【正文】 應(yīng)放在沒有讓陽光直曬、表面平坦且空間足夠的工作臺上。 儀器使用完畢要及時關(guān)機。 7 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 04 第 1 頁 共 1 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： 雷勃 MK3 酶標儀 維護 編制依據(jù) ： 雷勃 MK3 酶標儀使用說明書 文件編制 人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 8 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 05 第 1 頁 共 3 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： 雷勃 MK2 洗板機 使用 編制依據(jù) ：儀器使用說明書 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 1. 目的：維護洗板機的正常工作，規(guī)范洗板機的使用與保養(yǎng)。 2. 適用范圍： 雷勃 MK2 洗板機 3. 職責(zé)： HIV 檢測人員負責(zé) 本作業(yè)指導(dǎo)書 的執(zhí)行， 院辦公 室 負責(zé)監(jiān)督執(zhí)行 4. 操作步驟 設(shè)置 在 關(guān) 機狀態(tài)下， 按照試劑盒說明書設(shè)置洗滌卡程序，并將設(shè)置好程序的卡插入卡位 。 開機 打開儀器電源開關(guān)，等儀器初始化結(jié)束后儀器顯示就緒，可以進行下一步操作。 沖洗 第一次按“ Prime”鍵等待儀器自檢完成 。 運行 根據(jù)酶標板的數(shù)量設(shè)置洗板的行數(shù) (數(shù)字鍵代表酶標板的行數(shù) ) ，放置好酶標板后，按“ Start”按鈕開始洗板。 關(guān)機 日常關(guān)機 最后一次洗板結(jié)束后將電源開關(guān)置于 OFF 位 。 9 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 05 第 1 頁 共 3 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： 雷勃 MK2 洗板機 使用 編制依據(jù) ：儀器使用說明書 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 長期關(guān)機 將長時間不使用洗板機時，先用蒸餾水沖洗一遍整個系統(tǒng)，再進行日常關(guān)機；保持液 體瓶干燥，以免清洗液中的緩沖鹽類結(jié)晶而堵塞清洗頭。 3. 儀器使用注意事項 操作前 必須嚴格按照儀器安裝說明安裝儀器，保證正確連接管路，以免出現(xiàn)滲漏。洗板機長期不用后再度使用時，需要預(yù)洗整個系統(tǒng)四次。 操作中 按下運行鍵前，需確認 : ① 已經(jīng)裝上正確清洗頭。 ② 酶標板已正確放置 ③ 已選擇適當(dāng)?shù)某绦蚣皡?shù)值。 應(yīng)及時傾倒廢液。 如果儀器表面有生物危險物資污染，用中性消毒液清潔。 保持滑道的清潔干燥，避免堵塞；若有液體濺出，及時擦干。 10 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 05 第 1 頁 共 3 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： 雷勃 MK2 洗板機 使用 編制依據(jù) ：儀器使用說明書 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 在洗板過程中，如需儀器停止運行，請按鍵盤上的復(fù)位鍵，不要用 手或物體強制儀器停止運行。 4. 儀器的保養(yǎng) 安放和運行儀器時避免陽光直射，且避開熱源，以免影響儀器壽命。 經(jīng)常用軟布和中性清洗液擦洗儀器；儀器使用時及時擦去潑在滑道上的液體，以免造成機械堵塞。 11 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 06 第 1 頁 共 1 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時 間 ： 2022－ 07－ 01 標題： 雷勃 MK2 洗板機 維護 編制依據(jù) ：洗板機規(guī)程 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** ① 12 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 08 第 1 頁 共 6 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： HIV 篩查實驗室 質(zhì)量控制 編制依據(jù) ：《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 1. 