專題二23分解纖維素的微生物的分離-文庫(kù)吧
2024-12-22 15:21 本頁(yè)面
【正文】 反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅 — 纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的 。這樣我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 透明圈 二、纖維素分解菌的篩選 酶 篩選 操作 結(jié)果 延伸 酶 篩選 操作 結(jié)果 延伸 剛果紅染色法 方法一： 先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng) 方法二： 在倒平板時(shí)就加入剛果紅 思考： 這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？ 酶 篩選 操作 結(jié)果 延伸 方法一： 方法二： 步驟 培養(yǎng)基經(jīng)涂布培養(yǎng)長(zhǎng)出菌落 → 覆蓋 1mg/mL的 CR溶液 → (10~15min后 )倒去 CR溶液 → 加入 1mol/L的NaCl溶液 → 15min后倒掉 NaCl溶液 → 出現(xiàn)透明圈 配置 10mg/mL的 CR溶液 → 滅菌 → 按照 1mLCR溶液 /200mL培養(yǎng)基的比例混勻 → 倒平板 → 接種后培養(yǎng) → 出現(xiàn)透明圈 優(yōu)點(diǎn) 顯示出的顏色基本上是纖維素分解菌的作用 操作簡(jiǎn)便，不存在菌落的混雜問(wèn)題 缺點(diǎn) 操作繁瑣，加入剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜 ① 由于產(chǎn)生淀粉酶的微生物也形成透明圈，所以可能產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。 ②有些微生物具有降解色素的能力，他們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中也會(huì)形成明顯的透明圈，與纖維素的分解菌不易區(qū)分。 兩種剛果紅染色法的比較： 酶 篩選 操作 結(jié)果 延伸 方法一中 NaCl溶液的作用？ 思考： 漂洗作用，洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅，以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方法可以判斷酶活力的大小，實(shí)際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！ 酶 篩選 操作 結(jié)果 延伸 練一練： 下列關(guān)于纖維素
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