準(zhǔn)競爭抑制曲線的制作 ? （五）畜產(chǎn)品中 SM2殘留的 ELISA檢測 ? （六）方法評價 ?1 特異性 ?2 靈敏度 ?3 準(zhǔn)確度 ?4 精確度 ? 第二節(jié) PCR檢測技術(shù) ? 一、概述 ? PCR又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (Polymerase chain reaction)，是1985年由美國的 Kary Mullis首創(chuàng)并由美國 Cetus公司開發(fā)的一項體外擴增 DNA的方法。應(yīng)用該方法可使極微量的特定 DNA片段在幾小時內(nèi)迅速擴增至百萬倍，因而一經(jīng)問世便在短短的數(shù)年內(nèi)就得到了迅速發(fā)晨和實際應(yīng)用，并在原有基礎(chǔ)上結(jié)合各種生化分子生物學(xué)技術(shù)衍生出了許多改良技術(shù)。這些技術(shù)顯示出了巨大的潛力，發(fā)揮著越來越大的作用，也正因為如此它們被譽為 20世紀(jì) 80年代分子生物學(xué)革命和生物技術(shù)的飛躍。 ? （一） PCR原理 ? PCR是依據(jù) DNA模板的特性，模仿體內(nèi)的復(fù)制過程，在體外合適的條件下以單鏈 DNA為模板，以人工設(shè)計和合成的寡核苷酸為引物，利用熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶延 5’3’方向摻人單核苷酸來特異性的擴增 DNA片段的技術(shù)。 ? （二） PCR反應(yīng)體系 ? PCR反應(yīng)體系主要由引物、 dNTP、 DNA聚合酶 (TaqDNA聚合酶 )、緩沖液、 Mg2+和核酸模板組成。 ? （三） PCR反應(yīng)參數(shù) ? 在 PCR反應(yīng)中每輪循環(huán)的各步反應(yīng)時間不應(yīng)過長，以免降低 TaqDNA聚合酶的活性。下面介紹 PCR反應(yīng)中的一些具體
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