目的： 建立 艾滋病實驗室 質(zhì)量控制 ,保證 HIV 實驗室檢驗結(jié)果的準確性。 2．適用范圍： HIV 實驗室所有樣品 篩查 和復(fù)查的質(zhì)量控制。 3. HIV 檢測人員負責(zé) 本作業(yè)指導(dǎo)書 的執(zhí)行， 院辦公室 負責(zé)監(jiān)督執(zhí)行 4 質(zhì)量控制（ QC） 質(zhì)控血清的制備和保存（以 ELISA 試驗檢測 HIV 抗體為例） 在每次實驗中必須包含有內(nèi)部對照質(zhì)控血清和外部對照質(zhì)控血清。 內(nèi)部對照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。內(nèi)部對 照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測必須使用內(nèi)部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。 外部對照質(zhì)控血清是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及試劑盒批間或孔間差異而由實驗室設(shè)置的一套對照血清，包括強陽性、弱陽性和陰性對照血清。也可以只設(shè)置一個弱陽性對照，以該試劑盒臨界值（ Cutoff）的 23 倍為宜。 外部對照質(zhì)控血清的制備 HIV 抗體陽性和陰性血清， 56℃ 30min 滅活， 3000r/min，離心 15min。弱陽性對照可以用 HIV 抗體陰性血清梯度稀釋 HIV 抗體強陽性血清并標定后得到。按一年使 用量配制（可加入不影響檢測結(jié)果的防腐劑）用 m 濾膜過濾除菌。 外部對照質(zhì)控血清的保存 按一周實驗用量分裝、分類、標記、封口、 20℃凍存于非自動除霜冰箱中。 外部對照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放 2 8℃，供一周內(nèi)使用。 外部對照質(zhì)控血清的使用 每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控實驗的重復(fù)性和穩(wěn)定性。同時可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。 外部對照質(zhì)控物的質(zhì)量要求 質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測 系統(tǒng)預(yù)期的變異（ cv＜ 20%＝，并且質(zhì)控物的成分應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無菌，并不含有影響 ELISA 反應(yīng)的防腐劑。 13 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 08 第 2 頁 共 6 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： HIV 篩查實驗室 質(zhì)量控制 編制依據(jù) ：《 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用（以 ELISA 試驗檢測 HIV 抗體為例） 最常用的質(zhì)控圖是 LeveyJennings 質(zhì)控圖，使用累計和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形可提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。 建立質(zhì)控圖參數(shù) 外部對照質(zhì)控物的平均值和標準差應(yīng)建立在實驗室常規(guī)使用方法對質(zhì)控物重復(fù)測定的基礎(chǔ)上。一般采用在不同批次檢測取得至少 20 個數(shù)據(jù)；如果僅做少量批次的檢測，也至少做 5 個批次的檢測，每個批次中不少于 4 個質(zhì)控物 測定結(jié)果，以建立一個臨時性的平均值和標準差，當(dāng)達到 20 批次數(shù)據(jù)后，替代臨時性的平均值和標準差。 算術(shù)平均值 （ ） ： 代表一組 S/CO 值的平均值。為了統(tǒng)計學(xué)上有顯著性意義，應(yīng)該采用至少 20 次 (天 )所測得的外部對照質(zhì)控血清 S/CO 值結(jié)果計算出平均值。 標準差 (s)：是描述樣品與均數(shù)之間離散程度的一個指標，是與對照質(zhì)控血清S/CO 值均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組 S/CO 值的標準差以 s 表示。 變異系數(shù) (cv)：是反映各次 S/CO 值相對于均值離散程度的一個指標 ，可以用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。 控制限：由實驗室根據(jù)對質(zhì)控物檢測結(jié)果的平均值和標準差來確定。