原料藥質(zhì)量研究(上海藥檢所)-文庫吧
2024-12-21 22:19 本頁面
【正文】 采用的辦法有：直接進樣、加大流速，使峰形便尖銳、從而提高峰面積積分精密度。 ★ 供試品溶液一定要全部溶解。 ★ 對于一些高沸點和低沸點的殘留溶劑，不推薦采用頂空法進樣！ ★ 盡可能建立內(nèi)標法、而非外標法。 氣相色譜法測定時應(yīng)注意事項 (2) ? 對照品溶液配制法（引申至對照品為油狀時）。 ? 直接進樣法與頂空法的優(yōu)缺點比較。 ? 定性時、多根色譜柱使用的意義。 ? 色譜柱選擇的一定要遵循“極性相似”原理。 ? 直接法進樣樣品溶液后，進樣針極易堵塞。自動進樣器時設(shè)定幾針溶劑，沖洗時多洗幾次。試驗結(jié)束后用乙醇浸泡進樣針。 容量分析法 測定含量 (1) 滴定液的標化與貯藏 ☆ 氫氧化鈉滴定液標化后一定要分成小塑料瓶、密閉包裝。使用時，酌情（針對放置時間和樣品之類）再標化一份即可。因其極易吸收空氣中的二氧化碳，使校正因子降低，消耗過多滴定液，從而使結(jié)果偏高，有時會出現(xiàn)高于 %情況。 ☆ 高氯酸滴定液應(yīng)臨用現(xiàn)標。使用當天標化三份，取均值即可。 ☆ 不常用滴定液建議購買，如甲醇鈉滴定液等。 容量分析法 測定含量 (2) 滴定液的消耗體積 ☆ 針對不同消耗體積采用不同規(guī)格滴定管 (10/26/50ml) ☆ 對于消耗量 小于誤差要求的最小體積時，可采用稀釋滴定液、增加消耗體積的辦法；或采用電位滴定儀 。 (3) 指示劑使用注意點 部分指示液配制后，如放置時間過久，其變色會遲鈍，導(dǎo)致消耗體積過大，結(jié)果偏高；故配制后酌情放入冰箱中。 容量分析法 測定含量 (4) 操作中的注意事項 對于采用指示劑法測定的操作，只要有空白試驗，樣品變色后的色澤一定要與空白色澤一致，以消除系統(tǒng)誤差。 (5) 容量分析法與 HPLC法介紹 （引申至對照品質(zhì)量標準 ） ☆ 容量分析法：專屬性差、人為因素較強；但省時省力。 ☆ HPLC法：專屬性強；但定量結(jié)果會因波長不同存在較大偏差，因雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子不同 電位滴定法 測定含量 ☆ 對于指示劑變色難以辨明時 ☆ 樣品溶液變色存在干擾（有輔料或沉淀存在等） ☆ 消耗體積很少、無法采用滴定管定量。 ☆ 雜質(zhì)和主成分對照品的標化方法。 ☆ 設(shè)定的滴定參數(shù)應(yīng)使滴定曲線呈現(xiàn)平滑，以避免滴 定終點的誤判。即如何確定合適的“閾值”：先全程滴 定，根據(jù)突躍變化情況，確定閾值后再次滴定，尤其 是進行兩個突躍點的滴定時（引申至新版藥典）。 高效液相色譜法應(yīng)用時 經(jīng)常出現(xiàn)的問題 ※ 柱溫箱一定要配制。試驗溫度建議在 3050℃ 。清洗溫度可高于試驗溫度 5℃ 。 ※ 色譜柱清洗： 對于正相、實驗結(jié)束用流動相再沖洗半小時即可。 對于反相，除非流動相采用單純的甲醇 /乙腈 水，其他所有流動相皆建議先用純水沖洗半小時（流速 ），再改用 20%甲醇沖洗半小時，隨后取下、兩頭密閉即可。絕不推薦 …… ※ 液相色譜儀：絕不建議為節(jié)約乙腈 /甲醇，而采用兩個泵，將水相與有機相分別注入混合的方式（即便配置了脫氣機）。一定要將兩相按比例混合后脫氣過濾，采用一個泵注入，且清洗時一定就清洗使用泵，不建議采用另一個泵將清洗液注入（重點講述?。? ※ 過濾膜一定要采用混相膜。 ※ 正相流動相無需過濾、混合均勻后超聲即可。 高效液相色譜法應(yīng)用時 經(jīng)常出現(xiàn)的問題 ※ 梯度洗脫時 —— 最理想方式： A相位高比例的水相兌低比例的有機相； B相為低比例的水相兌高比例的有機相； 其次 ： A相位高比例的水相兌低比例的有機相； B相皆為有機相。 絕不建議 A相位純水相、 B相位純有機相，即便質(zhì)量標準如此擬定，采用一元一次函數(shù)，將其轉(zhuǎn)換成第二種情況，否則極易出現(xiàn)基線飄動、無法準確積分的現(xiàn)象。 高效液相色譜法應(yīng)用時 經(jīng)常出現(xiàn)的問題 ※ 梯度洗脫時，必須先行測定空白溶劑峰，應(yīng)基線平穩(wěn)、溶劑峰出峰在前。 確認色譜柱內(nèi)清洗干凈后再測定樣品。 以確保有關(guān)物質(zhì)檢測時，雜質(zhì)的準確測定。 高效液相色譜法應(yīng)用時 經(jīng)常出現(xiàn)的問題 高效液相色譜法測定含量 (1) 對照品溶液配制 2份（ 2份粉末） 分別進樣 3針，計算校正因子 f=C/A，隨后計算 f的 RSD，小于%即認為 2份對照品溶液配制均無誤、且儀器已穩(wěn)定。取 f均值測定樣品。 (2) 樣品溶液亦配制 2份，每份進樣一針，兩份百分含量差值在 177。 %以內(nèi)即可。 高效液相色譜法測定含量 (3) 待全部樣品檢測結(jié)束后（無所謂 n針，即便運轉(zhuǎn)了一天、亦無須擔憂），任取一份對照溶液回進一針，計算含量（濃度），應(yīng)在理論濃度偏差的177。 %以內(nèi)，便可確保檢測過程中儀器性能的穩(wěn)定。 (4) 如原方法為內(nèi)標法，秉承藥審中心提出的“仿產(chǎn)品不是仿標準”理念，一定要改為外標法！除非前處理極為繁瑣、較易損失時。 含量測定濃度和色譜條件如何建立 ? 濃度不要與有關(guān)物質(zhì)濃度一致；一般為 1/10～1/50。便于過濾（對于制劑）、雜質(zhì)干擾減少、積分準確。 ? 色譜條件可與有關(guān)物質(zhì)不一致（如有關(guān)物質(zhì)為梯度洗脫或保留時間很長），更加科學(xué)化、人性化。 ? 波長不是最大吸收波長亦可、選用末端吸收。 ? 要注意樣品粉末占有一定體積時引起的誤差。 薄層色譜法測定有關(guān)物質(zhì) (1) 盡可能使用商品化薄層板、不建議自行鋪制。 (2) 設(shè)置梯度對照 (%、 %、 %和 %，通過點樣量來實現(xiàn)，方便快捷、事半功倍 )；實現(xiàn)“半定量”。 (3) %斑點如顯現(xiàn)不
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