例如 12S 質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部對照 S/CO 平均值加減 2 個標準差； 13S 質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部對照 S/CO 平均值加減 3 個標準差。 繪制質(zhì)控圖 質(zhì)控圖是把檢測數(shù)據(jù)與已確定的（計算出的）“控制限”進行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并按時間順序點入本實驗室每次試驗質(zhì)控血清的測定值 。 14 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 08 第 3 頁 共 6 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： HIV 篩查實驗室 質(zhì)量控制 編制依據(jù) ：《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 質(zhì)控圖的繪制步驟： 在常規(guī)條件下，對同一批血清連續(xù)測定 20 次（天）或以上，獲得一組 S/CO 值，求均數(shù) ( )和標準差 (s), 超出 2s 或 3s 的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。 將均值 ( )和標準差 (s)分別在質(zhì)控框架圖中標示出來。以 S/CO 值作縱座標(Y 軸 )，每一次 (天 )試驗作橫座標 (x 軸 )，繪制質(zhì)控圖。 從第 21 次起，將每次質(zhì)控血清的檢測結(jié)果依次點入該質(zhì)控框架圖中，檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)。 質(zhì)控規(guī)則及使用 實驗室在報告實驗結(jié)果之前必須評價質(zhì)控數(shù)據(jù)，可通過圖形記錄的檢查或由計算機審核結(jié)果來決定。目前許多質(zhì)控規(guī)則已被采用，常用的是 12S 和 13S 規(guī)則。 告警（ 12S）：當(dāng)外部對照的 S/CO 值超出 x +2s 范圍時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進一步觀察。若將 12S 做失控標準，有較高的假失控概率，所以一般不采用。 失控（ 13S）：當(dāng)外部對照的 S/CO 值超出 x +3s 范圍時，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次實驗結(jié)果不能被接受，可能是系統(tǒng)誤差、隨機誤差或外部對照滴度下降造成。 位移：連續(xù)幾次（ 3～ 5 次）外部對照 S/CO 值都落在均值的一側(cè)則稱為位移，提示實驗條件發(fā)生了較大的變化。 趨勢：連續(xù)幾次（ 5～ 7 次）外部對照 S/CO 值幾乎按一個方向分布時稱為趨勢，通常由參數(shù)的緩慢改變引起。 15 ***醫(yī)院 文件編號： SXX**YY 01－ 08 第 4 頁 共 6 頁 作業(yè)指導(dǎo)書 第 1 版 第 1 次 修訂 頒布時間 ： 2022－ 07－ 01 標題： HIV 篩查實驗室 質(zhì)量控制 編制依據(jù) ：《全國艾滋病檢測技 術(shù)規(guī)范》【 2022 年版】 文件編制人： 張 ** 文件審核發(fā)人： 盧 ** 質(zhì)控規(guī)則的使用應(yīng)檢出隨機誤差和系統(tǒng)誤差，即具有高的檢出分析誤差的能力，同時應(yīng)具有較低的假失控概率?？疾煸囼炏到y(tǒng)的可靠性應(yīng)采用多標準質(zhì)控方案，多規(guī)則質(zhì)控方法能提高誤差檢出，并具有低的假失控概率。 其要點為： 出現(xiàn)一次 2s 范圍的變化時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進一步觀察。 出現(xiàn)下列情況時，應(yīng)暫停檢測查找原因：出現(xiàn)一次 3s 范圍的變化、連續(xù)兩次出現(xiàn)同一方向 2s 范圍的變化、連續(xù)四次出現(xiàn)同一方向的 1s 范圍的變化、 連續(xù) 10 次結(jié)果都在 1s 范圍內(nèi)，但落在均值線的同一側(cè)。 質(zhì)控圖的分析及失控處理 實驗室應(yīng)建立質(zhì)控圖分析及失控情況處理程序。 當(dāng)質(zhì)控已有計劃并恰當(dāng)?shù)貓?zhí)行時，要求可靠的平均值和標準差用于計算質(zhì)控限，將假失控概率降到最低。當(dāng)出現(xiàn)失控時進行如重復(fù)質(zhì)控測定或重新分析新的質(zhì)控物不是最有效的方法，必須找出問題原因，找出解除故障的方法，并消除原因，防止將來出現(xiàn)同樣的問題。 繪制和分析質(zhì)控圖的要點 要在常規(guī)條件下建立質(zhì)控圖參數(shù)，用 S/CO 比值繪制質(zhì)控圖。對同一批質(zhì)控物連續(xù)測定得到 20 個數(shù)據(jù)，求均值 ( )和標準差 (s), 超出